專家答疑　專家就豬偽狂犬病常見問題答疑解惑

特邀嘉賓（排名不分先后）崔尚金：中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所研究員劉思當：山東農業(yè)大學教授白挨泉：佛山大學教授

本刊編輯/張金輝

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專家答疑專家就豬偽狂犬病常見問題答疑解惑

特邀嘉賓（排名不分先后）
崔尚金：中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所研究員
劉思當：山東農業(yè)大學教授
白挨泉：佛山大學教授

本刊編輯/張金輝

豬偽狂犬病是目前養(yǎng)豬場中常見的疾病之一，可導致大量豬群發(fā)病死亡，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經濟損失。豬群發(fā)病后尚無有效的藥物治療，只有通過疫苗免疫來預防豬偽狂犬病的發(fā)生，但由于多種原因的影響免疫效果不是很理想，時常導致豬群發(fā)病。那么，導致疫苗免疫失敗的原因有哪些？應該如何選擇疫苗？如何維持豬場豬群的穩(wěn)定？如何徹底凈化豬偽狂犬病？等等有關豬場防控豬偽狂犬病的諸多需要解決的問題，為此，我們邀請到了行業(yè)內的知名豬病專家就豬偽狂犬病常見問題為大家指點迷津。

目前豬偽狂犬病的流行有哪些特點？

崔尚金研究員：2011年11月份開始，國內部分省市出現(xiàn)母豬流產，仔豬和保育豬出現(xiàn)神經癥狀。犬貓與病死豬接觸后出現(xiàn)奇癢癥狀。新型偽狂犬病毒感染母豬、哺乳仔豬、保育豬、小中大豬全部表現(xiàn)為顯性感染，其中中大豬、母豬都會表現(xiàn)為典型的偽狂犬癥狀而死亡。新型偽狂犬病將是今后幾年內我國養(yǎng)豬業(yè)中危害最重要的傳染病之一，對我國養(yǎng)豬生產危害以及造成的經濟損失巨大，各豬場防控新型偽狂犬病壓力很大，絲毫不能松懈。

您認為導致豬偽狂犬病毒新毒株出現(xiàn)的原因有哪些？

崔尚金研究員：豬偽狂犬病毒新毒株出現(xiàn)的原因分析可能為：

第一，我們國家從免疫角度沒有形成統(tǒng)一凈化的指導思路，不同地區(qū)的免疫不平衡，免疫的操作過程不夠科學，企業(yè)管理不到位，從而導致免疫失敗，容易給病毒的增殖創(chuàng)造機會；

第二，新型豬偽狂犬流行毒株的毒力增強，疫苗產生的保護力不足以抵抗強毒入侵，以及新型豬偽狂犬流行毒株抗原發(fā)生變異；

第三，豬群陽性率居高不下，造成豬場內新型豬偽狂犬病毒有循環(huán)傳播機會，特別是后備種公豬引種不慎，由于種豬帶毒，引入病原體，導致本病快速傳播；

第四，有些廠的所謂的gE缺失株，并不純凈；加上疫苗廠只重視生產，只重視提高效價和免疫次數(shù)，并不重視合理的疫苗免疫程序，從而造成免疫壓力或者免疫失敗。

現(xiàn)在應該從科學角度分析病毒的基因組，找出病毒的進化過程，分析病毒為何變異，爭取從源頭阻斷病毒的變異，以免病毒再次變異。

目前市場上您所了解的豬偽狂犬疫苗種類有哪些？

劉思當教授：免疫接種偽狂犬疫苗是預防、控制及凈化偽狂犬病最為有效措施，目前市場上商品化偽狂犬疫苗主要有滅活疫苗、自然缺失弱毒活疫苗、基因工程缺失弱毒活疫苗，而亞單位疫苗、核酸疫苗、重組疫苗等尚處于實驗室研發(fā)階段。滅活疫苗是將豬偽狂犬病毒接種于雞胚或者細胞，當病毒滴度達到要求時收獲病毒，甲醛等滅活后加入免疫佐劑，從而制成滅活苗。國內常用的滅活疫苗毒株有ZJ01株、鄂A株等；相比較其他疫苗，滅活苗安全性高，散毒可能性小，但是其不能誘導機體產生細胞免疫，免疫效果一般較差。自然缺失弱毒活疫苗是將分離到的流行毒株經非豬源細胞多次傳代致弱而獲得的疫苗，國內常用的毒株有匈牙利的Bartha株及羅馬尼亞的Buk株；自然弱毒缺失疫苗免疫原性好，但由于是自然致弱，存在毒力返強的安全性問題?；蚬こ倘笔醵净钜呙缡侵溉藶榈貙慰袢《径玖ο嚓P基因如TK、gE、gI等基因缺失，致弱病毒的同時又保持其本身的免疫原性。國內常用的毒株有雙基因缺失的Bartha K61株（gE-/ gI-）、ZJ01株（gE-/gI-）及三基因缺失的HB98株（TK-/ gE-/gG-）、SA215株（gE-/gI-/TK-）等?；蚬こ倘笔醵净钜呙缭诒Ａ舳局昝庖咴缘耐瑫r，人為的缺失目的基因，使病毒毒力返強可能性變小，安全性提高。該疫苗能有效地抑制偽狂犬病毒在體內的復制，減少帶毒豬排毒時間及排毒量。但是其也存在與動物體內自然野毒或者不同的基因缺失疫苗間發(fā)生基因重組而突變成強毒株的可能性。同時由于缺失gE基因可以用ELISA方法區(qū)分疫苗抗體與野毒抗體，一些國家和地區(qū)已經開始推廣使用基因工程缺失弱毒活疫苗免疫豬群，配合ELISA等鑒別診斷方法實施偽狂犬病的控制與凈化，并取得了理想的效果。

崔尚金研究員：目前市場上所了解的豬偽狂犬疫苗種類大體分類如下：

①從種毒上來說：主要有單基因缺失和多基因缺失兩種疫苗毒。

②從佐劑上來說：水佐劑、油佐劑和水包油佐劑3種。

③從抗原量上來說：不同國家、不同廠家抗原含量有差異，疫情也不同，有些國家偽狂犬已凈化為陰性，各國的標準不同。

導致豬偽狂犬疫苗免疫失敗的原因主要是什么？

崔尚金研究員：豬偽狂犬疫苗免疫失敗的主要原因如下：

①疫苗因素：疫苗的內在質量、類型以及保存運輸條件，以及母源抗體等干擾免疫效果。

②疫苗免疫過程中人為造成的因素：比如漏免，免疫部位不準確，稀釋后的疫苗，免疫時間過長等諸多因素，均可造成免疫失敗。

③免疫程序不合理、不科學，造成免疫失敗，應該根據(jù)疫苗性能制定科學的免疫程序。

④新型豬偽狂犬流行毒株抗原發(fā)生變異，毒力增強，疫苗的保護率不足以抵抗病毒入侵。

劉思當教授：豬偽狂犬疫苗對于我國偽狂犬病的預防、控制和凈化起到了非常重要的作用。國內多數(shù)規(guī)?；i場都實施了豬偽狂犬疫苗的免疫接種，但由于流行毒株的變異、免疫程序不合理、疫苗選擇不當?shù)榷喾N因素導致偽狂犬疫苗免疫失敗，使偽狂犬病野毒抗體陽性率居高不下，并導致豬場生產水平下降，健康狀況惡化，直接或間接的給豬場造成較大的經濟損失。造成豬場偽狂犬疫苗免疫失敗的原因主要由以下幾種：1）流行毒株的變異：近年來，流行毒株變異速度加快，變異毒株病毒毒力增強，現(xiàn)有疫苗與其交叉保護率下降，不能給豬群提供足夠的保護，導致免疫失敗。2）免疫程序不合理：豬場未在免疫監(jiān)測指導下科學制定適合本場的免疫程序。生搬硬套說明書或借鑒他人經驗，隨意制定免疫程序。許多豬場所制定的免疫程序存在免疫劑量、免疫次數(shù)及免疫時間不合理，未考慮母源抗體影響，不能很好地發(fā)揮疫苗免疫效果，極易造成野毒入侵和擴散，從而導致免疫失敗。3）疫苗質量參差不齊：豬偽狂犬病疫苗生產門檻低、廠家多，質量控制和檢驗標準參差不齊，許多疫苗劑量及抗原含量不準，從而導致免疫效果不佳；加上疫苗在運輸、儲存及使用過程中處置不當導致疫苗失效，不能產生很好的保護。4）豬群存在免疫抑制性疾?。贺i群感染豬藍耳病、豬圓環(huán)病、氣喘病等免疫抑制性疾病，或因霉菌毒素、免疫抑制性藥物中毒等引起豬群免疫力下降，對疫苗不能產生有效的免疫應答，導致免疫失敗。5）飼養(yǎng)管理影響因素：豬場環(huán)境條件差、飼養(yǎng)密度過大、飼養(yǎng)管理混亂，加上頻繁的疫苗免疫，使豬群長期處于應激狀態(tài)；飼料營養(yǎng)不全，導致豬群免疫力水平低，引起疫苗免疫失敗。同時疫苗免疫時，豬場人員的操作方法不當也在一定程度上影響疫苗的免疫效果。

養(yǎng)豬企業(yè)應該如何挑選合適本場的疫苗？

白挨泉教授：養(yǎng)豬企業(yè)挑選合適本場的疫苗標準大體如下：

第一：選擇質量合格的，正規(guī)廠家的疫苗，并且固定使用同種疫苗。

第二：根據(jù)疫苗的性能，通過抗體檢測，制定出科學的免疫程序。

第三：豬場強化管理，加強人員培訓，提高員工的實際操作能力。

對偽狂犬陰性場如何保持不轉陽？陽性場如何保持穩(wěn)定不發(fā)?。?/h2>

崔尚金研究員：建議如下：

第一，制定科學、合理、嚴格的免疫程序，減小或阻斷陽性帶毒豬排毒，保證發(fā)揮疫苗的細胞免疫功能和體液免疫功能。特別是偽狂犬免疫過程中細胞免疫功能比較重要，同時保持陰性豬的免疫效果以減少野毒的入侵。

第二，定期通過gE抗體的檢測，評價疫苗性能和免疫程序的合理性。

第三，疫苗免疫選擇固定的同種疫苗，防止基因缺失疫苗毒株之間可能發(fā)生的基因重組和毒力免疫，從而導致持續(xù)感染。

第四，管理免疫，種豬群及仔豬群野毒株陽性率為10%以上的生產線執(zhí)行管理免疫法，凈化期內實行后備豬100日齡到期普查，陽性轉入育肥。

第五：改變觀念，形成“養(yǎng)重于防、養(yǎng)防并重、注重生物安全”的新理念。

劉思當教授：1）豬偽狂犬陰性場 嚴格控制引種，引種時一定做好疫情考察和疫病檢疫工作，確定偽狂犬病毒陰性方可入群；建立完善的免疫監(jiān)測體系，定期對種豬群進行偽狂犬野毒gE抗體檢測，檢測頻率為每年2～3次，及時淘汰陽性種豬，同時對不同日齡商品豬定期抽樣檢查，觀察不同階段偽狂犬野毒感染情況。制定合理的免疫程序，根據(jù)豬群抗體消長規(guī)律做好豬場偽狂犬疫苗的免疫工作，定期抽查豬群疫苗抗體水平，淘汰多次免疫抗體陰性種豬。建立和完善豬場生物安全措施，實施全進全出飼養(yǎng)制度，做好豬場衛(wèi)生消毒工作，加強豬場來往人員、車輛的嚴格控制與消毒，控制生產人員外出，嚴格細化回場后消毒凈化工作，防止把病毒帶進豬場；積極開展防鼠、滅鼠工作，切斷傳播途徑，保護易感豬，同時做好其他疾病的基礎免疫工作，杜絕野毒入侵。

2）偽狂犬陽性場 加強豬場核心種豬群的疫苗免疫，經產母豬群每年普免偽狂犬疫苗3～4次，后備豬配種前進行2次免疫。對于偽狂犬發(fā)病豬場，仔豬1～2 d滴鼻免疫，6～10周肌肉注射加強免疫。偽狂犬穩(wěn)定豬場8周及12周分別肌肉注射免疫。通過強化免疫來控制偽狂犬病毒在豬場內散播，減少豬群的排毒及阻斷病毒在母豬與胎兒之間的垂直傳播。偽狂犬陽性場更應該建立和完善豬場生物安全措施，嚴格控制引種，實施全進全出制度，防止病毒入侵；同時做好其他疾病的基礎免疫工作，減少應激，提高豬群免疫力，降低豬群發(fā)病的風險。

豬偽狂犬病的凈化方案有哪些？

劉思當教授：現(xiàn)在國內外普遍使用的凈化方案主要是免疫-檢測-淘汰，采用偽狂犬gE基因缺失苗免疫與 ELISA方法檢測野毒抗體的配套方法實施偽狂犬病凈化。首先對將要實行凈化的豬場進行閉群管理，嚴禁引進外來豬。用同一種偽狂犬gE基因缺失弱毒苗對豬場的種豬群進行基礎免疫，經產母豬群每年普免3～4次，商品豬群10/14周齡分別免疫，后備母豬進入配種舍前進行2次免疫，所有免疫方式均為肌肉注射。檢測gE抗體水平，確定偽狂犬野毒感染情況，評估凈化可行性。對符合偽狂犬病凈化的豬場實施凈化，具體操作方案為：種豬群全群采樣進行gE抗體檢測，淘汰抗體陽性豬；抗體陰性豬6個月后再次全群采樣檢測gE抗體，淘汰抗體陽性豬。后備豬群進入隔離舍前全群采樣檢測，淘汰gE抗體陽性豬，1個月后再次全群檢測gE抗體，兩次檢測均為陰性豬方可進入配種舍做為種用。對于非核心豬群分階段抽樣進行抗體水平檢測，評估疫苗免疫效果。同時在疾病凈化過程中必須加強衛(wèi)生防疫措施，實施區(qū)域性全進全出制度，嚴格執(zhí)行衛(wèi)生消毒措施，封閉飼養(yǎng)，積極開展防鼠、滅鼠工作，切斷傳播途徑，保護易感豬，避免凈化過程中豬群感染偽狂犬病毒。同時根據(jù)豬場偽狂犬抗體消長規(guī)律合理安排疫苗免疫，引種時保證引進偽狂犬病陰性種豬是成功控制和凈化豬場偽狂犬病的關鍵環(huán)節(jié)。引種豬時嚴格執(zhí)行隔離檢疫制度。當豬場核心豬群gE抗體全部變?yōu)殛幮?，全場商品豬亦無可疑病例出現(xiàn)，特別是血清學或病原學抽樣檢測全部呈陰性者，即表明該場偽狂病已被徹底凈化。豬偽狂犬病凈化技術路線如下：

白挨泉教授：凈化方案：

1）陰性場的長期凈化方案：

定期檢測淘汰法，強化免疫，制定科學免疫程序，確保陰性群體的建立。

強化免疫，管理免疫，配合檢測，逐漸淘汰陽性群體，建立PR陰性種群。

引種檢疫，嚴禁引入陽性種豬。

2）多次的反復抽血檢測都為陰性，從統(tǒng)計學的角度分析可以確定為陰性場，其方案如下：

①疫苗免疫：疫苗選擇，固定使用同種疫苗，因為不同基因缺失疫苗毒株之間可能發(fā)生基因重組和毒力免疫，從而導致持續(xù)感染，不能凈化。

②制定科學的免疫程序：種豬群3～4個月普免一次；子代（仔豬）執(zhí)行370程序，即：1～3日齡1頭份滴鼻、70日齡1頭份接種；后備種豬在配種前1個月和產程前1個月各接種1次，以后按種豬的免疫程序進行免疫；引進種豬執(zhí)行兩免（第1次基礎免疫和第2次加強免疫，時間間隔4周）后按種豬和后備種豬的免疫程序進行免疫。禁止在豬場內飼養(yǎng)其他動物，并在豬場內強化滅鼠措施。

③定期血清學檢查：后備種公、母豬每季度作一次血清普查，種豬場經產母豬每一年作一次血清普查，商品場經產母豬每一年作一次血清學檢測，抽查比例為5%左右，檢查出野毒陽性株要堅決淘汰，商品子代每半年做一次血清學檢測，抽查比例1%左右。

二檢野毒陽性5%以上，說明凈化工作沒有取得成效，需要全面總結分析凈化方案和執(zhí)行情況，是方案問題則繼續(xù)討論和完善。是條件問題比如免疫抑制性疫病的影響等客觀因素則待條件成熟后實施凈化方案，是執(zhí)行問題則追究責任，保證執(zhí)行效果。

④管理免疫法：種豬群及仔豬群的野毒陽性率為10%以上的生產線執(zhí)行管理免疫法，凈化期內實行后備母豬100日齡到期普查，陽性轉入育肥，經產和商品子代實行6個月一次定期血清抽查，比例0.5%左右，評估凈化效果，全面嚴格執(zhí)行《陰性場凈化方案》。

發(fā)病后的處理辦法：

1）處理辦法

①全場公母豬、哺乳仔豬、保育、育肥豬緊急免疫高抗原含量的豬偽狂犬gE確實苗（豬克偽）1～2頭份；

②飼料添加藥物預防繼發(fā)及混合感染。

2）對策

①加強生物安全建設（滅鼠）；

②平時檢測免疫效果：監(jiān)測gB抗體或全病毒抗體，確保免疫質量；

③建議母豬加強免疫豬偽狂犬苗gE缺失苗（3～4次），公豬每年免疫3～4次；

④仔豬出生后24～28 h內要滴鼻免疫，而不是肌肉注射（避免母源抗體的干擾），70日齡免疫1頭份；

⑤注重免疫抑制疾病的防控。主要是豬圓環(huán)病毒病、豬藍耳病、飼料霉菌毒素中毒。