常用農藥對拮抗木霉菌的生長抑制作用

張愛民，邢丹，蓬桂華，韓世玉，付文婷(貴州省辣椒研究所，貴陽，550006）

?

常用農藥對拮抗木霉菌的生長抑制作用

張愛民，邢丹，蓬桂華，韓世玉，付文婷
(貴州省辣椒研究所，貴陽，550006）

摘要：選用24種常用農藥配成一定濃度的含藥PDA培養基，以不加農藥的PDA培養基為對照，接種木霉菌株菌餅，測定木霉菌株的生長速率，計算農藥對木霉菌株的生長抑制率，并以此為依據通過SPSS聚類分析對農藥進行分類，研究24種常用農藥對拮抗木霉菌株生長的影響。研究結果表明，不同類型農藥對木霉菌的生長抑制作用存在一定差異，抑制作用大小依次為殺菌劑〉除草劑〉殺蟲劑，作用最強的為多菌靈、多抗霉素、甲基硫菌靈，其對4個木霉菌株生長抑制率均為100%；作用最弱的是霜霉威鹽酸鹽，對4個菌株的平均抑制率為_4.06%，表現出一定的促進作用。聚類分析結果顯示，當距離值為5.45時，24種農藥可劃分為4類。

關鍵詞：常用農藥；木霉菌；聚類分析

張愛民（1984_），女，碩士，助理研究員，主要從事辣椒病害防治研究，電話：13639037031，E_mai1：zhangaimin99@126.com

付文婷（1984_），女，通信作者，助理研究員，從事辣椒栽培與育種研究，E_mai1：279067072@qq.com

木霉菌廣泛存在于土壤中，生存能力強、適應性廣，對植物病原真菌具有拮抗作用[1]，其重要的開發價值引起人們極大的興趣和注意，但生防菌劑在使用過程中往往受到環境條件等因素的干擾[2]，造成田間防治效果不穩定，原因之一可能是長期施用農藥對生防菌生長有一定抑制作用。關于殺菌劑對木霉菌生長發育的影響研究較廣泛，研究結果表明殺菌劑對木霉菌株均存在不同程度的生長抑制作用[3～5，7，8]。另外，也有研究表明，某些木霉菌株與化學殺菌劑聯合使用，效果往往優于單獨使用生防菌或化學藥劑[4，5]，這可能是因為在一定條件下化學藥劑有助于保持或增強生防菌的競爭活力，削弱病菌的侵染活性，提高生物防治效果，從而實現化學防治與生物防治的協同作用[6]。統計前人研究情況，殺菌劑對木霉菌生長影響的研究較多，而殺蟲劑及除草劑對木霉菌影響的研究較少，但在實際生產中殺蟲劑和除草劑的用量并不低于殺菌劑。為探明不同類型農藥對拮抗木霉菌生長的影響，選用常用的24種農藥，對4株拮抗木霉菌進行了室內毒力測定，以期為木霉菌在生物防治及其與化學藥劑協同應用中奠定基礎。

1　材料與方法

1.1拮抗木霉菌

Tr23、Tr26、Tr41、Tr42為貴州省辣椒研究所鑒選的對辣椒疫霉菌有良好拮抗效果的木霉菌株。

1.2常用農藥

見表1。

1.3生長速率法

以PDA培養基為基礎培養基，經高溫滅菌后，冷卻至50℃左右加入一定量的農藥，配制成農藥使用說明中標注的最大使用濃度的含藥培養基，以不加農藥的培養基為對照。在生長旺盛的木霉菌落同一半徑上打直徑6 mm的菌餅，接種至含藥培養基上，28℃下黑暗培養3 d，采用“十”字交叉法測定菌落直徑，計算生長抑制率，生長抑制率(%）=[(對照菌落直徑_處理菌落直徑）/對照菌落直徑]×100%。

1.4數據處理

采用Exce1計算農藥對拮抗木霉菌的生長抑制率并作圖，采用SPSS 20.0進行聚類分析，其中數據標準化轉換選用Z得分，距離選用歐式距離，聚類方法選用離差平方和法。

表1　常用農藥

2　結果與分析

2.1常用農藥對拮抗木霉菌的生長抑制率

由圖1可見，不同類型農藥對菌株的生長抑制率存在較大差異，總體來看，對木霉菌株的生長抑制作用以殺蟲劑最小、殺菌劑最大。

殺蟲劑中吡蟲啉的生長抑制作用最小，平均抑制率僅1.82%，噻嗪·殺撲磷抑制作用最大，平均抑制率66.92%；除草劑中生長抑制作用最強的是百草枯，平均抑制率91.31%，對Tr26、Tr41的抑制率為100%，其次為乙草胺，對各菌株的抑制率相當，平均值79.82%，最小的是芐嘧·苯噻酰，平均抑制率僅11.46%；殺菌劑中除霜霉威鹽酸鹽的抑制率均較低外，其余各種藥劑對所有菌株或某種菌株均有較強的抑制作用，尤其是多菌靈、多抗霉素、甲基硫菌靈對4個木霉菌株的生長抑制率均為100%。

另外，吡蟲啉、芐嘧·苯噻酰、霜霉威鹽酸鹽對Tr26及代森錳鋅對Tr26、Tr41的生長抑制率均為負值，是否說明上述藥劑對該菌株有生長促進作用，需做進一步試驗以驗證。

圖1　常用農藥對4個木霉菌株的生長抑制率

2.2常用農藥的聚類分析

由圖2可以看出，當距離為5.45時，可將24種藥劑分為4類，第1類包括17、18、16、11、13、24、20、7、8號；第2類包括19、22、21號；第3類包括9、12、10號；第4類包括2、6、3、4、5、1、15、14號。結合圖1來看，第1類藥劑對4個木霉菌株的生長抑制作用均較強，并且抑制率相當；第2類藥劑對Tr23、Tr42菌株抑制作用較強，而對Tr26、Tr41作用較弱；第3類藥劑對各菌株的作用與第2類相反；第4類藥劑對各菌株的抑制作用均較弱。

從以上結果還可看出，4類藥劑并不是簡單地按照農藥類型進行區分，在抑制作用較強的藥劑中不僅包含大部分殺菌劑，還包括7、8號2種殺蟲劑，以及11、13號2種除草劑；同樣的在第4類藥劑中，除大部分殺蟲劑外，14號除草劑及15號殺菌劑對各菌株的抑制作用均較弱；而第2類和第3類藥劑對各菌株的作用有一定差異，但從平均值來看，它們的抑制作用居于中間水平。

3　討論與結論

3.1同種藥劑對不同菌株的生長抑制作用

不同菌株對同一藥劑的反應不盡相同，以多菌靈為例，王進忠等[7]所用的木霉菌株在多菌靈作用下生長完全被抑制；而宋敏等[8]研究發現，當多菌靈濃度超過600倍液時，對綠色木霉無抑制作用，即使濃度為100倍液時，生長抑制率也僅為54.6%；而本研究中多菌靈對4個木霉菌株的生長抑制率均為100%。另外，4個木霉菌株對第2類及第3類藥劑的反應存在較大差異，總體來看可將4個菌株分為2組：Tr23、Tr42為Ⅰ組，Tr26、Tr41為Ⅱ組，第2類藥劑對Ⅰ組菌株抑制作用較強，對Ⅱ組作用較弱，甚至為負值；第3類藥劑則相反。

分析原因可能是：①不同菌株生長特性不同，對藥劑敏感性不同；②不同廠家生產的藥劑成分存在差異，對菌株產生不同影響。這在本試驗中也有體現，試驗中所用的2種草甘膦，生產廠家、劑型不同，對4個菌株的生長抑制作用存在差異，95%草甘膦SP對Tr23及Tr42無抑制作用，而30%草甘膦SL 對2個菌株的生長抑制率分別為23.58%、20.12%。

針對以上現象，在綜合防治時可考慮將幾種木霉菌株混合發酵，制備成含多種菌株的生防制劑，以避免單一菌種生長被完全抑制而導致菌劑失效。

3.2不同藥劑對同種菌株的生長抑制作用

從本試驗結果來看，不同藥劑對木霉菌株的生長存在正向或負向調控作用。殺菌劑中霜霉威鹽酸鹽、代森錳鋅對Tr26、Tr41具有一定的正向調控作用，而對Tr23、Tr42則沒有調控作用或有較強的負向調控作用；多菌靈、多抗霉素及甲基硫菌靈完全抑制了4個菌株的生長，具有強烈的負向調控作用。以上結果提示，在化學防治與生物防治協同作用時，應選擇對生防菌負向調控作用較弱的化學藥劑加以利用，以提高防治效果。

圖2　常用農藥對4個木霉菌株生長抑制作用的分類

參考文獻

[1]Howe11 C R.Mechanisms emp1oyed by Trichoderma species in the bio1ogica1 contro1 of p1ant diseases: the history and evo1ution of current concepts [J].P1ant Disease, 2003, 87: 4_10.

[2]燕嗣皇，吳石平，陳德清，等.三唑酮對木霉根際競爭定殖的影響[J].植物病理學報，2000，30(3）：266_270.

[3]劉欣，臺蓮梅.幾種常用殺菌劑對6個木霉菌株的室內毒力測定[J].黑龍江八一農墾大學學報，2006，18(6）：8_11.

[4]張婷，衣思瑤，武向文，等.農藥與木霉菌粉劑復配包衣種子對玉米出苗與生長的影響[J].上海交通大學學報(農業科學版)，2011，29(4）：61_66.

[5]田連生.抗藥性木霉菌株的選育及其與多菌靈的協同作用[J].核農學報，2008，22(1）：32_35.

[6]Hwang S F, Chang K F, Howard R J, et a1.Disease in incident of Pythium damping_off of fie1d pea by seed treatment withBacillcis spp.and meta1axy1 [J].P1ant Diseases and Protection, 1996, 103(1): 31_41.

[7]王進忠，郝立東，尚巧霞，等.6種常用殺菌劑對木霉菌生長發育的影響[J].中國農學通報，2005，21(6）：308_311.

[8]宋敏，李增國，彭向永.6種殺菌劑對綠色木霉的抑制作用[J].山東農業科學，2008(8）：90_91.

Growth Inhibition Effects on Antagonistic Trichoderma spp.with Common Pesticides

ZHANG Aimin, XING Dan, PENG Guihua, HAN Shiyu, FU Wenting
(Guizhou Pepper Research Institute,Guiyang 550066)

Abstract:We chose 24 common pesticides and studied the effects of different types of pesticides on growth of antagonistic Trichoderma spp..The resu1ts showed that there were some difference among different types of pesticides on the inhibition ofTrichoderma spp., and the order of inhibition effects was fungicide〉herbicide〉pesticide.Carbendazim, po1ymyxin, methy1 thiophanate had the strongest effects, and the growth inhibition rate of these pesticides on fourTrichoderma strains was 100% , Whi1e propamocarb hydroch1oride had the weakest effect, and the growth inhibition rate of it on four Trichoderma was_4.06%, showing a certain promoting effect.C1uster ana1ysis showed that the 24 kinds of pesticides cou1d be divided into four categories when the distance va1ue was 5.45.

Key words:Common pesticides；Trichoderma spp.；C1uster ana1ysis；Growth

收稿日期：2015_11_03

基金項目：貴州省農科院專項資金項目“辣椒疫病拮抗木霉發酵條件的優化及生防制劑的研制”（黔農科院院專項[2014]003號）；貴州省創新能力平臺項目“辣椒、桑樹種質資源開發利用研究創新能力建設”（黔科合院所創新[2012]4003）

DOI:10.3865/j.issn.1001_3547.2016.02.024

中圖分類號：S432.4+4

文獻標識碼：A

文章編號：1001_3547(2016）02_0061_04