銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥性分析

周 星

銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥性分析

周 星

目的 探討銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥性分析。方法 抽取銅綠假單胞菌株123株，對其展開體外藥敏試驗，對耐藥率進行統(tǒng)計，而后對β-內(nèi)酰胺酶進行檢測，對比分析β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株的耐藥率。結(jié)果 經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，本組123株銅綠假單胞菌株中，檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶菌株26株，陽性率為21.14%；金屬β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株對頭孢哌酮、頭孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮／舒巴坦、頭孢他啶、哌拉西林、頭孢吡肟、亞胺培南的耐藥率分別為100.00%、100.00%、73.08%、26.92%、69.23%、76.92%、100.00%、80.77%、100.00%，均明顯高于金屬β-內(nèi)酰胺酶陰性菌株的30.93%、63.92%、10.31%、8.25%、1.03%、21.65%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物存在明顯耐藥性的主要機制為產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶，因此臨床用藥過程中，及時展開細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗的意義重大，能夠有效促進臨床合理用藥，減少耐藥性的發(fā)生。

銅綠假單胞菌；β-內(nèi)酰胺類抗生素；合理用藥；耐藥性

臨床上檢測到的銅綠假單胞菌屬于條件致病菌的一種，可對人體的各個系統(tǒng)產(chǎn)生感染，其具有相對復(fù)雜的耐藥機制，從而使其成為現(xiàn)階段臨床上所面臨的嚴(yán)峻考驗。曾有研究指出，金屬β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生是銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物存在明顯耐藥性的主要機制，從而使得臨床用藥治療的難度增加[1]。在臨床抗菌治療的過程中，對病原菌的耐藥性進行了解對于臨床合理用藥，改善療效，降低耐藥性等均具有重要意義[2]。本次研究中出于對銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥性進行分析探討，為今后的臨床治療工作中合理用藥提供可靠的參考依據(jù)的目的，對123株銅綠假單胞菌株的耐藥性以及產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶情況進行了檢測分析，現(xiàn)匯報結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究中資料來源于本院2013年1月～2014年12月收集到的123株銅綠假單胞菌株，菌株來源于本院收治的臨床確診的門診以及住院患者的痰液、膿液、分泌物、引流液以及尿液標(biāo)本。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 對收集到的123株銅綠假單胞菌株展開體外藥敏試驗，對耐藥率進行統(tǒng)計，而后對β-內(nèi)酰胺酶進行檢測，對比分析β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株的耐藥率。

1.2.2 藥敏試驗 研究中藥敏試驗采取K-B法，實驗操作依照臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會2011年的標(biāo)準(zhǔn)[3]進行，并對藥敏結(jié)果進行判斷。

1.2.3 金屬β-內(nèi)酰胺酶的檢測 β-內(nèi)酰胺酶檢測采取紙片協(xié)同法進行，金屬離子與乙二胺四乙酸絡(luò)合可使金屬酶失去活性，依據(jù)該特性，將待測菌株制備成0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木海瑢⑵渚鶆虻耐坎荚贛-H瓊脂平板上，并將2張亞胺培南紙片貼在平皿上，紙片之間的距離為2 cm，在其中1張亞胺培南紙片上加入5 μL的EDTA，結(jié)果判斷陽性標(biāo)準(zhǔn)：含EDTA的亞胺培南紙片的抑菌圈直徑相對于亞胺培南紙片增加6 cm，也就是表示該菌株可以產(chǎn)金屬酶。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件，計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 β-內(nèi)酰胺酶檢測結(jié)果 本組123株銅綠假單胞菌株中，檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶菌株26株，陽性率為21.14%。

2.2 藥敏試驗結(jié)果 研究中對銅綠假單胞菌對臨床常用的

12種抗菌藥物的耐藥性進行了檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌對氨曲南、慶大霉素、頭孢哌酮的耐藥率超過了40%，而對頭孢曲松的耐藥率則超過了70%，銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮／舒巴坦等抗菌藥物的耐藥率則不足30%。見表1。

2.3 β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗結(jié)果對比 金屬β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株與陰性菌株對頭孢哌酮、頭孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮／舒巴坦、頭孢他啶、哌拉西林、頭孢吡肟、亞胺培南的耐藥率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；對氨曲南、慶大霉素、左氧氟沙星的耐藥率比較，差異

3 討論

銅綠假單胞菌為臨床上十分常見的一種條件致病菌，研究發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌可以誘發(fā)機體多系統(tǒng)、多臟器、多部位的感染。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，在呼吸科多數(shù)老年患者的體質(zhì)虛弱，存在慢性疾病基礎(chǔ)，抵抗力較低，因此多長期住院治療，從而導(dǎo)致患者機體的微生態(tài)失衡，造成體內(nèi)菌群失調(diào)，這就為銅綠假單胞菌的生長和繁殖創(chuàng)造了良好的條件[4]。曾有文獻報道，銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性明顯，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，其可能與其產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)[5-6]。本次研究中出于對銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥性進行分析探討，為今后的臨床治療工作中合理用藥提供可靠的參考依據(jù)的目的，對我院收集到的123株銅綠假單胞菌株的耐藥性以及產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶情況進行了檢測分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌對氨曲南、慶大霉素、頭孢哌酮的耐藥率超過了40%，而對頭孢曲松的耐藥率則超過了70%，銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮／舒巴坦等抗菌藥物的耐藥率則不足30%；123株銅綠假單胞菌株中，檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶菌株26株，陽性率為21.14%，并且金屬β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株與陰性菌株對頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢哌酮／舒巴坦、亞胺培南、哌拉西林、頭孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮的耐藥率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；對氨曲南、左氧氟沙星、慶大霉素的耐藥率比較則差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這一結(jié)果與相關(guān)文獻報道結(jié)果一致[7-8]，由此證實了，銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物存在明顯耐藥性的主要機制為產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶，因此臨床用藥過程中，及時展開細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗的意義重大，能夠有效促進臨床合理用藥，減少耐藥性的發(fā)生。

[1] 余廣超,徐霖,袁廣卿，等.亞胺培南耐藥銅綠假單胞菌的金屬β-內(nèi)酰胺酶檢測［J］.中國抗生素雜志,2011,36(3):223-225．

[2] 張娟,葉聰秀，曹開源，等.耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌金屬β-內(nèi)酰胺酶基因檢測及其與整合子的關(guān)系研究[J].中國抗生素雜志,2013,38(9):705-710．

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湖南 411400 湘鄉(xiāng)市人民醫(yī)院檢驗科 （周星）無統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

表1 123株銅綠假單胞菌株藥敏試驗結(jié)果統(tǒng)計

抗菌藥物敏感(n)敏感率(%)耐藥(n)耐藥率(%)氨曲南7056.915343.09慶大霉素7157.725242.28頭孢哌酮6754.475645.53頭孢曲松3528.468871.54哌拉西林/他唑巴坦9476.422923.58阿米卡星9879.672520.33頭孢哌酮／舒巴坦10484.551915.45頭孢他啶8266.674133.33左氧氟沙星8065.044334.96哌拉西林7863.414536.59頭孢吡肟7863.414536.59亞胺培南9778.862621.14

表2 β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗結(jié)果對比[n(%)]

抗菌藥物金屬酶陽性（n=26）金屬酶陰性（n=97）χ2值P值敏感耐藥敏感耐藥氨曲南15（57.69）11（42.31）55（56.70）42（43.30）0.00820.3982慶大霉素14（53.84）12（46.16）57（58.76）40（41.24）0.20310.4412頭孢哌酮0（0）26（100.00）67（69.07）30（30.93）39.44510.0212頭孢曲松0（0）26（100.00）35（36.08）62（63.92）13.11270.0276哌拉西林/他唑巴坦7（26.92）19（73.08）87（89.69）10（10.31）44.83280.0187阿米卡星19（73.08）7（26.92）89（91.75）8（8.25）5.04840.0421頭孢哌酮／舒巴坦8（30.77）18（69.23）96（98.97）1（1.03）67.88970.0243頭孢他啶6（23.08）20（76.92）76（78.35）21（21.65）28.18950.0194左氧氟沙星15（57.69）11（42.31）65（67.01）32（32.99）0.78300.3287哌拉西林0（0）26（100.00）78（80.41）19（19.59）57.14640.0102頭孢吡肟5（19.23）21（80.77）73（75.26）24（24.74）27.74200.0113亞胺培南0（0）26（100.00）97（100.00）0（0）123.00000.0098

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.13.102