無償獻血人群HIV初篩反應性樣本的確認結果分析

聶湘輝

(河源市中心血站，廣東河源517000)

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無償獻血人群HIV初篩反應性樣本的確認結果分析

聶湘輝

(河源市中心血站，廣東河源517000)

摘要:目的探討無償獻血者人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體酶聯免疫吸附試驗（ELISA）初篩反應性結果與免疫印跡確認試驗（WB）結果的關系。方法收集2013年6月-2015年6月本血站常規ELISA初篩檢測HIV結果為反應性的73份無償獻血者血漿，進一步行WB確認試驗，對比分析初篩和確認結果。結果經WB確認，23份HIV雙試劑反應性樣本中確認陽性16份，陽性符合率為21.9%（16/73），單試劑反應性樣本確認結果均為陰性。隨著ELISA初篩檢測S/CO值的增大，初篩結果與WB確認結果符合率增加。S/CO比值為1～6時，與WB確認結果陽性符合率為0%（0/25）；S/CO值為6～10時，與WB確認結果陽性符合率為13.8%(4/29)；S/CO值>10時，與WB確認結果陽性符合率為63.2%(12/19)。結論無償獻血者HIV ELISA初篩結果存在一定假陽性結果，HIV檢測結果報告及獻血者的管理可參照WB確認結果及ELISA初篩S/CO值。

關鍵詞：人類免疫缺陷病毒；酶聯免疫吸附試驗；免疫印跡確認試驗

艾滋病是一個全球性的疾病，病死率高，傳染性強，其病原體為人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)。輸血是HIV病毒傳播的主要途徑之一。由于缺乏有效的HIV疫苗和抗HIV藥物，切斷HIV傳播途徑，準確檢測艾滋病和攜帶者是目前防治HIV感染的重要手段。檢測HIV的主要方法有HIV抗體檢測，包括初篩試驗和確認試驗。目前初篩試驗普遍采用高敏感性和特異性的第四代酶聯免疫吸附（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）試劑檢測，即同時檢測HIV抗原和抗-HIV1+2。HIV初篩反應性結果需進一步確認試驗，常采用免疫印跡確認試驗（western blot，WB）。無償獻血人群中HIV感染率低，HIV初篩假陽性率較高[1]，易造成血液資源的浪費及獻血者的流失。本研究擬通過分析本站收集的HIV初篩檢測結果為反應性的73份血漿的WB確認試驗結果，探討無償獻血者HIV ELISA初篩結果與WB確認結果的關系，現報告如下。

1　材料與方法

1.1研究對象收集2013年6月至2015年6月期間本血站采集的29816份無償獻血者血漿，進行HIV常規ELISA初篩檢測。ELISA初篩檢測結果為反應性的73份樣本送河源市疾病預防控制中心（CDC）進一步做WB確證試驗。

1.2主要儀器與試劑法國伯樂試劑采用夾心兩步法檢測血漿中HIV抗原和HIV1、HIV2相關各種抗體，檢測儀器：Tecan RSP 100-8全自動加樣儀完成加樣、BEPIII全自動酶免分析儀；英科新創試劑采用雙抗原夾心兩步法檢測血漿中HIV1/ HIV2抗體，檢測儀器：UranusAE150全自動酶免儀。質控品由北京康徹思坦生物技術有限公司提供。以上試劑和質控品均經國家食品藥品監督管理局注冊，檢定合格，且在有效期內使用。

1.3實驗方法

1.3.1初篩試驗依照各試劑使用說明書及《血站實驗室質量管理規范》要求，每個樣本采用上述兩種不同ELISA試劑由不同操作人員在同一時間檢測。判定標準：任一種試劑樣本結果S/CO<1則判定該樣本為無反應性；S/CO值≥1時，用同種試劑做3孔復檢，復檢3孔均有S/CO值≥1則判為反應性，以3孔檢測S/CO均值為統計值（排除試驗操作原因后復檢3孔S/CO值相差較大，判定結果不一致的樣本被剔除）。

1.3.2確證試驗參照中國疾病預防控制中心《全國艾滋病檢測技術規范》[2](2004年)以及試劑說明書。HIV-1抗體陽性標準：至少有2條ENV帶(gp160/gp120和gp41)出現，或者至少1條ENV帶和p24帶同時出現。HIV-2抗體陽性標準：出現至少2條ENV帶(gp140/gp105和gp36)（符合WHO陽性判斷標準），同時符合試劑盒提供的陽性判定標準。HIV抗體不確定標準：出現HIV抗體特異帶，但不足以判定陽性。HIV抗體陰性標準：無HIV抗體特異帶。

1.4統計方法計數資料采用卡方檢驗，應用SPSS 11.0統計軟件對比分析兩種ELISA初篩結果與確認結果，以a=0.05為檢驗水準，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1 ELISA初篩檢測反應性樣本的WB確認結果分析ELISA初篩檢測結果為反應性共73份樣本，法國伯樂、英科新創試劑檢測反應性樣本分別為54份、42份。其中雙試劑反應性樣本23份中經WB確證結果陽性16份，陽性符合率為21.9%（16/ 73），單試劑反應性樣本經WB確證結果均為陰性。經統計分析兩種初篩試劑檢測HIV的WB確證陽性率無顯著性差異（χ2=0.762，P=0.383）。見表1。

表1　ELISA初篩檢測反應性樣本的WB確認結果分析

2.2 ELISA初篩檢測S/CO比值與WB確認結果的關系隨著ELISA初篩檢測S/CO值的增大，初篩結果與WB確認結果符合率增加。S/CO比值為1～6時，與WB確認結果陽性符合率為0%（0/25）；S/ CO值為6～10時，與WB確認結果陽性符合率為13.8%(4/29)；S/CO值>10時，與WB確認結果陽性符合率為63.2%(12/19)。WB結果陽性的16份樣本S/CO比值均>6，S/CO比值<6樣本WB結果均為陰性，見表2。

表2　S/CO比值分布與WB確證試驗結果

3　討論

1981年全球首例艾滋病病毒感染患者被發現以來，全世界各地區均有HIV流行，已成為重大的社會問題和公共衛生問題。我國HIV感染出現由高危人群轉向普通人的流行趨勢[3]，這樣對我們輸血工作造成了很大的壓力。為確保血液安全，采供血機構選用較高靈敏度和特異性的初篩試劑尤為重要。本站選用法國伯樂、英科新創兩種不同ELISA試劑篩查HIV，如任一試劑出現反應性結果將報廢其血液及屏蔽淘汰其獻血者資格。

本研究收集的無償獻血者29816份樣本中，法國伯樂、英科新創試劑檢測反應性樣本分別為54份、42份，陽性率分別為0.18%、0.14%，與WB確認結果陽性符合率分別為29.6%（16/54）、38.1% （16/42），兩種試劑WB確證陽性率無顯著性差異（χ2=0.762，P=0.383）。ELISA初篩檢測結果為反應性共73份樣本中，WB確證陽性16份，均為初篩雙試劑[4]反應性樣本。提示本站將來擬采取一遍ELISA加一遍核酸[5]的檢測模式思路可行，可以減少血液篩查成本。HIV抗體ELISA初篩反應性結果與WB的陽性符合率為21.9%（16/73），假陽性率為78.1%（57/73），與呂蓉[6]曾報道血站初篩檢測結果假陽性率基本一致。

本研究中S/CO值1～6，與WB陽性符合率為0%，S/CO值6～10，陽性符合率為13.8%，S/CO值> 10，陽性符合率為63.2%，WB結果陽性的16份樣本S/CO值均>6，S/CO值<6樣本WB結果均為陰性。結果與李英輝[7]曾報道相符合，隨ELISA檢測結果S/CO值的增高，與WB確證試驗的陽性符合率也相應增高。報廢假陽性結果血液易造成血液資源的浪費，屏蔽其獻血者資格導致獻血者流失，這些問題與獻血安全的矛盾一直是采供血機構研究的重點。孫昂[1]曾提出將HIV初篩結果S/CO值≥6.23時，報廢血液同時淘汰獻血者資格，對于S/CO值<6.23時，僅報廢本次血液，并且對獻血者定期隨訪、復查，最后確定淘汰或者追回。為避免初篩假陽性的結果而造成血液資源的浪費和獻血者的流失，HIV檢測結果報告及獻血者的管理可參照S/CO值及WB確認結果這種模式可以借鑒[8]。

綜上所述，本血站采取以篩查為目的的HIV檢測策略，根據HIV初篩結果報廢血液可以最大程度的防止其經輸血途徑傳播[9]。HIV檢測結果報告及獻血者的管理[10]則以WB確認結果為主，同時參照ELISA檢測S/CO值大小，定期隨訪、復查，可以保護獻血者的利益及減少獻血者的流失。

參考文獻

[1]孫昂，王華洪.獻血者ELISA法篩查HIV反應性強度與WB確證陽性的相關性研究[J].實用預防醫學，2011，18(7)：1335-1337.

[2]全國艾滋病檢測技術規范[S]. 2004：3-11.

[3]謝進榮，張興明，王淑芳，等.第3代和第4代HIV檢測試劑對無償獻血人群篩查結果比較[J].中國輸血雜志，2012，12(25)：1326-1327.

[4]熊麗紅，錢榕，樊璐.四種HIV試劑的應用比較分析[J].實驗與檢驗醫學，2013，31(4)：392－393.

[5]徐晶.核酸檢測技術在南昌地區無償獻血血液篩查中的應用[J].實驗與檢驗醫學，2012，30(5)：437－438.

[6]呂蓉，王倫善，盛琪琪，等.無償獻血者HIV－1抗體蛋白印跡確認與核酸檢測結果分析[J].臨床輸血與檢驗，2012，14(04)：308－310.

[7]李英輝，楊巍，王濤，等.無償獻血者ELISA法篩查HIV反應性標本與免疫印跡法檢測結果[J].臨床醫藥文獻雜志，2015，2(7)： 1287－1288.

[8]曾婀娜，李錫蘭.對血液篩查單試劑陽性獻血者保留獻血資格的探討[J].實驗與檢驗醫學，2013，31(4)：386－387.

[9]賈清，馬韶輝，汪春翔，等.青海省2007－2011年HIV檢測篩查實驗室確證符合率分析[J].中國艾滋病性病，2012，19(8)：568－570.

[10]施清蓉，劉秀玲，劉偉.探討醫院信息管理系統在合理、安全輸血中的作用[J].實驗與檢驗醫學，2012，30(6)：586－58.

·輸血與檢驗·

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(收稿日期2015－12－10；修回日期2016－02－04)

基金項目：廣東省河源市社會發展科技計劃項目，項目編號20158081

DOI：10.3969/j.issn.1674-1129.2016.02.043

中圖分類號：R457.1+2，R512.91，R193.3

文獻標識碼：A

文章編號：1674-1129(2016)02-0244-02