醫用臭氧對聚乙二醇干擾素治療慢性乙型肝炎療效的影響

康海燕，董江龍，楊靜，王艷，崔美蘭，耿惠杰，王曉靜

(1石家莊市第五醫院，石家莊050021；2河北醫科大學第三醫院；3曲陽縣人民醫院)

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醫用臭氧對聚乙二醇干擾素治療慢性乙型肝炎療效的影響

康海燕1，董江龍2，楊靜3，王艷1，崔美蘭1，耿惠杰1，王曉靜1

(1石家莊市第五醫院，石家莊050021；2河北醫科大學第三醫院；3曲陽縣人民醫院)

摘要：目的探討醫用臭氧對聚乙二醇干擾素治療慢性乙型肝炎抗病毒及抗肝纖維化效果的影響。方法 將200例HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者隨機分為觀察組、對照組各100例，分別給予醫用臭氧聯合聚乙二醇干擾素α-2a治療及單用聚乙二醇干擾素α-2a治療。治療前及治療4、8、12周觀察兩組血清HBeAg定量、HBV-DNA陰轉率、堿性成纖維細胞生長因子(BFGF)及瞬時肝彈性測定(FibroScan)的變化情況。結果與治療前比較，兩組治療4、8、12周HBeAg定量、血清BFGF水平、FibroScan數值逐漸降低(P均<0.05)，且治療后觀察組HBeAg定量低于對照組(P均<0.05)，血清BFGF水平、FibroScan數值、HBV-DNA陰轉率與對照組比較差異無統計學意義(P均>0.05)。結論 醫用臭氧可增強聚乙二醇干擾素的抗乙型肝炎病毒的作用，但對其抗肝臟纖維化作用無影響。

關鍵詞：慢性乙型肝炎；醫用臭氧；聚乙二醇干擾素α-2a

慢性乙型肝炎以抗病毒、抗炎、抗氧化及免疫調節等治療為主[1，2]。醫用臭氧主要通過修復肝細胞、改善肝臟缺血再灌注及免疫誘導產生細胞因子來發揮抗乙型肝炎病毒的作用，此外，臭氧本身及其產生的過氧化物可以直接作用于病毒外膜結構，影響病毒對宿主細胞的感染能力[6]。聚乙二醇干擾素α-2a是目前公認的抗慢性乙型肝炎病毒的一線藥物，有較強的免疫調節能力[5]，主要通過直接抗病毒和免疫調節來清除病毒。本研究采用醫用臭氧與聚乙二醇干擾素α-2a治療慢性乙型肝炎，探討醫用臭氧對聚乙二醇干擾素治療慢性乙型肝炎抗病毒及抗肝纖維化效果的影響。

1資料與方法

1.1臨床資料選取2013年6月~2015年3月于石家莊市第五醫院住院及門診治療的慢性乙型肝炎患者200例，均符合慢性乙型肝炎防治指南(2010版)的診斷標準[7]。納入標準：①HBV DNA≥1×104拷貝/mL；②2×正常值上限(ULN)≤ALT≤4×ULN，TBIL<2×ULN；③HBsAg、HBeAg均陽性；④肝穿刺組織病理檢查顯示，肝組織學炎癥壞死≥G2，纖維化指數≥S2[7]；⑤近6個月內均未進行抗病毒、抗纖維化治療，無干擾素應用禁忌證。其中男108例、女92例，年齡(36.2±11.8)歲。將患者隨機分為觀察組、對照組各100例，兩組性別、年齡等比較差異無統計學意義。患者均簽署知情同意書。

1.2治療方法觀察組給予醫用臭氧聯合聚乙二醇干擾素α-2a治療，對照組單用聚乙二醇干擾素α-2a治療。醫用臭氧自體血回輸治療采集靜脈抗凝全血100 mL，緩慢注入30 μg/mL醫用臭氧(德國哈斯樂OZONESAN alpha Plus 1107臭氧發生器制備)100 mL，然后再回輸入靜脈，每周3次；皮下注射聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg，每周1次。兩組均治療12周。

1.3 指標檢測分別于治療前及治療4、8、12周檢測血清HBeAg定量、HBV-DNA陰轉情況、堿性成纖維細胞生長因子(BFGF)及瞬時肝彈性測定(FibroScan)數值。HBeAg定量檢測試劑盒由美國羅氏公司提供，并采用Elescys Ⅱ檢測系統檢測；血清HBV-DNA定量檢測試劑盒由中山大學達安基因公司提供，采用實時熒光定量PCR法檢測，HBV-DNA<1.0×103拷貝/mL為陰性；血清BFGF試劑盒由武漢博士德生物工程有限公司提供，采用ELISA法檢測；FibroScan儀器購自法國ECHOSENS公司，參照FibroScan用戶手冊操作。

2結果

2.1兩組治療前后血清HBeAg定量、BFGF水平、FibroScan數值比較見表1。與治療前比較，兩組治療4、8、12周HBeAg定量、血清BFGF水平、FibroScan數值逐漸降低(P均<0.05)，且治療4、8、12周觀察組HBeAg定量低于對照組(P均<0.05)。

表1　兩組治療前后血清HBeAg定量、BFGF水平、

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組同期比較，#P<0.05。

2.2兩組血清HBV-DNA陰轉率比較觀察組治療4、8、12周HBV-DNA陰轉率分別為8%(8/100)、12%(12/100)、18%(18/100)，對照組分別為5%(5/100)、9%(9/100)、13%(13/100)，觀察組各時點HBV-DNA陰轉率高于對照組，但比較差異無統計學意義(P均>0.05)。

2.3不良反應兩組均未發生嚴重不良反應，無失訪及死亡病例。觀察組有3例患者在行醫用臭氧自體血回輸過程中出現輕微皮疹，未給予特殊處理。

3討論

目前研究認為，醫用臭氧對乙型肝炎抗病毒治療的主要機制是通過誘導產生干擾素、白細胞介素、轉化生長因子等多種細胞因子發揮免疫調節作用，抑制并殺滅部分病毒感染的細胞；醫用臭氧還可以誘導激活細胞產生抗氧化酶，通過提高細胞抗自由基抗氧化作用來清除慢性炎癥過程中形成的自由基，保護肝臟，減輕臟器損傷。此外，臭氧本身及其產生的過氧化物可以直接作用于病毒外膜結構，影響病毒對于宿主細胞的感染能力[6]。

HBV-DNA是嗜肝DNA病毒，是HBV感染及傳染的直接標志，由結構基因序列和調節基因序列互相重疊組成。HBeAg是HBV核心基因的一部分，在HBV復制過程中，前C 基因與C 基因一起形成的P25 前體多肽鏈在蛋白酶作用下，將前C RNA編碼前C蛋白裂解為HBeAg，因此HBeAg是反映病毒復制活躍程度的指標之一，與HBV 水平表達相關[8]。因此在慢性乙型肝炎患者抗病毒治療中監測HBeAg定量下降情況及HBV-DNA陰轉率，可作為臨床評價抗病毒療效的重要指標。HBeAg同時具有誘導免疫耐受的特點，其定量減少可能是免疫耐受打破的原因，標志著患者免疫系統開始發揮作用，間接的反映機體免疫狀態和對抗病毒治療的應答情況。因此，HBeAg下降的程度和速度對預測患者抗病毒療效及是否出現血清學轉換具有重要意義。本研究發現，兩組患者治療4、8、12周血清HBeAg定量均較治療前降低，說明兩組治療方法在慢性乙型肝炎抗病毒治療中療效確定，均有效降低肝細胞內的病毒活性，促進肝細胞修復；治療4、8、12周觀察組血清HBeAg定量較對照組降低更明顯，說明醫用臭氧加強聚乙二醇干擾素的抗病毒作用，其作用機制可能為誘導患者免疫系統發揮作用，提高其抗病毒應答效果，促進E抗原的血清學轉換。

肝纖維化是指肝細胞發生炎癥壞死時，肝臟中的細胞外基質發生增生和降解的失衡，引起肝細胞外基質沉積。當肝纖維化達到一定程度，會導致假小葉形成，這就是肝硬化的病理基礎[9]，而病毒性乙型肝炎是重要的致病因素之一[10]。1984年Gonpodarowioz等從牛腦垂體中分離純化出BFGF，其主要由肝竇內皮細胞、成肌纖維樣細胞、肝細胞等分泌。在慢性肝病的早期階段，由于肝組織發生微循環障礙而合成BFGF增加；到肝病的中晚期階段，BFGF的重要功能是促進細胞外基質和其他生長因子的產生[11]，進而加重肝纖維化。FibroScan是基于超聲原理下，通過超聲探頭的瞬時彈性成像技術，發射推進脈沖到組織或器官內的指定位置，產生微小形變，應用敏感的探測技術檢測因組織形變而產生的橫向剪切波傳導速度[12]，計算出肝臟的硬度數值，進而對慢性肝病、肝纖維化達到無創檢測的目的。國外已有研究證明，FibroScan值與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期情況有相關性[13]。本研究兩組患者治療4、8、12周血清BFGF及FibroScan數值均逐漸下降，可見，聚乙二醇干擾素可有效抑制肝纖維化的形成，延緩肝硬化進展；兩組血清BFGF及FibroScan指標比較差異無統計學意義(P均>0.05)，說明醫用臭氧對聚乙二醇干擾素的抗肝纖維化效果無影響。

本研究時間較短，樣本偏少。以后的研究中我們會延長觀察時間，擴大樣本，進一步探索醫用臭氧對慢性乙型肝炎患者的治療效果，為臨床治療提供依據。

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(收稿日期：2015-09-05)

中圖分類號：R512.62

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)09-0088-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.036