化學發光免疫分析法檢測血清中前列腺特異抗原復合物

周友俊 李嬌霞 程繪珺 楊喬芬 何美瓊 郭麗萍 鄧智勇

摘 要 采用雜交瘤技術構建抗前列腺特異抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶（Prostate specific antigen -α1-antichymotrypsin complex，PSA-ACT）單克隆抗體（單抗）細胞株，共獲得8株穩定分泌PSA-ACT單抗的細胞株，純化后進行免疫特性鑒定并做單抗配對。選擇其中一對單抗，采用辣根過氧化物酶（HRP）催化魯米諾（lumino）-H2O2 化學發光體系，建立了測定人血清中PSA-ACT濃度的化學發光酶免疫分析方法（CLEIA）。對包被緩沖液、包被抗體濃度、酶標抗體稀釋度、溫育時間、發光反應時間和免疫反應步驟等實驗參數進行了優化。在最佳實驗條件下， PSA-ACT濃度在5～40 ng/mL范圍內線性關系良好（R2=0.9943），檢出限為0.53 ng/mL，批內相對標準偏差（RSD）為4.6%～6.6%，批間RSD為5.7%～8.0%，回收率為95.4%～104.2%，與游離前列腺特異性抗原F-PSA的交叉反應率為0.6%。本方法簡單、穩定、靈敏、快速，為開發檢測PSA-ACT的CLEIA試劑盒奠定了基礎。

關鍵詞 前列腺特異抗原； 前列腺癌； 化學發光酶免疫分析； 辣根過氧化物酶