豬巨細(xì)胞病毒病的流行特點(diǎn)及其診斷方法

杜海燕　荊汝頂　韓俊偉　李 磊　常衛(wèi)波

（1.新鄉(xiāng)市動物疫病預(yù)防控制中心，河南新鄉(xiāng)　453000；2.新鄉(xiāng)市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南新鄉(xiāng)　453000）

豬巨細(xì)胞病毒病的流行特點(diǎn)及其診斷方法

杜海燕1荊汝頂1韓俊偉2李 磊2常衛(wèi)波2

（1.新鄉(xiāng)市動物疫病預(yù)防控制中心，河南新鄉(xiāng)453000；2.新鄉(xiāng)市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南新鄉(xiāng)453000）

豬巨細(xì)胞病毒病是由豬巨細(xì)胞病毒（PCMV）引起仔豬的一種條件性傳染病，主要是侵害豬的呼吸系統(tǒng)，臨床上以鼻炎為特征，在感染的鼻甲骨黏膜黏液腺中巨細(xì)胞可見到大量嗜堿性核內(nèi)包涵體，又稱包涵體鼻炎。PCMV是繼偽狂犬病的病毒之后發(fā)現(xiàn)的第二個豬皰疹病毒，屬于皰疹病毒科、β皰疹病毒亞科、巨細(xì)胞病毒屬的成員，它可感染人、鼠、牛、馬、貓、豬等多種哺乳動物。由于該病常呈隱形感染，在生產(chǎn)中不易引起重視，給養(yǎng)豬業(yè)造成很大的疫病隱患。

巨細(xì)胞病毒病；流行特點(diǎn)；診斷

1 流行病學(xué)

豬巨細(xì)胞病毒病在豬群中分布相當(dāng)廣泛，常規(guī)條件下飼養(yǎng)的大多數(shù)豬群均存在PCMV 感染，尤其仔豬的PCMV抗體陽性率都最高，有研究對豬群進(jìn)行PCMV 感染狀況的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示PCMV 的感染呈逐年增加趨勢，不同的飼養(yǎng)環(huán)境條件下，散養(yǎng)戶豬PCMV 陽性率最高。該病毒主要在豬肺泡巨噬細(xì)胞中增殖破壞機(jī)體免疫系統(tǒng)，造成機(jī)體感染后抵抗力降低，易并發(fā)和繼發(fā)其他病原體感染，調(diào)查顯示PCMV與豬偽狂犬病毒，豬圓環(huán)病毒2型和豬藍(lán)耳病病毒存在混合感染現(xiàn)象。該病毒在體內(nèi)外有高度的宿主特異性，僅豬感染，大多數(shù)為亞臨床型，臨床發(fā)病則很少見。其他動物如兔、小鼠、蒼鼠、雞胚和牛均不感染。PCMV 對豬體內(nèi)的上皮細(xì)胞有特別感染嗜好，最易傳染和擴(kuò)散的途徑是上呼吸道。通常認(rèn)為1 個月齡左右的豬是經(jīng)鼻感染的，仔豬可能主要是通過與母豬接觸而感染。病毒可由鼻、眼分泌物及子宮頸黏液等排出，尿液也會加大環(huán)境污染。可能經(jīng)飛沫和吮乳途徑在豬群中呈水平傳播。本病毒還可通過胎盤傳播，垂直感染胎兒，從初次感染PCMV 懷孕母豬的眼、鼻分泌液、尿液和子宮頸黏液中都可以分離出病毒。也可從公豬的睪丸和附睪中分離出該病毒，所以通過交配也能發(fā)生傳染。該病毒在56℃經(jīng)30 min滅活。22℃只能保持24 h活性。但將患病仔豬鼻黏膜組織保存于- 30℃，其感染力至少可維持5 個月，病毒液在-80℃下可保存2 年以上。PCMV 對如氯仿和乙醚等有機(jī)溶劑敏感，經(jīng)過試劑處理，可使其喪失感染力。

2 臨床癥狀及病理變化

豬巨細(xì)胞病毒病感染的潛伏期大約10～20d，新生仔豬感染死亡率可高達(dá)50%。患病仔豬上呼吸道分泌物增多，流鼻涕或膿性鼻涕，眼瞼水腫，糞便呈黃白色糊狀，增重緩慢。育肥豬后肢明顯的彌漫性出血，全身皮下組織感染嚴(yán)重發(fā)紫，耳朵發(fā)紫。感染后的母豬精神倦怠，食欲頹廢，尿液發(fā)黃，有的出現(xiàn)神經(jīng)失調(diào)，感染1個月后，母豬流產(chǎn)，產(chǎn)出木乃伊胎，未流產(chǎn)的母豬所產(chǎn)仔豬也會在出生后大量死亡，存活的仔豬發(fā)育不良、增重緩慢、下頜水腫。公豬感染后眼瞼有明顯的淚痕。病毒首先在鼻粘膜腺、淚腺復(fù)制，經(jīng)過3～5d的復(fù)制后，迅速擴(kuò)散到其它組織器官，可引起肝臟灶狀壞死，腎組織水腫發(fā)紫，神經(jīng)系統(tǒng)紊亂，青年豬肉眼可見全身淤斑。胸腔和皮下組織常見水腫，胸腔可見心周和胸膜滲出液，肺水腫明顯，肺小葉腹尖呈紫色并實(shí)變，在喉頭及跗關(guān)節(jié)周圍水腫最明顯，腎包膜下水腫明顯，外觀呈斑點(diǎn)狀或完全發(fā)紫色，小腸變薄多有出血，胃呈卡它性炎癥或潰瘍。

3 診斷方法

3.1病毒分離與鑒定

采集胎兒或新生仔豬的鼻汁，或鼻腔、喉頭、結(jié)膜等拭子以及肺、腎、淋巴結(jié)等材料，接種肺泡巨噬細(xì)胞或輸卵管類成纖維細(xì)胞，進(jìn)行病毒分離，也可以用肺泡巨噬細(xì)胞直接培養(yǎng)分離病毒。接種病料后培養(yǎng)7～14 d，觀察細(xì)胞病變。用熒光抗體染色檢查細(xì)胞核內(nèi)包涵體出現(xiàn)情況，或檢查細(xì)胞漿內(nèi)的熒光抗原。如用已知標(biāo)準(zhǔn)毒株的免疫血清，以標(biāo)準(zhǔn)的病毒培養(yǎng)物為對照，對分離毒株進(jìn)行中和試驗(yàn)，可對病毒分離物予以鑒定。電鏡檢查在感染的細(xì)胞核和細(xì)胞漿內(nèi)（主要為空泡內(nèi)）能發(fā)現(xiàn)結(jié)晶狀排列的病毒。

3.2血清學(xué)試驗(yàn)

血清抗體是確證豬群中存在PCMV 最可信的方法。對育肥豬隨機(jī)采取血清樣品做間接免疫熒光試驗(yàn)或者EL ISA 試驗(yàn)測定，將感染病毒的肺泡巨噬細(xì)胞或類成纖維細(xì)胞用丙酮固定，然后進(jìn)行間接熒光抗體染色法檢查，其試驗(yàn)敏感性比病毒中和試驗(yàn)至少高8 倍。也可應(yīng)用感染的輸卵管類上皮細(xì)胞作EL ISA，它與間接熒光抗體具有相同的敏感性。

3.3分子生物學(xué)檢測方法

采用直接從具有不同臨床癥狀的病豬肺和鼻黏膜的刮取物提取DNA 進(jìn)行PCR擴(kuò)增的方法，成為PCMV 檢查和監(jiān)測的常規(guī)方法。PCMV的主要衣殼蛋白（MCP）基因長度有4026個核苷酸系列，編碼一個含1341個氨基酸殘基的蛋白質(zhì)。并預(yù)測PCMV主要衣殼蛋白的質(zhì)量為151456Da，和其他皰疹病毒主要衣殼蛋白質(zhì)量相等。并且根據(jù)衣殼蛋白基因設(shè)計一對引物，以檢測PCMV感染，該P(yáng)CR方法對于檢測慢性PCMV感染比傳統(tǒng)方法更有效。為了解決種間特異性，針對DNA聚合酶基因設(shè)計兩對引物，分別為415bp和257bp，構(gòu)建一種巢式PCR方法，成為區(qū)分種間特異性的有效方法。目前用熒光實(shí)時PCR方法極大的提高了檢測的效率和靈敏度。

4 預(yù)防控制措施

目前尚無有效的PCMV疫苗預(yù)防該病，可通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理有效控制本病的發(fā)生。進(jìn)行自繁自養(yǎng)，不從疫區(qū)引進(jìn)豬種，若須引進(jìn)種豬時，進(jìn)行血清學(xué)檢查，以防帶來新的傳染源或帶病毒的豬。針對發(fā)生本病的豬場，可使用抗生素藥物防治細(xì)菌引起的繼發(fā)感染，從而控制病情蔓延。并且可通過增強(qiáng)自身免疫力來達(dá)到治療和預(yù)防該病的發(fā)生。

［1］王宇英.豬巨細(xì)胞病毒感染的流行、診斷和防治［J］.獸醫(yī)導(dǎo)刊，2015，（16）：101.