凌勵 李海云
類抗-Ce自身抗體引起配血不合鑒定及輸血分析
凌勵 李海云
目的 對1例臨床自身免疫性溶血性貧血患者標本血清抗體進行鑒定,做出準確的輸血指導,保障臨床輸血有效。方法 采用血型血清學進行ABO血型正反定型試驗,直接抗人球蛋白試驗,間接抗人球蛋白試驗,抗體鑒定試驗,吸收放散試驗,最后進行交叉配血。結果 在患者血清中發現自身類抗-Ce抗體,并成功進行配合性輸血。結論 對于臨床疑難標本,應該認真分析,查找原因,最后實現配合性輸血,提高臨床用血安全。
抗-Ce;自身抗體;交叉配血
患者,女,74歲,漢族,自身免疫性溶血性貧血,輸血6次;妊娠史3次,流產1次,存活子女1個;藥物史,無;總膽紅素:105 mmol/L,血小板計數220×1012/L,血紅蛋白:41 g/L.抗體篩查陽性,存在不規則抗體,進一步檢測確認患者血清及放散液中檢出類抗-Ce類同種特異性自身抗體。現報道如下。
KA-2200型離心機(日本久保田)、FYQ型免疫微柱孵育器(長春博研)、數字顯示式恒溫水浴箱(上海一恒)、TD-3 A型血型血清學用離心機(長春博研)、Baso 2005-1離心機(臺灣貝索)。紅細胞試劑(北京金豪);IgM型抗-D血清、IgG型抗-D血清、標準抗-A、抗-B血清、抗人球蛋白、抗-IgG、抗-C 3d、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗人球蛋白試劑、篩選細胞、國產譜細胞(上海血液生物醫藥有限責任公司);進口譜細胞由Sanquin供;RH血型分型卡、抗人球蛋白卡(長春博迅);生理鹽水(河南華利制藥公司);AB血漿(本實驗室自制)。所有試劑均在有效期內使用。血型定型法、抗體篩選與鑒定、吸收放散試驗等按文獻[1-2]方法操作。
2.1 紅細胞血型 ABO血型為B,Rh血型為CCDee。
2.2 直抗試驗 多抗3+s,單抗IgG 3+s,單抗C 3陰性。
2.3 不規則抗體鑒定 患者血清與譜細胞進行檢測,結果顯示為鹽水全陰性,繼續做lissIAT,各試驗結果見表1,同時患者血清進行進口凝膠卡試驗,見表2。
2.4 患者紅細胞放散試驗 患者紅細胞洗滌3次后,與等量生理鹽水和2倍乙醚放散。放散液與國產譜細胞進行經典IAT法檢測。見表1。
2.5 交叉配血試驗 患者與B型ccDEE獻血者進行交叉配血鹽水介質中無凝集無溶血,聚凝胺和抗球蛋白介質中均由弱凝集無溶血現象。
2.6 患者血清與B型ccDEE獻血者紅細胞進行吸收放散試驗 B型ccDEE獻血者紅細胞1 mL加入3倍患者血清,放入37℃ 30 min進行吸收,然后立即3 400轉離心1 min,分離出血清(標記為“吸收后血清”),余下紅細胞用生理鹽水進行3洗,之后加入等量生理鹽水和2倍乙醚放散。將此放散液及吸收后血清分別與進口譜細胞中1、3、4、6號進行經典IAT檢測,在患者血清中檢出抗-Ec、抗-Ec類同種自身抗體,在放散液中檢出抗-Ec同種特異性自身抗體。證明患者血清中含有特異性及類特異性抗-Ec自身抗體。見表2。

表1 患者血清、患者紅細胞放散液與國產譜細胞反應結果

表2 患者血清、患者被吸收后血清、獻血者紅細胞放散液與進口譜細胞反應
2.7 交叉配血 選擇ccDEE型獻血者血液標本進行交叉配血,結果為主側1+的弱凝集,無溶血。可以為患者緊急情況下,挽救生命之用血。
患者紅細胞血型為B型RhD陽性,不規則抗體鑒定結果顯示患者血清中含有不規則抗體,血液交叉配血試驗鹽水介質法主側、次側均無凝集溶血,凝聚胺介質法主側、次側均凝集。經進一步檢測發現Rh表現型為CCDee,血清和放散液中均檢出血型抗體,并具有抗-Ce特異性。由于抗體特異性和自身血型結果相矛盾,患者又無近期輸血史,因此考慮該抗體可能為類同種特異性自身抗體。使用“dccEE”型抗原的紅細胞對血清中的抗體做吸收放散,發現該抗體可以被缺乏“Ce”抗原的紅細胞所吸收并放散,所以證實該抗體為類抗Ce特異性自身抗體。根據文獻資料[3]顯示,Rh血型系統是至目前為止紅細胞血型系統最為復雜的血型系統,它包括從RH 1-RH 53總共46個抗原,C、c、D、E、e是其中最為重要的抗原,抗C常與抗e共存于同一血清內[4]。抗-Ce在一般人群中少見,為IgG抗體,在抗球蛋白介質、酶介質與聚凝胺介質中起反應。倘若體內抗-Ce陽性患者輸注攜帶Ce抗原全血或成分血可導致嚴重的溶血性輸血反應。因此,應引起高度重視。在臨床輸血過程中,倘若患者體內含有抗Ce,應該給予輸注Ce抗原陰性全血或/和成分血。結合患者血清中檢出抗-Ce自身抗體,且抗球蛋白試驗陽性,追問患者此前有一次輸血史、無貧血史及免疫性疾病史,推測引起該患者貧血的原因可能是由于抗Ce自身抗體破壞紅細胞導致溶血造成的,即自身免疫性溶血性貧血(溫抗體型)。臨床上根據是否有明確的發病原因將自身免疫性溶血性貧血分為原發性自身免疫性溶血和繼發性自身免疫性溶血,后者多繼發于淋巴系統惡性疾病、結締組織性疾病、細菌病毒。Ce復合抗原的識別,為抗C在與dCE編碼的產物反應時與DCe和dCe編碼的產物反應不同提供了解釋。最原始的抗Ce是從一位經免疫的婦女血清中發現的,其表型為DccEE,其中的抗e可被Dce或dccee的細胞吸收。在RHD陽性個體中,大部分經免疫產生的抗C是抗Ce,而抗C和抗Ce血清中一般都含有抗Ce。抗Ce能引起新生兒溶血病,并需換血治療。同時它可引起你溶血性輸血反應。其他還有一些在臨床上具有意義的抗Ce,但常被鑒定為抗C。有一位DCCee婦女產生的抗Ce是IgA型的,該抗體造成了自身溶血性貧血[5-7]。
總之,本研究認為受血者(患者)抗體篩查必須作為常規檢驗,以便于不規則抗體的檢出。對于抗體篩查陽性的患者,應詳細了解病史,同時進行抗體鑒定,用多種介質加以驗證,分析不規則抗體產生的原因。及時與經治醫師溝通,確保臨床輸血安全性與有效性。
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Objective To identify the serum antibody in a case of autoimmune hemolytic anemia, and to make a correct guidance for the transfusion of blood transfusion. Methods The blood group serology of ABO blood group typing test, direct antiglobulin test, indirect anti human globulin test, antibody test, absorption elution test. Finally, cross matching of blood. Results Anti-Ce antibodies were found in the serum of patients, and with the success of the matching of blood transfusion. Conclusion For clinical dif f cult samples, it should be carefully analyzed to f nd out the reasons, and f nally to achieve the cooperation of blood transfusion, improve the clinical use of blood safety.
Anti Ce; Antibody cross; Matching blood
10.3969/j.issn.1009-4393.2016.35.022
河南 473000 河南省南陽市中心血站 (凌勵 李海云)