缺氧缺血性腦病足月新生兒腦脊液中GFAP水平變化及意義

陳長春，柴妍楠，閆燕，王琪，張曉媛，尹曉娟

(安徽醫科大學北京軍區總醫院臨床學院附屬八一兒童醫院，北京100700)

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缺氧缺血性腦病足月新生兒腦脊液中GFAP水平變化及意義

陳長春，柴妍楠，閆燕，王琪，張曉媛，尹曉娟

(安徽醫科大學北京軍區總醫院臨床學院附屬八一兒童醫院，北京100700)

摘要：目的觀察缺氧缺血性腦病(HIE)足月新生兒腦脊液中神經膠質酸性蛋白(GFAP)水平變化，探討其臨床意義。方法 60例HIE足月新生兒根據病情嚴重程度分為輕、中、重度組各20例，經治療后第21天隨訪，痊愈42例、好轉17例、死亡1例。以發病第1、7、14、21天為研究時點，用ELISA夾心法測定各時點腦脊液中GFAP水平。結果發病第1天腦脊液GFAP水平輕度組>中度組>重度組(P均<0.05)，發病第7、14天腦脊液GFAP水平輕度組<中度組<重度組(P均<0.05)，發病第21天3組腦脊液GFAP水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。不同預后患兒發病第1天腦脊液GFAP水平比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論 足月新生兒HIE發病后不同時間及不同嚴重程度間腦脊液GFAP水平均存在差異，對其進行檢測可預測患兒病情變化及預后。

關鍵詞：缺氧缺血性腦??；新生兒；神經膠質酸性蛋白

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)在足月兒的發病率為1‰～3‰[1]，部分存活患兒可遺留遠期神經系統后遺癥[2，3]。雖然MRI檢查是診斷該病的金標準，但對HIE早期預測的靈敏度有局限性，且不宜早期床邊監測[4]。因不能確定缺氧缺血發生的準確時間、損傷程度和修復時相點，迄今為止，尚無有效的治療方法可使腦組織免受損傷。神經膠質酸性蛋白(GFAP)在星形膠質細胞死亡后釋放到血液中，與神經系統損傷及修復有關[5，6]。為此，本研究測定HIE足月新生兒不同時點腦脊液中GFAP水平變化，探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1臨床資料 選擇2013年1月~2015年1月在本院NICU住院的HIE患兒60例，均符合《實用新生兒學》第4版中HIE的診斷標準[3]，均足月出生。其中男38例、女22例，胎齡37~42周，出生體質量2 520~4 200 g，順產24例、剖宮產36例。根據文獻[3]分為輕度組、中度組、重度組各20例，3組性別、胎齡等比較差異無統計學意義?；純喝朐汉蠼o予相應治療，第21天隨訪，痊愈(臨床癥狀消失，體格生長、體質量增長，新生兒神經行為評分≥35分，振幅整合腦電圖正常，MRI 21時點正常)42例、好轉(臨床癥狀消失，體格生長、體質量增長，新生兒神經行為評分<35分，振幅整合腦電圖正常，MRI 21時相點異常)17例、死亡1例(重度組)。本研究經北京軍區總醫院倫理委員會批準，所有研究對象家屬知曉研究目的和實施過程，并簽署知情同意書。

1.2腦脊液中GFAP檢測分別于HIE發病第1(治療前)、7、14、21天參照文獻[7]腦脊液收集與保存方法，常規消毒鋪巾行腰椎穿刺術，留取腦脊液1.5 mL，室溫2 000 r/min離心10 min，取上清，以每管50 μL分裝于0.1 mL EP管中，于-80 ℃冰箱中保存。ELISA夾心法測定腦脊液GFAP。

2結果

2.1各組不同時點腦脊液GFAP水平比較發病第1天腦脊液GFAP水平輕度組>中度組>重度組，比較差異有統計學意義(P均<0.05)；發病第7、14天，腦脊液GFAP水平輕度組<中度組<重度組，比較差異有統計學意義(P均<0.05)；發病第21天，3組腦脊液GFAP水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2不同預后患兒不同時相點腦脊液GFAP水平比較痊愈、好轉的患兒腦脊液GFAP水平均先升高后降低，見表1。發病第1天,死亡患兒腦脊液GFAP水平為774.58 ng，痊愈、好轉患兒腦脊液GFAP水平比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表1　各組不同時點腦脊液GFAP水平比較

表2　痊愈、好轉患兒不同時相點腦脊液GFAP

注：與好轉同時點比較，*P<0.05；與同組同時點比較，#P<0.05。

3討論

GFAP在星形膠質細胞死亡后，通過腦脊液循環于腦室系統與脊髓中，當出現神經系統疾病時，可透過血-腦脊液屏障進入循環中，其作為生化指標較為敏感，易于測量[8]。因此，選擇測量腦脊液中的GFAP來反映神經元的損傷程度以及監測病程變化具有可行性，尤其值得一提的是，由腦損傷誘導表達的GFAP在神經再生和膠質細胞增生功能中也起到了重要作用。已有研究證明，HIE患兒血清GFAP水平相較于無HIE病變的對照組明顯升高，且GFAP水平越高，新生兒神經行為評分得分越低，因此檢測血清GFAP可用于判斷HIE患兒的病情程度和預后[9]。

本研究結果表明，同一嚴重程度不同時相點測定的GFAP水平不同， GFAP水平呈先上升后下降趨勢。同一時相點不同嚴重程度HIE測定的腦脊液GFAP水平也不同，發病第1天為輕度組>中度組>重度組，第7、14天為輕度組<中度組<重度組，第21天，3組之間無顯著性差異。這與不同程度患兒血-腦脊液屏障破壞程度及恢復時間不同有關，即程度越輕血-腦脊液屏障破壞越輕，恢復時間越短，因此發病第1天重度組患兒腦脊液GFAP通過血-腦脊液屏障釋放入血液中，腦脊液GFAP水平降低；第7天輕度組患兒基本痊愈，腦脊液GFAP水平接近正常水平；第14天中度組部分患兒好轉，腦脊液GFAP水平較輕度組高，重度組患兒腦脊液GFAP水平恢復至正常的時間較長，腦脊液GFAP水平最高；第21天，三組患兒基本痊愈，GFAP水平接近正常水平。不同預后患兒腦損傷程度及血-腦脊液屏障破壞程度不同，因此不同預后患兒發病第1天GFAP水平存在差異[10]。3組腦脊液GFAP水平在發病第1~21天均呈現先升后降的趨勢，中、重度組相較于輕度組更具有規律性；由于缺氧造成的神經元以及神經膠質細胞損傷為細胞凋亡或遲發性神經元死亡，故此過程持續且緩慢[11]。即在HIE發生后，缺氧缺血造成的神經細胞損傷持續存在一段時間，這與HIE損傷分為早期損傷、中間潛伏期以及再損傷三個階段以及“窗口期”治療的理論相符合[12]。在發病第7~21天，3組腦脊液GFAP水平變化趨勢相對穩定。發病第1天腦脊液GFAP水平與HIE預后有關，即早期檢測GFAP既可以對HIE患兒嚴重程度進行分層，判斷預后，也對HIE患兒早期針對性治療方案的制定具有重要意義。且GFAP為中樞神經系統的特異性蛋白，相較于外周血清，檢測腦脊液中GFAP的水平能更加準確地反映神經系統在缺氧缺血后的變化特點，因此GFAP可作為HIE早期診治、預測預后的指標。

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(收稿日期：2015-11-23)

中圖分類號：R722.12

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)09-0060-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.023

通信作者：尹曉娟(E-mail:yyinxiaojuan@163.com)

基金項目：中國博士后科學基金資助項目(20070410505)。