性病門診患者HPV感染情況及其亞型分析(附733例報告)

劉義剛，李曉瑩，路麒,郭亞南，任勇

(山東大學附屬省立醫院，濟南250021)

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性病門診患者HPV感染情況及其亞型分析(附733例報告)

劉義剛，李曉瑩，路麒,郭亞南，任勇

(山東大學附屬省立醫院，濟南250021)

摘要：目的了解性病門診患者人乳頭瘤病毒(HPV)感染情況和病毒亞型分布。方法采用PCR法檢測733例性病門診患者HPV 基因及其亞型。 結果733例性病門診患者HPV陽性檢出率36.15%，男、女檢出率分別為27.20%、46.73%，P<0.05。其中，HPV感染高危型71.69%、低危型55.09%；高危型單一感染構成比52.41%，其中HPV52、58、16分別占10.16%、9.63%、9.36%，混合感染構成比為28.31%；HPV陽性構成比20～29歲者47.06%、≥60歲者0.80%。結論性病門診患者中HPV陽性檢出率較高，且女性檢出率高于男性；高危型以單一型感染居多，以HPV52、58、16為主；20～29歲HPV陽性構成比最高、≥60歲者低。

關鍵詞：人乳頭瘤病毒；基因亞型；性病門診

人乳頭瘤病毒 (HPV)是一種高度親嗜人體皮膚及黏膜的小分子雙鏈 DNA 病毒 ，人類是 HPV的惟一宿主，能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖。目前已鑒定出200多種亞型，能感染人類生殖道的有40多個，HPV感染是最普遍的性傳播疾病之一。本研究觀察了733例性病門診患者HPV感染情況及其亞型分布，為其防治及流行病學研究提供依據。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2013年10月～2015年5月山東大學附屬省立醫院性病門診就診的性病患者和咨詢自愿者733例 ，男397例、女336例，年齡4～67歲。

1.2HPV檢測方法男女分別取尿道、宮頸分泌物，外生殖器有贅生物者另在贅生物表面稍用力刮拭取材；放入裝有2 mL細胞保存液的保存管中，-20 ℃保存待測。選擇DA7600核酸擴增分析儀 DNA 提取試劑、HPV 擴增試劑、HPV核酸測定試劑盒(熒光PCR法)，可檢測HPV亞型15種，包括 13 種高危亞型 (16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型)、2種低危亞型 (6、11型)。標本試管中加入1 mL無菌生理鹽水，吸取液體轉移到1.5 mL離心管中，13 000 r/min 離心 5 min；沉淀加無菌生理鹽水1 mL混勻，13 000 r/min 離心 5 min，重復洗滌1次；沉淀直接加入50 μL核酸提取液充分混勻，99 ℃干浴或水浴10 min；13 000 r/min 離心 5 min，取上清41 μL作為PCR反應模板。取混合液36 μL置于PCR反應管中，然后將標本、陽性對照品、水(陰性對照)的處理上清液各4 μL分別加入薄壁PCR反應管中，反應體系40 μL。37 ℃ 2 min；94 ℃ 2 min；再按93 ℃ 15 s、60 ℃ 60 s，循環40次。結果判定：儀器Ct欄顯示UNDET或40表示檢測樣本低于檢測限，判為陰性；檢測樣本Ct值≤38，且擴增曲線呈典型S形，判為陽性。檢測樣本Ct值在38～40，需重復測定，如仍在38～40，且擴增曲線呈典型的S形，則判為陽性；若非典型S形曲線，則判為陰性。

1.3統計學方法采用SPSS13.0統計軟件。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1HPV檢出率733例患者中共檢出 HPV 陽性265例，檢出率為36.15%；其中男性27.20%、女性46.73%，女性 HPV 陽性檢出率明顯高于男性(χ2=260.81，P<0.05)。

2.2HPV感染亞型分布265例HPV感染者基因型分布見表1。不同性別HPV感染者單一及多重感染構成情況見表2。不同年齡人群HPV陽性率及陽性構成比見表3。

3討論

HPV是具有鱗狀上皮細胞親嗜性的閉合環狀DNA病毒，根據其致病力或致癌危險性不同可分為低危型和高危型。低危型是引起尖銳濕疣的主要病原體[1]，如HPV6、11、42、43、44、81等；高危型常引起宮頸上皮內瘤樣病變及浸潤性宮頸癌，如HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68 等。研究證實，HPV 感染與宮頸癌及其癌前病變密切相關。高危型HPV持續感染可整合到宿主黏膜的上皮基因中，使病毒的致癌基因 E6/E7 在宮頸上皮組織中過量表達，并與宿主基因組的抑癌基因pRb、p53結合，使其降解、失活，失去對細胞生長周期的調控，導致細胞無限增殖甚至惡性轉化，最終導致宮頸癌[2，3]。HPV感染后最初以亞臨床感染為主，導致人群中存在大量無癥狀病毒攜帶者，增加了人群感染的危險性。因此，對本地區門診高危患者進行 HPV 分型檢測，了解高危人群感染HPV的流行病學特點，對疾病的防治具有重要意義。

表1　265例HPV感染者基因型分布[例(%)]

表2　不同性別HPV感染者單一及多重感染

表3　不同年齡人群HPV陽性率及陽性構成比(%)

本組患者HPV陽性率為36.15%，高于張志勇等[4]報道的28.82%、劉靜等[5]報道的29.67%，低于聶雙雙等[6]報道的36.94%、李嘉彥等[7]報道的40.26%。其中，女性 HPV 陽性檢出率明顯高于男性，與李嘉彥等[7]的報道不同。其原因可能與種族、地域及主動來醫院就診的疑似HPV 感染者及檢測技術等差異有關。本研究顯示，HPV高危亞型前3位是 HPV52、58、16，且存在性別差異，可能是由個人衛生情況及性行為、人體生理解剖結構等造成。流行病學資料顯示，HPV亞型分布有明顯地域差異[8]。本研究女性高危亞型前3位是HPV58、52、16型，不同于其他報道[9～14]，進一步提示HPV亞型分布存在明顯地域差異。本研究顯示，HPV感染構成比中，高危型感染以單一感染為主；且無論高危型單一、多重感染，還是低危型混合感染，女性高于男性。有文獻[15]顯示，女性HPV高危型單一感染可使宮頸癌患病風險增加 19.9倍， 而混合感染可增加31.8倍。因此，應更加重視多重高危及混合型感染。

本研究顯示，<20歲者HPV感染率最高，可能與此年齡段性活躍度高、個人衛生習慣及健康意識缺乏、免疫系統還未被致敏等有關；≥60歲者HPV感染率相對較高,可能是自身免疫力下降所致；20～29歲者構成比最高、≥60歲者最低，是由于20～29歲者性生活活躍而健康意識缺乏，導致門診就診數最高，HPV感染者基數大，≥60歲者門診就診數少。因此，需普及年輕人群對于HPV感染的基本認識，指導其建立良好的個人衛生習慣和健康性生活，同時加強高危老年人群HPV的篩查。

參考文獻：

[1] 黃慶,府偉靈,周玉,等.基因芯片對人乳頭瘤病毒的快速檢測和分型[J] .中華醫院感染學雜志,2005,15(4):476.

[2] Kroupis C, Vourlidis N. Human papilloma virus(HPV) molecular diagnostics [J]. Clin Chem Lab Med,2011,49(11)：1783-1799.

[3] Honegger A, Leitz J, Bulkescher J, et al. Silencing of human papillomavirus(HPV) E6/E7 oncogene expression affects both the contents and the amounts of extracellular microvesicles released from HPV-positive cancer cells[J]. Int J Cancer, 2013,133(7)：1631-1642.

[4] 張志勇,曾文興,胡有長,等.1 610例HPV患者亞型感染調查分析[J] .實驗與檢驗醫學,2014,32(8)：469-472.

[5] 劉靜，張玉杰，王艷春，等.山東濱州地區性病門診HPV亞型分布的研究[J] .醫學檢驗與臨床,2014,25(4):3-5.

[6] 聶雙雙,丁顯平,陳祖翼,等.成都地區人乳頭瘤病毒感染亞型年齡分布多重感染及相關趨勢研究[J] .國際檢驗醫學雜志,2013,34(22):3026-3028.

[7] 李嘉彥,羅育武,畢超,等.性病門診患者1 786例HPV基因亞型分析[J] .中國皮膚性病學雜志,2014,28(6)：595-597.

[8] Peng RR, Li HM, Chang H, et al. Prevalence and genotype distribution of cervical human papillomavirus infection among female sex workers in Asia:a systematic literature review and meta-analysis[J]. Sex Health, 2012,9(2):113-119.

[9] 田建新,劉慧源,商宇紅.Numb蛋白與宮頸病變類型及高危型HPV負荷量的關系 [J].山東醫藥,2014,54(42)：16-17.

[10] 何君梅,尹格平.21種HPV亞型檢測在宮頸病變診斷及預測中的價值[J].山東醫藥,2010,50(15)：35-36.

[11] 周平樂,孫彬彬.宮頸病變患者高危型HPV感染情況及其與血清炎性因子的關系[J].山東醫藥,2015,55(30)：47-48.

[12] 胥萍,陳慧,吳敏娟,等.江蘇女性HPV感染基因型分析[J] .中國公共衛生,2014,30(5):618-621.

[13] 麥光興,嚴澤浩,熊禮寬,等.深圳地區女性生殖道HPV感染及基因型結果分析[J] .國際檢驗醫學雜志,2014,35(14):1878-1879.

[14] 陳頌平,勞小斌,劉曉強,等.廣州市天河區婦科門診成年女性人乳頭瘤病毒感染調查及分析[J] .現代預防醫學雜志,2014,41(17):3133-3135.

[15] Lee SA, Kang D, Seo SS, et al. Multiple HPV infection in cervical cancer screened by HPV DNA chip[J]. Cancer Lett, 2003,198(2)：187-192．

(收稿日期：2015-10-23)

中圖分類號：R711.7

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)10-0084-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.038

通信作者：任勇(E-mail: heirenyong@163.com)

基金項目：山東省科技發展計劃項目(2013GSF11872)。