西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀性能驗證及評價

趙　威,田　笑,趙麗菲,李美言,邱廣斌

(中國人民解放軍第二〇二醫院檢驗科，遼寧沈陽 110003)

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·臨床研究·

西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀性能驗證及評價

趙威,田笑,趙麗菲,李美言,邱廣斌△

(中國人民解放軍第二〇二醫院檢驗科，遼寧沈陽 110003)

摘要:目的對校準后的西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀進行方法學性能驗證。方法對西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀分別進行不精密度、正確度、攜帶污染率、臨床可報告范圍、儀器模式間比對、生物參考區間及儀器分類與人工分類比對等性能指標的驗證。結果該儀器不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率、生物參考區間、不同進樣模式間比對、儀器分類與手工分類比對等指標均通過驗證。結論該儀器性能良好，可用于臨床標本的檢測，是一種較理想的全血細胞分析儀。

關鍵詞:全血細胞分析儀；準確度；精密度；攜帶污染率

醫學實驗室認可的專用準則國際標準化組織(ISO)15189《醫學實驗室質量和能力的專用要求》提出申請認可的實驗室應對設備、檢測系統或方法的主要分析性能進行驗證，證實其能夠達到臨床檢測所要求的標準[1]。本實驗室參考國際血液學標準化委員會、美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)的相關性能評價文件，以一般健康人群或一般住院患者的乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血為研究對象[2]，對德國西門子公司的ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀進行性能評價實驗，現將結果報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源采集EDTA-K2抗凝新鮮全血，標本采集操作按照《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)[3]進行。

1.2儀器與試劑(1)驗證儀器及參比儀器：驗證儀器為德國西門子公司的ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀，參比儀器為本實驗室相同型號的五分類全自動血細胞分析儀。(2)試劑：德國西門子公司原裝配套試劑。精密度驗證采用美國Bio-Rad公司的質控品。

1.3方法驗證指標包括：不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率、生物參考區間、不同進樣模式間比對、儀器分類與手工分類比對。所有試驗均在6 h內完成檢測，操作方法參照儀器操作說明書進行。

1.3.1不精密度[4]按照CLSI的EP15-A2文件要求，使用Bio-Rad全血高、中、低3個水平質控品(以L、N、H表示)，按照本室《ADVIA 2120i血液分析儀標準操作程序》，混勻后每天連續進行4次測定，連續測定5 d，計算批內不精密度和總不精密度，以變異系數(CV)表示。判定標準：白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血細胞比容(Hct)、紅細胞平均體積(MCV)、紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)及血小板(PLT)結果應符合WS/T 406-2012精密度評價標準，CV小于或等于各指標精密度評價標準判為合格。各檢測指標精密度評價標準，見表1。

1.3.2正確度[5]本科室的參比儀器參加了原衛生部的室間質評活動，成績合格。因其檢測結果的準確性可以進行傳遞。驗證儀器的正確度可以通過系統間的比對來實現，用臨床標本進行偏倚評估。驗證方案：選取20份當日采集的、濃度分布狀況比較具有代表性的患者血液標本，同時在參比儀器和驗證儀器上進行檢測，同一標本在兩檢測系統之間的檢測時間之差不超過4 h。偏倚=︱驗證儀器值-參比儀器值︱/參比儀器值×100%。WBC≤2.0×109/L和WBC>2.0×109/L的正確度驗證判定標準分別為10.0%、7.5%；PLT≤40×109/L和PLT>40×109/L的正確度驗證判定標準分別為15.0%、12.5%；RBC的正確度驗證判定標準為3.0%；Hb 、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT的正確度驗證判定標準均為3.5%。評價標準：偏倚小于或等于各指標正確度驗證判定標準為符合，80%及以上的偏倚符合相應判定標準即為驗證通過。

表1　　各檢測指標精密度評價標準(%)

1.3.3線性范圍[6]驗證方法：由于血液標本的特殊性，對全血的要求，以及選取高值和低值標本的不可混合性，本試驗選取1份接近預期上限的高值全血標本，與儀器自帶的稀釋液進行混合配制，分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%(當需要時)、5%(當需要時)的比例進行稀釋，每個稀釋度測定1次。將實測值與理論值作比較(偏離應小于10%)，計算Y=aX+b，驗證線性范圍。判定標準：a值在1±0.05范圍內，相關系數r≥0.975或r2≥0.95為可接受。

1.3.4攜帶污染率[7]驗證方案：取高濃度血液標本，混合均勻后連續測定3次，測定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液標本，連續測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。按以下公式計算攜帶污染率：攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。評價標準：WBC≤3.0%，RBC≤2.0%、Hb≤2.0%、PLT≤4.0%即合格。

1.3.5生物參考區間驗證方案：選取20例健康人血標本，男10例，女10例，年齡23～70歲，計算各檢測項目95%分位數的結果。合格率(R)=測定結果在參考區間范圍內的例數/總測定例數，R≥95%即合格。

1.3.6不同進樣模式間比對驗證方法：比對參數包括WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、PLT 6個參數。比對過程：每個項目選擇至少5份濃度分布比較具有代表性的患者血液標本，在相同檢測系統不同進樣模式各檢測2次，計算其均值的偏倚：偏倚=︱自動進樣模式檢測均值-手動進樣模式檢測均值︱/手動進樣模式檢測均值×100%。偏倚判定標準：WBC≤5%、RBC≤2%、Hb≤2%、Hct≤3%、MCV≤3%、PLT≤7%，80%及以上的標本滿足以上判定標準，即為該項目合格。

1.3.7儀器分類與手工分類比對驗證方法：選取20份儀器分類未見明顯異常報警的患者新鮮血液標本，每份標本均分別用于參考方法和儀器法檢測，其中參考方法為人工染色顯微鏡分析，每份標本推兩張血涂片(A片和B片)，由兩位資深檢驗人員對每張血涂片分析200個細胞。其中1位使用血涂片A，另1位使用B片，每份標本的人工分類結果取平均值。判定標準：將儀器法測量結果與人工分析的結果比較，計算兩種方法的偏倚，偏倚=|儀器測定值-顯微鏡計數值|/顯微鏡計數值×100%。判定標準：中性粒細胞(Net)百分比偏倚小于或等于11.2%、淋巴細胞(Lym)百分比偏倚小于或等于11.2%、單核細胞(Mon)百分比偏倚小于或等于14.0%、嗜酸性粒細胞(EOS)百分比小于或等于18.6%，80%及以上標本在生物學變異允許范圍內即可。

1.4質量控制儀器按說明書要求安裝、調試后，用西門子公司提供的校準品校準該儀器。性能驗證期間每次開機預熱至少30 min，待系統穩定后進行標本測試。

2結果

2.1不精密度批內不精密度及總不精密度結果，見表2。

表2　　批內不精密度及總不精密度結果(%)

續表2　　批內不精密度及總不精密度結果(%)

2.2正確度驗證儀器與參比儀器在WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT各項指標的偏倚均小于判定標準，RBC、Hb、MCHC的合格率均為100%，MCH、PLT的合格率均為95%，WBC、MCV的合格率均為90%，Hct的合格率為85%，驗證通過。

2.3線性范圍WBC≤2.0×109/L和WBC>2.0×109/L時線性方程中a值分別為0.989 7、1.005 3，r2分別為0.999 8、0.999 5；RBC、Hb、Hct的線性方程中a值分別為0.992 1、0.997 1、0.999 0，r2分別為0.999 7、0.999 9、0.997 1；PLT≤40×109/L和PLT>40×109/L時線性方程中a值分別為1.019 3、1.003 9，r2分別為0.999 3、0.998 6；均符合判定標準。線性范圍試驗結果，見表3(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。實驗室驗證及廠家標注的線性范圍，見表4。

表4　　儀器線性范圍

2.4可報告范圍根據實驗室檢測的標本并結合臨床要求，其線性范圍可以滿足臨床的需求，因此可報告范圍即為線性范圍。WBC、PLT、RBC、Hct、Hb大于或小于表4中的范圍時，可用手工法或涂片染色鏡檢驗證，以鏡檢結果報告或以大于或小于線性值報告。

2.5攜帶污染率WBC、RBC、Hb及PLT的攜帶污染率分別為0.11%、0.75%、1.00%、0.2%，均在要求范圍內，驗證通過。見表5(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。

2.6生物參考區間除Lym百分比的R為95%，其余檢測項目的R均為100%，各項目R均符合要求，生物參考區間驗證通過。生物參考區間驗證結果，見表6(見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”)。

2.7不同進樣模式間比對WBC、RBC、Hb、Hct、MCV、PLT的合格率均為100%。該儀器自動模式與手動模式測量結果偏倚小于允許誤差，驗證通過。

2.8儀器分類與手工分類比對Net百分比、Lym百分比、Mon百分比、EOS百分比的合格率分別為95%、80%、90%、90%。儀器法測量結果與人工分析的結果比較，兩種方法的偏倚小于判斷標準，驗證通過。

3討論

本科室通過對西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀的不精密度、正確度、攜帶污染率、臨床可報告范圍、儀器模式間比對、生物參考區間及儀器分類與人工分類比對等性能指標進行驗證，得出以下結論：(1)該儀器精密度高、重復性好，本次精密度驗證試驗血常規各項指標的批內不精密度和總不精密度均符合評價標準，精密度良好。(2)本檢測系統室間質評成績合格。(3)攜帶污染率小，各項攜帶污染率均符合儀器的性能要求。(4)各檢測指標的線性試驗結果表明，檢測系統具有良好的線性，a值均在1.00±0.05范圍內，r2≥0.95，符合要求，各指標線性范圍有效。(5)儀器自動模式與手動模式之間比對結果符合要求，驗證通過。(6)檢測系統結果均至少有95%數據分布在現行生物參考區間內，驗證通過。(7)儀器分類與人工分類比對結果符合要求，驗證通過。

綜上所述，本室西門子ADVIA 2120i全自動五分類血細胞分析儀通過了對不精密度、可比性、線性范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染率、生物參考區間、不同進樣模式間比對、儀器分類與手工分類比對等性能指標的驗證，性能良好，可用于臨床標本的檢測。

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(收稿日期：2015-10-26)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.047

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0681-03

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