Rac1降低膠質瘤手術聯合放化療敏感性

韓曉勇 尚金星 趙志煌 王希瑞 尹港峰

滄州市中心醫院神經外三科 河北省滄州市 061000

Rac1降低膠質瘤手術聯合放化療敏感性

韓曉勇 尚金星 趙志煌 王希瑞 尹港峰

滄州市中心醫院神經外三科 河北省滄州市 061000

目的：探討膠質瘤術后放化療敏感性與Rac1表達的關系。方法：選取我院膠質瘤患者30例，術中均留取標本，術后均經過常規放化療治療。PCR檢測30例膠質瘤標本Rac1的表達量，并隨訪統計30例患者復發率。利用X2檢驗，分析膠質瘤中Rac1表達的高低與膠質瘤術后患者經放化療治療后復發率的關系。結果：Rac1高表達的膠質瘤患者經術后放化療后復發率較Rac1低表達的膠質瘤患者明顯增加，差異具有統計學意義。結論：Rac1高表達的膠質瘤術后放化療敏感性降低。

膠質瘤；Rac1；放化療

腦膠質瘤是腦原發性腫瘤中發病率最高并且在治療上最困難的一類腫瘤。目前對于腦膠質瘤復發的具體機制尚不明確。有研究發現，Rac1的表達有膠質瘤的侵襲和遷移能力密切相關。本文隨訪收集我院神經外科2012-2013年手術聯合放化療綜合治療的膠質瘤患者30例，初步探討膠質瘤患者術后經放化療后的復發率與Rac1表達的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集滄州市中心醫院2012-2013年30例膠質瘤患者手術切除的膠質瘤標本，將所取新鮮標本裝入凍存管中，置入液氮保存。 30例膠質瘤患者，其中男性18例，女性12例，年齡：26-65歲，平均年齡43.5歲。根據WHO神經系統腫瘤分型（2007年版）進行分級，其中Ⅰ級2例，Ⅱ級11例，Ⅲ級13例，Ⅳ級4例，取癲癇患者顳葉腦組織8例，作為對照組。所有患者均為首發膠質瘤，術前均未行放化療。

1.2 治療方法

所有患者均行開顱手術治療，所選30例患者均為術中腫瘤完全切除。術后經放療科正規放療，并同期行化療。化療方案采用尼莫司汀或替莫唑胺。

1.3 RT-PCR檢測膠質瘤組織中Rac1 mRNA水平

從液氮中取出冰凍膠質瘤組織按照Trizol說明書提取U251細胞總RNA，進行RNA的濃度、純度及完整性的測定。用二步法擴增目的基因，參照文獻 Rac1的引物序列為：上游引物5’-TGACCAATACTGACCCTCTTTACCT-3’，下游引物5’-CATCAATAGGCAAAG CGACTACA-3’；內參β-actin的引物序列為：上游引物5’-ATGTGGCCGAGGACT TTGAT-3’，下游引物5’TGGCTTTTAG GATGGCAAGG-3’。Rac1和β-actin的擴增產物長度分別為：71bp和100bp。擴增條件：94℃激活5min，94℃變性30S，52℃退火60S，72℃延伸90S，30個循環，72℃繼續延伸5min。取RT-PCR產物在2%瓊脂糖凝膠上電泳(80V，30min)，用凝膠圖像分析軟件分析結果，取其積分吸光度值，目的基因與β-actin的比值為相對表達水平，每組重復實驗3次，結果采用均數±標準差表示。

1.4 隨訪及統計學方法

隨訪采取門診復查方法，以治療后3-6個月復查增強核磁共振為依據判斷腫瘤復發情況。采用SPSSl6.0統計軟件進行統計學分析。比較采用t檢驗和X2檢驗，以P<0.05認為差異有統計學意義。

2 結果

（1）為了檢測膠質瘤標本中Rac1的表達情況，我們通過RT-PCR方法測得30例膠質瘤標本中Rac1對比內參的平均相對表達量為37.53±7.14%，而正常腦組織的Rac1對比內參的相對表達量為7.33±2.51%。可見膠質瘤中的Rac1表達量較正常腦組織表達量明顯增高，且差異具有統計學意義（P=0.008）。

（2）為了比較Rac1的表達和膠質瘤復發率的關系，我們根據已測得的膠質瘤平均相對表達量，將膠質瘤標本分為兩組。具體方法為：以Rac1表達量高于平均值者為高表達組，低于平均值者為低表達組。高表達組18例，Rac1平均表達量為46.23±8.29%；低表達組12例，Rac1平均表達量為18.62±5.82%。根據隨訪結果，高表達組18例復發14例，復發率為77.78%；低表達組12例，復發5例，復發率為41.67%。可見Rac1高表達組的復發率明顯增加，利用四格表卡方檢驗分析認為差異具有統計學意義（p=0.043）。

3 討論

腦膠質瘤是中樞神經系統最常見的惡性腫瘤之一，由于其高度侵襲性生長的特點，使得單純的手術治療方法無法將腫瘤組織切除完全。術后的放化療也就成為了膠質瘤綜合治療的重要組成部分[1]。膠質瘤患者術后經正規合理的放化療的綜合治療，總體上可以改善生存，但仍存在部分腫瘤早期復發的情況[2]。

Rac1作為一種重要的細胞信號轉導分子，其廣泛存在于人體各種細胞內，并且與人類多種惡性腫瘤的發生、發展密切相關。膠質瘤的高侵襲性與高遷移能力是膠質瘤復發和耐藥性的密切相關因素。膠質瘤的高侵襲性與高遷移能力可能是膠質瘤術后殘留，逃避放療和產生耐藥性的重要原因。我們研究發現在膠質瘤組織中，Rac1的表達量顯著高于正常腦組織。并且，Rac1高表達組的膠質瘤患者在術后和聯合放化療后的復發率要明顯高于Rac1低表達組。這說明，Rac1的高表達可能與膠質瘤治療后的復發密切相關，但具體機制有待進一步研究。

[1]齊春曉，王寧.惡性膠質瘤放化療后假性進展的研究現狀[J].中華臨床醫師雜志,2013,7(18):8425-8427.

[2]肖鋒,王洪林.腦膠質瘤放化療研究進展[J].中國醫藥指南,2012,10(02):54-55.