大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥性研究

張美玲　丁健芳　邱淼林

【摘要】 目的：探究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥性的研究。方法：收集筆者所在醫院2012年7月-2014年6月住院患者的標本，采用梅里埃vitek 2 compact全自動微生物分析儀對大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進行鑒定并行藥敏試驗，探討大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥性變化。結果：近兩年來，產ESBLs大腸埃希菌的檢出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的檢出率由20.0%下降到12.9%；大腸埃希菌平均耐藥率為0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐藥率為2.06%，兩者均呈上升趨勢；產ESBLs多耐腸桿菌科菌株仍對亞胺培南保持高度敏感性，但是非產ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趨勢較為顯著。結論：產ESBLs的大腸埃希菌檢出率呈上升趨勢，肺炎克雷伯菌檢出率呈下降趨勢；但非產ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌。因此，院內應根據檢測結果指導臨床合理、逐級選用抗菌藥物，并加強多重耐藥菌監測，防止交叉感染。

【關鍵詞】 超廣譜β-內酰胺酶； 亞胺培南； 碳青霉烯酶； KPC酶

中圖分類號 R446.1 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2016）8-0051-03

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.8.028

近兩年來，福建省人民醫院因肛腸科大量送檢膿液和分泌物標本，使醫院臨床檢出的細菌分布始終以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主，并常檢出產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的多藥耐藥菌株及耐亞胺培南的廣泛耐藥菌株。隨著亞胺培南在臨床中的廣泛使用，對亞胺培南耐藥的菌株快速增加，目前，國內外均有報道肺炎克雷伯菌對碳青酶烯類抗菌藥物的耐藥現象[1]。近年來研究指出，產ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌已成為臨床最常見的多重耐藥菌[2]。為探究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥性變化情況，為臨床醫生提供合理選擇抗生素依據，控制耐藥菌擴散，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 標本選擇

選取福建省人民醫院2012年7月-2014年6月住院患者標本分離的大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌。

1.2 儀器與試劑

儀器為梅里埃vitek 2 compact全自動微生物鑒定分析儀，GN13檢測卡，由法國生物梅里埃公司生產。標準菌株為大腸埃希菌ATCC25922，培養基由鄭州安圖生物工程有限公司提供。

1.3 菌株分離與鑒定

選取臨床標本，按照常規方法分離菌株，嚴格按照衛生部檢驗操作規程進行。獲純培養后采用梅里埃vitek 2 compact全自動微生物鑒定分析儀對病菌菌種進行鑒定，并做藥物敏感試驗。菌株鑒定由檢驗科經驗豐富的醫師嚴格按照操作說明進行。

2 結果

2.1 產ESBLs菌株檢出情況

近兩年來，產ESBLs大腸埃希菌的檢出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的檢出率由20.0%下降到12.9%，詳見表1。

2.2 大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥情況

近兩年來，大腸埃希菌平均耐藥率為0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐藥率為2.06%，兩者均呈上升趨勢，詳見表2。

2.3 產ESBLs與非產ESBLs的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥情況

近兩年來，產ESBLs多耐腸桿菌科菌株仍對亞胺培南保持高度敏感性，但是非產ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趨勢較為顯著，詳見表3。

3 討論

研究指出，醫院內臨床檢出率最高病菌為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，主要原因為檢查分泌物和膿液標本增加，兩種病菌檢出率約占整個病菌50%[3]。本次研究得出，近兩年來，產ESBLs大腸埃希菌檢出率呈逐年上升趨勢，2014年上半年檢出率達到45.0%，而產ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率呈逐年下降趨勢，由20.0%下降為12.9%。兩者檢出率總和雖占主要臨床主要檢出率，但表明產ESBLs大腸埃希菌檢出率呈上升趨勢，而產ESBLs肺炎克雷伯菌檢查率呈下降趨勢。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為產超廣譜β-內酰胺酶的代表病株，近年來隨著大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌臨床檢出率增加，產ESBLs的多耐藥菌株也隨之增加。臨床研究指出，亞胺培南對ESBLs革蘭氏陰性桿菌有強效殺滅作用，被作為控制多重耐藥菌的最后防線[4]。因此，亞胺培南是臨床中作為治療ESBLs和頭孢菌素酶（AmpC）等多重耐藥菌株的首選藥物[5]。但亞胺培南在臨床中應用不合理，導致部分細菌產生可水解β-內酰胺類抗生素的碳青霉烯酶，消滅藥物作用，從而產生耐藥性，同時也導致耐碳青霉烯酶類腸桿菌科呈上升趨勢。本次研究得出，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥性均呈上升趨勢，分別為0.12%、2.06%；產ESBLs多耐腸桿菌科菌株對亞胺培南保持高度敏感性，但非產ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趨勢較為顯著。

腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機制較為復雜，結合國內外研究總結主要為以下原因：（1）產生碳青霉烯酶，如VIM型、IMP型金屬酶及KPC型碳青霉烯酶等；（2）AmpC酶和/或ESBL在過度表達的同時導致外膜孔蛋白嚴重丟失；（3）外排泵呈高表達形成膜屏障作用[6]；（4）藥物靶位改變。但大量研究指出，產碳青霉烯酶為腸桿菌科細菌對碳青霉烯酶類耐藥最主要的機制[7-9]。但研究表明，我國對亞胺培南耐藥大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌主要為肺炎克雷伯菌所產生的碳青霉烯酶（KPC）[10]。KPC可抵抗碳青霉烯類抗生素的殺菌作用，且可將該酶基因編碼于線粒體上，KPC編碼質粒可單獨或在細菌細胞間轉移引起碳青霉烯類耐藥。

綜上所述，腸桿菌科細菌檢出率呈逐年上升趨勢，并對亞胺培南耐藥性逐年升高，給臨床抗生素治療感染性疾病帶來嚴重挑戰。對于感染患者，臨床醫師應及時送檢標本進行細菌培養鑒定，并根據藥敏試驗進行抗生素選擇，降低耐藥性。同時臨床中應加大對各種細菌進行抗菌藥物分析，根據研究結果指導臨床醫師對抗生素的選擇。最后，加強多重耐藥菌監測和防控，減少耐藥菌株產生與擴散。

參考文獻

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（收稿日期：2015-11-13）