不同離心處理對全自動血型分析系統檢測結果的影響

王　霞，潘　彤，楊文玲

(天津市血液中心檢驗科，天津 300110)

·經驗交流·

不同離心處理對全自動血型分析系統檢測結果的影響

王霞，潘彤，楊文玲△

(天津市血液中心檢驗科，天津 300110)

摘要:目的探討血型檢測中不同標本處理方式對BECKMAN PK7300全自動血型儀檢測結果的影響。方法選擇100例已知ABO血型標本進行3種離心處理：即3 000 r/min離心5 min(A組)、3 090 r/min離心10 min(B組)和4 000 r/min離心10 min(C組)，然后再進行ABO及Rh血型檢測。結果A、B兩組ABO及Rh血型正確判讀率均為100%，均未出現錯誤和可疑結果；C組ABO及RH血型正確判讀率分別為為79%和82%，分別出現可疑結果21和18例。結論作為全自動血型檢測系統運行的關鍵環節之一，標本處理方式的合理選擇會直接影響血型結果的準確性。

關鍵詞:全自動血型檢測系統；離心處理；ABO血型

ABO血型檢測是獻血者常規血篩檢測項目之一，已有實驗室開始使用全自動血型檢測系統。目前使用的血型儀多為開放式檢測系統，設備廠家向用戶推薦部分設備使用參數。按照《血站實驗室質量管理規范》、GBT22576-2008/ISO15189-2007《醫學實驗室質量和能力的專用要求》 、ISO/IEC15189-2007《醫學實驗室質量和能力的認可準則》及《血站技術操作規程》(2012版)的要求，血站血篩實驗室在采用一項新的檢測方法，或更換現有檢測方法時，在正式投入使用之前應對與檢測相關的參數進行確認。本文以BECKMAN PK7300全自動血型儀為例探討不同標本處理方式對血型檢測的結果是否造成影響。

1資料與方法

1.1一般資料來自本中心無償獻血者EDTA-K2抗凝血液標本100例，其中A、B、O及AB型各25例。

1.2儀器與試劑BECKMAN PK7300全自動血型儀(美國貝克曼公司)；標準A、B、O紅細胞(上海血液生物醫藥)，抗A、抗B和抗D標準抗血清(上海血液生物醫藥)； BECKMAN PK7300全自動血型分析系統配套使用P3、P4梯形微孔板。

1.3方法在已知血型標本中挑選出100例標本其中A、B、O及AB各25例，先后進行3種離心處理：(1)使用PK7300全自動血型分析系統操作指南中推薦的標本離心參數3 000 r/min離心5 min將此組設定為A組；(2)考慮到本血站酶免與血型同為一個標本管，在保證酶免的離心要求下驗證此離心條件對血型檢測是否有影響，選擇3 090 r/min離心10 min的離心參數此組設定為B組；(3)選擇本實驗室最高離心速度即4 000 r/min離心10 min作為對照組設定為C組，用以驗證指南中提及高速離心影響檢測結果的結論。

1.4統計學處理利用SPSS16.0統計軟件進行數據分析，采用多個獨立標本非參數檢驗的Kruskal-Wallis檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1BECKMAN PK7300全自動血型儀3種離心處理后ABO血型檢測結果采用BECKMAN PK7300全自動血型儀對3種離心處理后ABO血型進行檢測，并對不同組正確判讀率進行比較，三組間正確判讀率差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　　3種離心ABO檢測結果

2.2BECKMAN PK7300全自動血型儀3種離心處理后Rh血型檢測結果 采用BECKMAN PK7300全自動血型儀對3種離心處理后Rh血型進行檢測，并對不同組正確判讀率進行比較，三組間正確判讀率差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　　3種離心處理Rh檢測結果

3討論

血型的正確鑒定是血站檢驗科最重要的常規檢測之一，因為血型正確與否關系到受血者的生命安全[1]。血站質量手冊中明確規定提供給臨床的血液制品ABO及RH血型正確率必須為100%。國內大多數血站以往普遍采用U型微板聯合酶標儀的檢測方法，但該法的缺點是過程繁瑣且易受人為及外界因素的影響[2]。如反應環境的溫濕度、離心力大小及震蕩強度等，使結果出現偏差從而造成嚴重的事件。目前多種血型自動化檢測系統受到關注，BECKMAN PK7300以其自動化程度高、標準化、檢測通量大及能實現批量化[3-4]檢測等優點受到用戶的青睞。BECKMAN PK7300全自動血型檢測儀加樣精密度高、血型結果有原始圖像記錄跟蹤，保證檢測結果的可靠性和可溯性、有效降低工作強度、防止人為錯誤、提高實驗效率和正反定型判讀準確性及節約試劑成本等優點。

本研究在儀器使用前確認研究中在儀器用戶指南中注意到推薦的標本離心條件有3種：(1)轉子半徑15 cm轉速3 000 r/min離心5 min；(2)轉子半徑20 cm轉速2 500 r/min離心5 min；(3)轉子半徑30 cm轉速2 000 r/min離心5 min。為此本課題對3 000 r/min離心5 min的離心條件進行確認。試驗結果顯示此離心條件下ABO及RH血型正確判讀率均為100%。考慮到本血站的體采科的留樣現狀無法改變，在保證酶免檢測的離心要求下驗證此離心條件是否影響全自動血型儀的血型檢測，因此對3 090 r/min離心10 min的離心方式來進行驗證及確認，試驗結果顯示ABO及Rh血型正確判讀率均為100%。以上2種離心方法的檢測結果均達到血型定性試驗正確判讀率大于95%的可接受標準。為此確定3 090 r/min離心10 min作為本實驗室血型檢測的標本處理方法。此外，也對4 000 r/min離心10 min的檢測結果ABO及RH正確判讀率分別為79%和82%的原因進行了分析，可能是由于高速離心使血細胞壓得過緊以至于細胞吸樣受到阻礙，導致細胞加注過少再進行稀釋后從而影響結果判讀。3種離心處理的正確判斷率比較雖然無統計學差異，但4 000 r/min離心10 min的正確判讀率未達到血型定性試驗判讀率的要求，而且與指南推薦的參數差異較大因此離心條件不適用。綜上所述，全自動血型檢測中標本處理方式對檢測結果起到關鍵作用，應遵照廠商指南中推薦條件進行驗證，若當試驗參數有所變化時應做好檢測系統與標本前處理條件的確認與優化，以保證檢測結果的準確可靠。

參考文獻

[1]Kumar US,Ghosh K,Gupte SS,et al.Role of HLA antigens in Rh (D) alloimmunized pregnant women from Mumbai,Maharashtra,India[J].J Biosci,2002,27(2):135-141.

[2]陳顯，劉洲君，朱紹汶，等．全自動血型儀在血型檢測中的應用[J]．臨床輸血與檢驗，2014，16(3)：250-252．

[3]謝敬文，嚴康峰，馬偉文，等．數字全自動血型儀在無償獻血者血型檢測中的應用[J]．中國輸血雜志，2006，19(1)：36-37．

[4]李俊杰．手工與自動血型儀檢測ABO血型方法的比較[J]．中國實用醫藥，2011，6(8)：242-243．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.061

文獻標識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)10-1433-02

(收稿日期：2016-02-03)