HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標本的病原微生物檢測分析

摘要：目的 分析HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標本的病原微生物，為患者提供最佳的治療方案。方法 選擇2012年1月～2016年6月我中心HIV感染合并慢性腹瀉患者65例的糞便作為標本，進行病原微生物檢測分析。結果 65例標本中存在51份病原微生物的感染，真菌的檢出率47.06%，比例最大。其次是隱孢子檢出率21.57%，之后是分歧桿菌17.65%，空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌的檢出率分別是5.88%、7.84%。結論 在對HIV感染合并慢性腹瀉患者的糞便標本進行病原微生物檢測發現主要以真菌、隱孢子、分歧桿菌、空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌為主，為患者積極尋找致病菌，為患者提出及早的預防以及治療方案。

關鍵詞：HIV感染合并慢性腹瀉患者；糞便標本；病原微生物檢測

HIV即人類免疫缺陷病毒，會造成人類免疫系統缺陷的一種病毒。HIV破壞人體正常的免疫能力，導致患者最終因免疫系統癱瘓死亡[1]。在HIV并發性感染過程中消化道屬于一個比較常見的受累部位[2]。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2012年1月～2016年6月我中心HIV感染合并慢性腹瀉患者65例，納入標準：①符合流行病學史、存在艾滋病臨床表現、實驗室HIV抗體由陰性轉為陽 性[3]；②超過3次/d的慢性腹瀉、慢性腹瀉時間超過1個月[4]。65例患者中男性40例，女性25例，年齡23～68歲，平均年齡（41.3±2.37）歲。

1.2方法

1.2.1常規培養 將65份新鮮糞便接種到弱選擇性培養基中國藍瓊脂平板、強選擇性的培養基SS瓊脂平板以及含有氯霉素的沙保羅瓊脂板平板，將接種好的平板放置在溫度為35℃的培養箱中24 h，檢測沙門菌、真菌、志賀菌以及腸侵襲性大腸埃希菌。

1.2.2涂片檢測 對65份糞便標本進行涂片，檢測原蟲。使用格蘭染色檢測真菌孢子和菌絲。使用抗酸染色檢測分歧桿菌，使用5%石炭酸復紅加溫染色，再加用美藍復染可檢測分歧桿菌。為了能夠提高檢出率可以使用甲醛-乙酸乙酯沉淀法對標本進行集卵，再使用改良過后的抗酸染色發對標本進行染色檢測隱袍子蟲卵囊，呈現出桃紅色或者紅色。

1.2.3微需氧培養檢測法 將標本在3 h內接種于SKIRROW培養基，完成接種后放入微需氧的產氣帶中，完成封閉之后將其放入溫度為42℃的孵箱中培養48 h。呈陽性可以在培養基中看到無色半透明的毛玻璃樣小菌落，每一個單一菌落中心凸起，周邊呈不規則狀，無溶血現象發生。

1.2.4金標法 使用某品牌檢測卡將糞便標本采集后的3h進行檢測。

2 結果

2.1分析標本中各種病原微生物的檢出率 65例標本中，其中51份檢測出病原微生物的感染，陽性率是78.46%。其中真菌的檢出最多，占47.06%。使用改良后的抗酸染色法對標本進行染色，其中11例標本中檢測出隱孢子蟲卵囊，占21.57%。分歧桿菌是HIV感染者在中晚期才會出現的主要病原菌，在本次檢測中，分歧桿菌占17.65%。空腸彎曲菌的檢出率為5.88%，難辨梭狀芽胞桿菌的檢出率為7.84%，本次研究中使用金標法在20 min內就可以得到結果，見表1。

3 討論

在此次的病原微生物檢測中，真菌的檢出率最多，其主要來源食道以及胃腸道的真菌感染。隱孢子蟲能夠寄生于人體或者動物的消化道上皮細胞，在感染之后人體會出現發熱、腹瀉、腹痛、嘔吐等[5]。加上患者罹患艾滋病在感染之后發生致死性腹瀉的可能性大大增加。在此次研究中，隱孢子的檢出率僅次于真菌，這也成為了導致艾滋病患者合并存在慢性腹瀉的主要原因。一般隱孢子是通過水源污染引發，如果某地區出現自來水氯化處理未達標的情況其未達到殺死隱孢子包囊的情況，人體感染隱孢子的機率會增加。隱孢子的主要傳播途徑是卵囊經糞口、手口途徑為主，艾滋病感染者疾病進入到中晚期，檢測的CD4細胞水平會出現明顯的降低，這種狀態下人體感染結核分歧桿菌以及其他桿菌的可能性大大提升[6]。

在對艾滋病合并慢性腹瀉患者的分辨標本檢測病原微生物的過程中，應該加強對人體CD4細胞水平的檢測，當CD4細胞水平出現異常的情況時就需要重點加強分歧桿菌的檢測。空腸彎曲菌屬于人畜共患病病原菌，這種食物源性病原菌目前已經被認為是全世界人類細菌性扶著的主要原因，其致病的因素包粘附、產生毒素和分子模擬機制等方面。空腸彎曲菌通過產生細胞緊張性腸毒素、細胞毒素和細胞致死性膨脹毒素致病。空腸彎曲菌中的內毒素能夠侵襲小腸和大腸粘膜從而引發急性腸炎，也會引起腹瀉的爆發流行，導致人體腹瀉、腹痛，有時還會出現發熱、嘔吐以及脫水。難辨梭狀芽胞桿菌可以引發人體出現嚴重腹瀉、劇烈腹痛、結腸穿孔等，部分患者每天便量在4000～5000 ml，體液的大量丟失容易引發人體脫水以及電解質紊亂，加上細菌毒素和壞死組織毒素的吸收出現代謝性中毒，引發人體出現高燒、心動過速等。

本次研究結果顯示，65例標本中存在51份病原微生物的感染，真菌的檢出率47.06%，比例最大。其次是隱孢子檢出率21.57%，之后是分歧桿菌17.65%，空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌的檢出率分別是5.88%、7.84%。

綜上所述，在對HIV感染合并慢性腹瀉患者的糞便標本進行病原微生物檢測發現主要以真菌、隱孢子、分歧桿菌、空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌為主，為患者積極尋找致病菌，為患者提出及早的預防以及治療方案。

參考文獻：

[1]王慧珠，華文浩，李敏，等.253例HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標本的病原微生物檢測分析[J].中華實驗和臨床感染病雜志（電子版），2012，11（02）：135-138.

[2]李敏，劉穎，焦炳欣，等.艾滋病慢性腹瀉患者隱孢子蟲及病原菌感染調查[J].中國公共衛生，2012，19（08）：1099-1101.

[3]蘇映瓊.HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標本的病原微生物檢測分析[J].中國衛生產業，2014，17（06）：24-25.

[4]郭杰，何艷群，焦炳欣，等.HIV/AIDS慢性腹瀉患者149例隱孢子蟲感染分析[J].中國皮膚性病學雜志，2011，23（11）：868-870.

[5]蘇加云.腹瀉患者糞便病原微生物培養方法的探討[J].檢驗醫學與臨床，2011，19（08）：924-925+927.

[6]黃新蓉，劉劼，葉長蕓.應用16S rDNA克隆文庫篩查腹瀉病暴發病原體及特異毒力基因驗證[J].中國人獸共患病學報，2010，29（10）：900-903. 編輯/羅茗柯