內(nèi)毒素耐受對核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2信號通路的影響

張輝軍，王葆青，瞿介明

1.復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院肺科，上海 200032；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院呼吸科，上海 200025

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·論著·

內(nèi)毒素耐受對核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2信號通路的影響

張輝軍1，王葆青1，瞿介明2

1.復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院肺科，上海 200032；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院呼吸科，上海 200025

摘要：為研究內(nèi)毒素耐受對核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2(nucleotide-binding oligomerization domain containing 2，NOD2)信號通路的影響，將小鼠單核-巨噬細(xì)胞RAW264.7分為兩組，分別給予小劑量脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)(100 ng/mL)或磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline，PBS)預(yù)處理20 h，建立內(nèi)毒素耐受組和對照組。每組細(xì)胞分別給予大劑量LPS(1 000 ng/mL)或熱滅活煙曲霉孢子刺激，于刺激后0、2、6、12、24 h采用定量聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)檢測細(xì)胞NOD2、受體相互作用蛋白2(receptor-interacting protein 2，RIP2)和腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)mRNA表達(dá)；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測細(xì)胞上清液中白細(xì)胞介素8(interleukin 8，IL-8)和TNF-α濃度。結(jié)果顯示，內(nèi)毒素耐受組無論是大劑量LPS還是熱滅活煙曲霉孢子刺激均不能增加NOD2、RIP2 和TNF-α mRNA表達(dá)及細(xì)胞上清液中IL-8、TNF-α濃度；而對照組大劑量LPS和熱滅活煙曲霉孢子刺激均可提高NOD2、RIP2 和TNF-α mRNA表達(dá)及細(xì)胞上清液中IL-8、TNF-α濃度，尤以刺激后12 h增加顯著，與刺激前(0 h)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果提示，內(nèi)毒素耐受可能對NOD2信號通路有抑制作用。

關(guān)鍵詞：內(nèi)毒素耐受；脂多糖；核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域2；煙曲霉

內(nèi)毒素是革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁組分中的一種脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)，能激發(fā)過度炎癥反應(yīng)，是臨床上全身炎癥反應(yīng)綜合征或感染性休克的常見原因[1]。內(nèi)毒素耐受(endotoxin tolerance，ET)是指接受小劑量LPS刺激后形成的對后續(xù)大劑量LPS呈低反應(yīng)或無反應(yīng)的現(xiàn)象，其在動物模型和人體中均得到證實(shí)[2]。……