鱷膽素與阿霉素聯合應用對肝癌SMMC-7721細胞凋亡的影響

丁玉梅，翁夢婷，毛云子，董　欣，鄧軼韜，陳清西

(廈門大學生命科學學院，福建廈門361102)

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鱷膽素與阿霉素聯合應用對肝癌SMMC-7721細胞凋亡的影響

丁玉梅，翁夢婷，毛云子，董欣，鄧軼韜，陳清西*

(廈門大學生命科學學院，福建廈門361102)

摘要:研究了鱷膽素( crocodile choline，Cro)聯合阿霉素( doxorubicin，Dox)對人肝癌細胞SMMC－7721凋亡的誘導作用．用鱷膽素( 15 μg/mL)和阿霉素( 0．4 μg/mL)單獨或聯合作用SMMC－7721細胞后，測定了培養基中乳酸脫氫酶( LDH)的滲漏率，吖啶橙/溴化乙錠( AO/EB)熒光染色觀察細胞的凋亡形態，流式細胞儀檢測細胞內活性氧( ROS)水平和細胞線粒體膜電位變化，免疫印跡( Western blot)檢測凋亡相關蛋白細胞色素C( CytC)及p53的表達量變化．結果(圖3)顯示鱷膽素和阿霉素單獨或者聯合作用都能促進細胞中LDH的滲漏，與對照組相比，聯合作用組有極顯著差異( p＜0．01)，其作用呈時間依賴性．經藥物處理后，AO/EB熒光染色發現細胞核出現明顯的凋亡特征．細胞中ROS水平顯著升高，同時細胞線粒體膜電位降低．Western blot結果顯示單獨用藥組及聯合用藥組都能上調促凋亡蛋白p53的表達，促進凋亡蛋白CytC由線粒體釋放到胞質中，聯合用藥組作用效果更為顯著．以上結果表明鱷膽素和阿霉素單獨或聯合作用都對人肝癌SMMC－7721細胞凋亡有誘導作用，且以聯合用藥組作用效果更加顯著．兩藥聯合作用可能通過線粒體介導的內源性途徑誘導細胞發生凋亡．本研究有望為肝癌的聯合用藥治療提供理論依據．

關鍵詞:鱷膽素;阿霉素;聯合用藥;肝癌;細胞凋亡;線粒體途徑

肝癌是人類常見惡……