宮頸癌中EGFR和FSCN1的表達及其相關性

黃必飛，王超群，趙永明，孫鑫鑫，王倩，曾悅，邵俊康，王艷

（東陽市人民醫院，浙江 金華 322100，1.病理科；2.腫瘤外科；3.腫瘤內科）

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宮頸癌中EGFR和FSCN1的表達及其相關性

黃必飛1，王超群1，趙永明2，孫鑫鑫1，王倩1，曾悅1，邵俊康1，王艷3

（東陽市人民醫院，浙江 金華 322100，1.病理科；2.腫瘤外科；3.腫瘤內科）

[摘 要]目的：探討宮頸癌中表皮生長因子受體1（EGFR）及Fascin-1（FSCN1）蛋白的表達及其相關性。方法：采用免疫組織化學EnVision法檢測120例宮頸癌組織中EGFR及FSCN1蛋白的表達。結果：宮頸癌組織中EGFR蛋白陽性率為89.2%（107/120），FSCN1蛋白陽性率為99.2%（119/120），其中強陽性率為88.3%（106/120）。EGFR陽性表達與FSCN1強陽性表達呈顯著正相關（P＜0.01）。結論：宮頸癌中EGFR可能參與正性調控FSCN1表達。

[關鍵詞]表皮生長因子受體1；Fascin-1；宮頸腫瘤；免疫組織化學

宮頸癌是全球女性最常見的惡性腫瘤，其發病人數和死亡人數均位于女性惡性腫瘤前列[1]。近年來，雖然宮頸癌的綜合治療有了新的進展，但其仍然是導致中老年女性死亡的重要原因之一，且發病年齡有年輕化趨勢[2]。因此，尋找宮頸癌發生發展的分子機制，并對其進行干預，對提高患者生存質量和生存率有著重要意義。表皮生長因子受體1（EGFR）是促腫瘤發生發展的重要因子，其在宮頸癌侵襲轉移過程中發揮了重要作用[3-4]。Fascin-1（FSCN1）是一種相對分子質量為5.5×104的細胞骨架蛋白，其高表達與多種腫瘤發生發展密切相關[5-10]。有研究表明，激活食管癌中EGFR信號通路可上調FSCN1表達[11]。然而，關于宮頸癌中EGFR和FSCN1之間的關系尚鮮見相關報道。本研究采用免疫組織化學EnVision法檢測宮頸癌組織中EGFR和FSCN1蛋白的表達并分析其相關性，以進一步探索影響宮頸癌發生發展的分子機制。

1　資料和方法

1.1一般資料 收集2007年1月到2012年12月東陽市人民醫院病理科宮頸鱗狀細胞癌石蠟標本120例，患者年齡34～77歲，中位年齡55歲。按WHO標準（2003年）對各病例進行分級和分期。組織學分化：高分化21例，中分化84例，低分化15例；TNM分期：I期81例，II/III期39例；淋巴結轉移：有淋巴結轉移26例，無淋巴結轉移94例；浸潤深度：＞1/2 者75例，＜1/2者45例。所有病例術前均未行放療、化療等抗腫瘤治療。

1.2免疫組織化學染色 所有組織均以10%中性甲醛溶液固定，石蠟包埋，4 μm連續切片，用于HE及免疫組織化學染色。免疫組織化學染色采用EnVision二步法：枸櫞酸鹽緩沖液高壓熱修復，0.3% H2O2室溫孵育10～15 min，鼠抗人FSCN1單克隆抗體（克隆號：55K-2，Santa Cruz公司）及兔抗人EGFR多克隆抗體（克隆號：1005，Santa Cruz公司）均以1:100稀釋比例滴加，室溫孵育1 h，之后用Dako公司EnVision二步法試劑盒室溫孵育30 min，最后用DAB顯色劑顯色5～8 min，蘇木素復染、脫水、封蠟。1.3 免疫組織化學評分 ①FSCN1染色主要定位于細胞漿，其結果判定采用以下標準：染色強度計分：0（無染色），1（淡黃色），2（棕黃色），3（棕褐色）；染色范圍計分：0（無陽性細胞），1（1%～25%），2 （26%～50%），3（51%～75%），4（76%～100%）；兩者相加得分0～7分。以得分≥3分且切片中≥5%細胞染色視為陽性，其中得分為6～7分者視為強陽性，其余為弱陽性。②EGFR染色主要定位于細胞膜和細胞漿，本研究中以≥10%癌細胞可見弱或強的胞膜著色視為陽性。

1.4統計學處理方法 數據處理采用SPSS19．0統計軟件。樣本率比較應用x2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1EGFR和FSCN1蛋白在宮頸癌中的表達及分布

EGFR蛋白主要定位于癌細胞胞膜和胞漿；FSCN1蛋白主要定位于癌細胞胞質中，血管內皮細胞均陽性表達（見圖1）。宮頸癌組織中EGFR蛋白陽性率為89.2%（107/120）。120例宮頸癌中，119例（占99.2%）FSCN1蛋白表達為陽性，其中包含106例（占88.3%）強陽性病例。

A：EGFR陽性表達（×200）；B：FSCN1強陽性表達（×100）圖1　宮頸鱗狀細胞癌免疫組織化學染色（EnVision二步法）

2.2宮頸癌中EGFR和FSCN1的相關性 表1顯示，EGFR陽性組中FSCN1強陽性率為91.6%，而在EGFR陰性組中FSCN1強陽性率為61.5%，宮頸癌中EGFR陽性表達與FSCN1強陽性表達呈顯著正相關（P＜0.01）。

表1　宮頸癌中EGFR和FSCN1的相關性 [n（%）]

3　討論

EGFR是表皮生長因子受體家族（HER/erbB家族）的重要成員，其廣泛分布于人體各組織中，是一種具有酪氨酸激酶活性的I型跨膜糖蛋白受體，它由胞外N末端配基結合區、跨膜親脂片段和胞內C末端酪氨酸激酶區三部分組成。當配體（如EGF）結合于胞外區后，EGFR形成二聚體，引起胞內區自身磷酸化并激活酪氨酸激酶，啟動一系列下游信號轉導通路調節細胞各方面功能，包括細胞增殖、凋亡和分化[12]。研究表明，在多種腫瘤細胞中存在EGFR的高表達或異常活化，其通過激活下游PI3K-AKT和MEK-ERK1/2兩條主要的信號通路，在腫瘤細胞增殖、分化以及侵襲轉移過程中起了重要作用[13]。國內外已有大量研究[3-4]證實，宮頸癌中EGFR高表達與患者淋巴結轉移、局部浸潤等預后不良因素相關。

FSCN1是一種相對分子質量為55 000的細胞骨架蛋白，它與細胞膜絲狀偽足、片狀偽足、微棘的形成密切相關，從而促進細胞運動、遷移及腫瘤細胞侵襲轉移[14]。研究[5-10]表明，FSCN1在胃癌、乳腺癌、非小細胞肺癌、結直腸癌等多種腫瘤中表達增強，且能顯著增強胃癌及非小細胞肺癌細胞的侵襲能力。因此，FSCN1在腫瘤發生及進展過程中發揮了重要作用。目前，國內外僅有少數文獻報道了宮頸癌中FSCN1的表達[15-17]，這些研究顯示宮頸癌中FSCN1陽性率在67.0%到90.9%之間。而本研究中FSCN1陽性率為99.2%，其中強陽性率為88.3%，與先前的研究比較陽性率偏高，我們分析可能是由于這些研究間采用了互不相同的FSCN1評分標準，或者是因為選取了不同地區的宮頸癌患者。

有研究[11]顯示食管癌中激活EGFR信號通路可上調FSCN1表達。本研究通過免疫組織化學技術檢測了120例宮頸癌組織中EGFR和FSCN1的表達，顯示EGFR與FSCN1強陽性表達呈正相關。但本研究中因FSCN1僅1例陰性，故分層分析不能顯示EGFR與FSCN1陽性（包含全部陽性病例）之間的關系。以上結果初步顯示宮頸癌中EGFR可能參與正性調控FSCN1表達，有待進一步大樣本進行驗證。

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（本文編輯：丁敏嬌）

·臨 床 經 驗·

Expression and correlation of EGFR and FSCN1 in cervical cancer

HUANG Bifei1,WANG Chaoqun1,ZHAO Yongming2,SUN Xinxin1,WANG Qian1,ZENG Yue1,SHAO Junkang1,WANG Yan3.1.Department of Pathology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100; 2.Department of Surgical Oncology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100; 3.Department of Medical Oncology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100

Abstract:Objective:To explore the expression of EGFR and FSCN1 protein in cervical cancer and its correlation.Methods:The expression of EGFR and FSCN1 in 120 cases of cervical cancer was evaluated with immunohistochemical technique,EnVision method.Results:EGFR protein expression rates in cervical cancer was 89.2% (107/120).FSCN1 protein positive rate in cervical cancer was 99.2% (119/120),in which strong positive rate was 88.3% (106/120).EGFR positive expression was signifi cantly positive correlation with FSCN1 strong positive expression (P＜0.01).Conclusion:EGFR may participate in positive regulation FSCN1 expression in cervical cancer.

Key words:EGFR; FSCN1; cervical neoplasms; immunohistochemistry

作者簡介：黃必飛（1971-），男，浙江東陽人，副主任醫師。

基金項目：金華市科技計劃重點項目（2012-3-021）；浙江省醫藥衛生科技計劃項目（2012KYB230）；金華市科技計劃項目（2013-3-097）。

收稿日期：2015-02-06

[中圖分類號]R651.65

[文獻標志碼]B

DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.01.017