ALA-PDT聯合口服茶多酚對尖銳濕疣患者血清HIF-1α和VEGF水平的影響

劉廣悅，李　艷，曹慶生，李志超

(1.河北省玉田縣醫院，河北唐山 064100；2.河北省玉田縣中醫醫院，河北唐山 064100)

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·臨床研究·

ALA-PDT聯合口服茶多酚對尖銳濕疣患者血清HIF-1α和VEGF水平的影響

劉廣悅1，李艷1，曹慶生1，李志超2

(1.河北省玉田縣醫院，河北唐山 064100；2.河北省玉田縣中醫醫院，河北唐山 064100)

摘要:目的觀察5-氨基酮戊酸光動力療法(ALA-PDT)聯合茶多酚對尖銳濕疣(CA)的療效及其對CA患者血清缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和血管內皮生長因子(VEGF)水平的影響。方法選取2012年1月至2013年10月玉田縣醫院皮膚科收治的CA患者102例，將其分為3組：A組(單純激光治療組)、B組(單純ALA-PDT治療組)、C組(ALA-PDT聯合茶多酚治療組)。另選取32例健康人作為健康對照組。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)于術前、術后3個月分別檢測各組血清HIF-1α和VEGF水平，對比分析各組血清HIF-1α和VEGF水平的變化及意義。結果治療前，A、B、C組血清HIF-1α和VEGF水平均高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；而A、B、C組間血清HIF-1α和VEGF水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。與治療前比較，治療3個月后A、B、C組血清HIF-1α和VEGF水平均低于治療前，差異有統計學意義(P<0.05)；且B、C組血清HIF-1α和VEGF水平低于A組，差異有統計學意義(P<0.05)；C組血清HIF-1α和VEGF水平低于B組，差異有統計學意義(P<0.05)。結論ALA-PDT聯合茶多酚治愈CA并防止其復發的機制可能與降低HIF-1α和VEGF水平，減少新生血管生成有關。

關鍵詞:尖銳濕疣；5-氨基酮戊酸光動力療法；茶多酚；缺氧誘導因子-1α；血管內皮生長因子

尖銳濕疣(CA)是最常見的性傳播疾病，一般由人乳頭狀瘤病毒引起，具有發病率高、易復發等特點，傳統療法如激光、電離子等，術后易復發、易引起疼痛。近年來，5-氨基酮戊酸光動力療法(ALA-PDT)治療CA的效果得到了肯定，其操作簡單、效果好、復發率低。茶多酚作為一種綠茶的主要活性成分，不良反應少，不僅能增強機體抵抗力、調節機體免疫、降脂降糖、解毒，還能誘導腫瘤細胞凋亡，抗腫瘤新生血管生成，具有抗腫瘤的作用。因此，筆者嘗試ALA-PDT聯合茶多酚治療CA，并觀察ALA-PDT聯合茶多酚對CA的療效及對CA患者血清缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和血管內皮生長因子(VEGF)水平的影響。

1資料與方法

1.1一般資料2012年1月至2013年10月玉田縣醫院皮膚科收治的CA患者102例，診斷標準參考原衛生部防疫司頒布的《性病防治手冊》，其中男45例，女57例，中位年齡26歲，實驗前均經患者同意并經過醫院倫理委員會審查。將所有患者分為A組(單純激光治療組)，B組(單純ALA-PDT治療組)，C組(ALA-PDT聯合茶多酚治療組)，每組34例，各組間性別、年齡、皮損情況及病變程度差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。另選32例健康人作為健康對照組。

1.2儀器與試劑5-氨基酮戊酸(ALA)購自上海復旦張江生物醫藥股份有限公司，-20 ℃避光保存，使用前根據皮損面積新鮮配制成20% ALA凝膠；酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測試劑盒購自晶美生物工程有限公司；茶多酚片購自浙江大學茶葉科技開發公司，杭西衛食字第[2005]0022號。光動力治療儀型號LED-IB，波長(633±10)nm，輸出功率20～100 mW/cm2，購自武漢亞格光電技術有限公司；二氧化碳(CO2)激光治療儀型號901-C，購自廣州市激光技術應用研究所有限公司；帝肯全自動酶免儀。

1.3方法

1.3.1治療方法A組應用CO2激光將所見疣體全部汽化，外涂抗菌藥物藥膏預防感染。B組常規皮膚消毒、局部麻醉后用CO2激光將所見疣體全部汽化，CO2激光治療深度達皮膚正常組織，范圍距疣體根部0.5～0.7 cm；同時要避免損傷血管、神經等重要組織。術后要預防感染。待7～10 d創面愈合后，將鹽酸氨基酮戊酸涂于原皮損和醋酸白試驗陽性皮損及其周圍0.5 cm以內的皮膚及黏膜上，3 h后用氦氖(He-Ne)激光照射，根據光斑面積計算所需時間，使照射總能量達100 mJ/cm2(約20～30 min)。局部外涂抗菌藥物防止感染。每周治療1次，連續用4周。C組除上述治療外，患者術后開始口服茶多酚片，劑量為每片0.45 g，每次2片，每日3次，2個月為1個療程。采用雙抗體夾心ELISA法于術前、術后3個月分別檢測各組血清HIF-1α和VEGF水平。

1.3.2治愈標準3個月后復查，無復發疣體、醋酸白試驗陰性為痊愈。

2結果

2.1各組治愈率及復發率A組治愈率為70.59%(24/34)，復發率為29.41%(10/34)；B組治愈率為85.29%(29/34)，復發率為14.70%(5/34)；C組治愈率為97.06%(33/34)，復發率為2.94%(1/34)。C組的治愈率明顯高于A組，復發率低于A組，差異有統計學意義(χ2值分別為8.78、8.78，P<0.05)。C組與B組的治愈率和復發率比較，差異均無統計學意義(χ2值分別為2.92、2.92，P>0.05)。

2.2治療前、后各組血清HIF-1α和VEGF水平比較治療前，A、B、C組血清HIF-1α水平高于健康對照組，差異均有統計學意義(t值分別為23.18、18.44、18.89，P<0.05)；VEGF水平亦高于健康對照組(t值分別為14.37、16.04、11.94，P<0.05)。A、B、C組間血清HIF-1α和VEGF水平比較，差異均無統計學意義(A組與B組比較，t值分別為0.09和1.51；A組與C組比較，t值分別為0.08和1.40；B組與C組比較，t值分別為0.16和0.12，P>0.05)。與治療前比較，治療3個月后A、B、C組血清HIF-1α水平均降低，差異有統計學意義(t值分別為29.65、9.21、12.12，P<0.05)；VEGF水平也降低，差異有統計學意義(t值分別為2.85、4.40、9.09，P<0.05)。治療3個月后B組和C組血清HIF-1α和VEGF水平低于A組，差異均有統計學意義(B組與A組比較，t值分別為6.21、2.56；C組與A組比較，t值分別為10.17、9.69，P<0.05)；C組血清HIF-1α和VEGF水平低于B組，差異有統計學意義(t值分別為5.68、8.76，P<0.05)。見表1。

表1　　治療前、后各組血清TNF-α和VEGF水平比較

*：P<0.05，與健康對照組比較；#：P<0.05，與治療前比較；△：P<0.05，與治療后A組比較；▲：P<0.05，與治療后B組比較。

3討論

CA一般由人乳頭狀瘤病毒引起，CA的發生、發展和復發與各種細胞因子密切相關。發生CA時，白細胞介素(IL)平衡失調，影響機體內環境穩定，導致免疫功能紊亂，如干擾素-γ(IFN-γ)、IL-2、IL-12等細胞因子分泌減少，IL-4、IL-5、IL-10等細胞因子分泌增加[1-3]。相關研究表明，作為HIF-1α重要的調控因子，VEGF在CA組織中的表達明顯高于健康對照組，提示VEGF的高表達促進了CA的發生和發展，與CA的過度增殖及新生血管的形成有著密切的關系[4-9]。ALA-PDT治療作為一種非創傷性方法，具有選擇性好、患者痛苦小、不良反應少等優勢，同時對CA的復發也有一定的預防作用，其作用機制就是光動力變化過程中產生大量活性氧，這些活性氧能通過直接殺傷作用、損傷血管效應、抗病毒免疫效應達到治療CA的目的[10-11]。由于CA易復發，很多學者都主張聯合療法，以降低CA的復發率。茶多酚作為一種綠茶的主要活性成分，不良反應少，不僅能增強機體抵抗力、調節機體免疫、降脂、降糖、解毒，還能誘導腫瘤細胞凋亡，抗腫瘤新生血管生成，具有抗腫瘤的作用。有研究表明，茶多酚可通過升高IL-12水平，增強機體免疫功能，同時通過抑制VEGF和刺激T細胞毒性來防治皮膚癌[12]。因此，筆者嘗試ALA-PDT聯合口服茶多酚治療CA，分析療效及其對CA患者血清HIF-1α和VEGF水平的影響。

本研究結果顯示，治療前CA患者血清HIF-1α和VEGF水平明顯高于健康對照組，提示二者在CA的發生、發展中可能發揮著重要作用。CA的瘤體迅速增長，進而導致瘤組織缺氧。在低氧條件下，HIF-1α水平升高，使瘤細胞對缺氧產生適應性調節，維持瘤體的生長。其作用機制是通過促進VEGF的分泌，促進血管內皮細胞的增生和抑制其凋亡，增加毛細血管通透性而促進血管生成，促進CA的發生與發展。治療后，各組患者血清HIF-1α和VEGF水平均有不同程度的變化，尤以ALA-PDT聯合茶多酚治療組明顯，血清HIF-1α和VEGF水平最接近正常水平且復發率低，提示茶多酚通過降低血清HIF-1α和VEGF水平，抑制內皮細胞增生和血管生成，進而抑制瘤體的發生、發展。單純ALA-PDT療法和單純激光治療組患者HIF-1α和VEGF水平雖有變化，但仍明顯高于正常水平，可能與去除疣體后未復發和ALA-PDT本身有激發機體抗病毒免疫效應有關。研究結果表明，HIF-1α和VEGF在CA的發生、發展中可能發揮著重要作用，HIF-1α和VEGF水平的升高，可促進瘤體的發生與發展。

綜上所述，ALA-PDT聯合茶多酚治療CA效果明顯，復發率低，且無明顯不良反應，其作用機制為茶多酚可以降低HIF-1α和VEGF的分泌，減少內皮細胞過度增生及新生血管生成，進而抑制瘤體的發生與發展，但具體作用機制有待進一步研究。

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(收稿日期：2015-10-16)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.045

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0677-03