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卵黃抗體在新生仔豬養殖中的應用

2016-04-05 15:16:20王平李小磊
山東畜牧獸醫 2016年9期

王平 李小磊

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卵黃抗體在新生仔豬養殖中的應用

王平 李小磊

(山東省泰安市岱岳區畜牧獸醫局 271000)(山東藍道夫生物科技有限公司)

新生仔豬成活率的高低至關重要,新生仔豬出生面臨著環境、營養、免疫和病原壓力等多重挑戰。傳統意義上解決新生仔豬成活率低的方法有疫苗注射、抗生素的使用、血漿和初乳等,現在的大環境之下,這些方法的作用各有弊端,本文著重介紹了新型綠色添加劑卵黃抗體,卵黃抗體是通過免疫注射產蛋雞,由其產生的相應抗體,卵黃抗體能抑制細菌吸附、中和病毒和凝集作用,并且在胃腸道中穩定,具有高親和力。用卵黃抗體預防和治療疾病,安全高效且無害,是一種前景廣闊的安全綠色添加劑。

仔豬成活率的高低直接關影響飼養的效益。尤其是在當前養殖效益良好的情況下,仔豬成活率更加關系到養殖的成敗,提高仔豬成活率成為大家關注的焦點。

1 仔豬的新生挑戰

出生仔豬在上皮絨毛膜胎盤中不能通過胎盤獲得免疫,所以仔豬出生后沒有免疫保護。新生仔豬面臨著諸多挑戰。

1.1 環境挑戰 包括衛生條件(產房、水、飼料)、居住條件(無新鮮空氣、無適宜的溫度、母豬擠壓仔豬)和出生前、出生時和出生后的管理。

1.2 營養挑戰 包括能量虧損、母豬產乳不足、窩產仔多、遺傳限制、病理性泌乳綜合癥和仔豬找不到乳頭,初乳供給不足。其中能量的虧損能引起體溫下降,同時建立機體自身免疫系統也需要能量。

1.3 免疫挑戰 仔豬出生后沒有免疫保護,初乳提供必需的免疫球蛋白,且在出生后24h母豬初乳中免疫球蛋白水平迅速下降。

1.4 病原挑戰 仔豬出生后面對的疾病壓力主要有大腸桿菌、輪狀病毒、傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、梭狀芽孢桿菌和隱孢子蟲等。(1)梭狀芽孢桿菌(clostridium),是致病性革蘭氏陽性芽孢菌,存在于豬的大腸。典型的感染出生后第24~72小時的仔豬,呈膏狀或糊狀腹瀉,腐臭味腹瀉,常伴有血紅色。(2)大腸桿菌(E.coli)是致病性革蘭氏陰性菌,存在于大腸。是引起仔豬腹瀉最重要的病原。典型感染出生后5d和斷奶后5d內的仔豬,呈水樣、連續性腹瀉。嚴重暴發時死亡率高達7%,在個別未處理的豬群中死亡率高達100%,水腫病是由某種血清型的產腸毒素大腸桿菌引起,細菌粘附在絨毛上,并產生毒素,該毒素損害小血管壁(和腦)流體或水腫聚集在胃組織和大腸中,通常在斷奶后的1~4周可見,可能不出現腹瀉,但是能出現呼吸問題和神經癥狀。(3)隱孢子蟲(Crypto)是原蟲性寄生蟲,生長和繁殖主要在小腸壁,通常損害小腸壁(尸體檢驗),但是死亡率低,由細菌或病毒引起的繼發性感染會增加死亡率。7~21日齡發生腹瀉時,機體很可能對抗生素沒有反應,呈水樣褐色腹瀉。(4)豬流行性腹瀉病毒(PED)是相當大的囊膜病毒,損害腸絨毛,減少吸收表面,體液減少和脫水;流行性腹瀉I型僅影響感染生長豬,流行性腹瀉II型感染所有日齡的豬,包括哺乳仔豬和性成熟母豬,潛伏期約2d,發病期持續7~14d,哺乳仔豬死亡率40%。(5)傳染性胃腸炎病毒(TGE) 是高度傳染性冠狀病毒,經口進入豬體,在絨毛繁殖并破壞絨毛,感染動物排出的糞便中含有大量的病毒,很可能發生在小于28日齡的仔豬,非常嚴重的水樣腹瀉,小于7日齡的仔豬在感染后的2~3d內死亡率幾乎100%。(6)輪狀病毒(Rotavirus)在環境中的長期存在,是引起豬腹瀉的最廣泛的致病病毒,可能發生在7~10日齡的仔豬,水樣腹瀉,腹瀉伴隨有脫水、吸收不良和持續3~4d的腹瀉,眼睛凹陷(脫水)、直腸周圍皮膚潮濕。目前針對這些挑戰有以下4種控制方法:①疫苗:免疫應答慢,且抗腸道感染效果不好。②抗生素:有耐藥性,食物中藥物殘留,抗病毒感染無效,還能損害腸道有益微生物菌群。③血漿,初乳等:非特異性抗體;存在安全問題。④雞蛋免疫球蛋白(IgY)(免疫球蛋白Y)。

2 卵黃抗體IgY的含義

卵黃抗體gY是卵黃抗體是通過免疫注射產蛋雞,由其產生的相應抗體。屬于重鏈球狀蛋白,糖蛋白-糖鏈與一些糖蛋白氨基酸殘基結合,被免疫系統利用以識別和中和外源物質。哺乳動物具有免疫球蛋白G,鳥類具有免疫球蛋白Y(Y=“蛋黃”),免疫球蛋白Y給雞提供被動免疫,免疫球蛋白G和Y是功能性模擬分子。免疫球蛋白Y多具有一個區域,所以較重,當雞蛋在卵巢時母雞轉移免疫球蛋白Y到卵黃中。只要雞蛋從輸卵管通過,它就從輸卵管分泌物中獲得免疫球蛋白A和M(蛋白)。卵黃抗體能給動物幼仔提供腸道健康。IgY能提高生長性能的五大優勢。

2.1 抑制細菌和致病性微生物吸附,中和病毒 (1)病原不能從宿主獲得養分,病原不能侵襲腸壁細胞,致病菌很容易脫落。產腸毒素大腸桿菌通過菌毛粘附和定居吸附在腸細胞,腸毒素從定居的產腸毒素大腸桿菌中釋放,并引起嚴重腹瀉,因此造成巨大的經濟損失。免疫球蛋白Y能有效阻斷細菌定居過程的最初階段。(2)免疫球蛋白Y阻止病毒入侵,因此病毒不能進入宿主細胞,病毒被滅活,只要病毒在腸細胞復制,病毒細胞表面受體結合就能引起病毒感染,病毒復制引起腸絨毛上皮細胞功能異常/死亡,消化和吸收功能迅速下降。免疫球蛋白能有效阻斷感染過程的最初階段。(3)免疫球蛋白Y同時“粘合”抗原/外源粒子,并停止抗原/外源粒子的運動,免疫球蛋白Y輔助免疫細胞(巨噬細胞)捕獲和清除致病菌,免疫球蛋白Y間接提高宿主免疫狀態。

2.2 高穩定性 IgY與一般哺乳動物IgG相比,IgY具有較強的耐熱、耐酸、抗離子強度和一定的抗酶降解能力。在低于75℃條件下,IgY具有良好的熱穩定性。IgY制劑在4℃貯存5年或在室溫貯存6個月其活性仍無明顯變化或下降,65℃時可保持24h以上,70℃時加熱90min后其活性才明顯下降60℃,30min條件下巴氏消毒不影響IgY;高于80℃,大部分IgY失去活性。IgY在pH4.0~11.0時比較穩定,pH3.0~3.5時活性迅速下降,pH12時活性亦有所下降。IgY對胃蛋白酶有較高的抵抗力,但對胰蛋白酶十分敏感。將胃蛋白酶和IgY在pH2.0溫育1h后,幾乎所有活性喪失,但在pH4.0時1h后可保持91%的活性,甚至溫育10h后仍有63%活性。IgY分別與胰蛋白酶和胰凝乳酶溫育8h,活性分別保持39%和41%。

2.3 結合物 IgY不與金色葡萄球菌A蛋白結合,不與哺乳動物Fc受體結合,對哺乳動物補體無固定作用。在診斷上更具有特異性和靈敏性。

3 卵黃抗體的前景

(1)2006年1月,歐盟已全面禁止在飼料中使用生長素、抗生素作為飼料生長添加劑。雖然美國目前沒有明確禁止抗生素在養殖業中的使用,但日前美國食品和藥物管理局局長(FDA)馬格麗特·漢伯格表示:美國FDA正密切關注農業中使用抗生素與細菌耐藥性日益流行之間的聯系。根據FDA6月發布的指南草案,關于“醫學上重要的抗菌藥物在食用動物中的合理應用”,被廣泛認為是該機構準備限制常規使用的信號。(2)據統計,每年由細菌性疾病造成的損失占養殖業總收入的3%~4%。抗生素的長期和廣泛應用,導致了腸道菌群失衡、藥物殘留、耐藥性及其傳遞和傳播等負效應,同時也給出口創匯帶來損失,間接影響了養殖業自身的經濟效益。隨著人們對食品衛生和食品安全的不斷重視,尤其是抗生素的殘留問題引起普遍關注,我國的飼料用料和飼料安全問題遇到了嚴峻的挑戰,因此尋找優質高效低殘留的綠色環保新型飼料添加劑。(3)卵黃抗體不僅可以針對特定病生物制備特異性抗體,還使用微膠囊包被技術,Shimizu等(1993)用脂質體包被,在pH2.8的胃蛋白酶中37℃溫育1h,仍可保持80%的活性。并且卵黃抗體制備工藝不復雜,產量大,效率高,用卵黃抗體預防和治療疾病不會存在藥物殘留,安全有效,是一種新型的前景廣闊的飼料添加劑。

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