芽囊原蟲—一種可能的腸道病原體

翁善鋼

（外高橋出入境檢驗檢疫局，上海浦東新區200137）

芽囊原蟲—一種可能的腸道病原體

翁善鋼

（外高橋出入境檢驗檢疫局，上海浦東新區200137）

豬腹瀉性疾病是如今養豬業具有重要經濟意義的疾病。引起腹瀉的病原體有多種，包括細菌、病毒、寄生蟲等。本文將主要介紹奧地利出現的一個腹瀉病例。

2015年3月，奧地利的一個豬場出現了一例芽囊原蟲（blastocystosis）病。這個豬場的仔豬產自存欄60頭母豬的封閉生產系統。仔豬在第28天斷奶。母豬常規接種細小病毒病和豬丹毒疫苗，仔豬接種圓環病毒病和支原體肺炎疫苗。豬場沒有其它可知的疾病信息。豬場獸醫稱，仔豬斷奶之后出現腹瀉，體重隨之下降，并未觀察到其它明顯的臨床癥狀，仔豬死亡率為5%。豬場采取了多種措施，如使用抗生素、調整飼料配方（把粗蛋白質從18%降低到15%，粗纖維從3%增加到4%），不過這些措施并沒有效果。

1 臨床檢查和診斷

一頭使用黏菌素[5毫克/（千克體重·天），連續7天]治療的仔豬被送往奧地利的一家大學豬病診所進行診斷。這頭仔豬患有嚴重的腹瀉，臨床檢查僅發現輕度的營養不良。對仔豬進行剖檢及病理組織學檢查，同時對一段空腸單獨進行了細菌學檢查。將腹瀉糞便樣本裝滿試管以確保滿足厭氧條件，立即送到研究所的細菌學實驗室進行短螺旋體培養。為了排除圓環病毒2型相關的腸炎，用福爾馬林固定的腸道組織樣本進行原位雜交試驗以直接檢測腸道內的圓環病毒2型。使用三重PCR檢測回腸和結腸黏膜樣本的胞內勞森氏菌、短螺旋體和腸道螺旋體。對糞便進行熒光顯微鏡檢查和傳統的光學顯微鏡檢查以檢測球蟲卵囊和原生動物。

2 病理學檢查結果

未觀察到明顯的病理形態學變化。結腸消化物呈淺綠色液體狀。病理組織學檢查可見小腸黏膜有數個嗜酸性粒細胞。圓環病毒2型原位雜交試驗和三重PCR未檢測到胞內勞森氏菌、短螺旋體和腸道螺旋體。

3 細菌學檢測結果

空腸可見稀薄的類似于酵母的真菌和大腸桿菌。由于大腸桿菌在空腸的檢出率較低，故認為臨床相關性較低，未能確定致病因子。細菌培養未檢測到短螺旋體。

4 寄生蟲學檢測結果

通過熒光顯微鏡法未檢測到球蟲蟲卵。檢測到豬結腸存在一定量的腸袋蟲桿菌（考慮為豬結腸本身存在的）。傳統光學顯微鏡檢測仔豬糞便可見大量圓形結構體，大小為10～20微米。這些圓形結構體呈現透明狀，沒有或幾乎沒有細胞內物質。

為了進一步確定圓形結構體，用傳統的迪夫快速（Diff-Quick）染色試劑盒對糞便涂片進行染色。在100倍放大的情況下，圓形結構體在光學顯微鏡下呈現為單細胞，主要為嗜堿性結構體。檢測人員認為通常在豬糞便中不會發現如此數量的該結構體，因此認為其是新的事物。檢測人員向多位病理學家、細菌學家和寄生蟲專家咨詢，一名微生物學家最終作出診斷稱這種結構體為芽囊原蟲屬（Blastocystis sp）。

5 結果分析

鑒于未檢測到一定數量的臨床常見腸道病原體，大量的芽囊原蟲感染被認為在此病例中起到了關鍵的作用。芽囊原蟲是一種原生動物，經常在人類和其它動物中發現，如豬和牛。其細胞被細胞膜包裹且主要由一個大的中央液泡構成，細胞核位于細胞的周圍。芽囊原蟲的首次報道出現在1911年，但其發病機理和致病性目前尚未完全了解。豬的結腸可以發現一定量的芽囊原蟲。現有的研究調查顯示，在豬只受到免疫抑制的情況下，芽囊原蟲不僅在結腸定植還可以在小腸內定植。人類和豬均很少觀察到小腸組織的病變。

在此病例中，霉菌毒素造成的免疫抑制可能是芽囊原蟲在仔豬腸道大量定植的原因。2014年，在歐洲中部有大量的玉米存在霉菌毒素污染，特別是毒素A和B類單端孢霉烯族毒素。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）屬于B類單端孢霉烯族毒素，T2毒素屬于A類單端孢霉烯族毒素，它們都具有嚴重的免疫抑制作用。鑒于大量玉米含有高濃度的霉菌毒素，研究人員建議豬場在飼料中完全禁止使用玉米。研究人員認為霉菌毒素（特別是T2毒素和DON）是導致免疫抑制的化合物，其幫助了芽囊原蟲在腸道的定植。這一因素加上衛生和消毒程序管理不善可能造成芽囊原蟲污染了豬舍，故影響到后續幾個批次的豬。

6 預防和治療

芽囊原蟲的治療非常困難，因對其有效的可用藥品非常有限。甲硝咪唑是首選藥物，但在歐洲已不允許其在食品動物中使用了。其它咪唑類藥物如替硝唑和酮康唑也不允許使用。

唯一合法的治療芽囊原蟲的方法是口服甲氧芐氨嘧啶-對氨基苯磺酰胺（TMP/STX），或者飲水加入巴龍霉素。巴龍霉素是氨基糖苷類抗生素，不能被全身充分吸收，一旦給藥，此藥物停留在腸道內腔內且隨糞便排出。在人藥中，巴龍霉素用于治療芽囊原蟲病、隱孢子蟲病、阿米巴病和皮膚利什曼病。

在此病例中，飼料中添加TMP/STX治療腹瀉，但這對該病癥未起到改善作用，故豬場獸醫決定使用巴龍霉素治療（40毫克/千克體重，連續使用10天）。

單獨使用抗生素治療芽囊原蟲病并不能起到很好的效果。通常應該與管理措施聯合使用，如徹底的清潔和消毒程序。

數月后，該豬場的臨床狀況顯著改善。在3個生產批次使用了巴龍霉素，治療的批次未發現腹瀉現象，且死亡率降低到小于1%。由于使用巴龍霉素治療斷奶仔豬的成本很高，豬場獸醫停止使用抗生素治療，轉而在感染豬的飼料中添加氧化鋅（2 500毫克/千克）和木炭。

總之，芽囊原蟲必須加入到豬腹瀉病例的鑒別診斷名單上，特別是在玉米等糧食作物大量被霉菌毒素污染的年份更應如此。實驗室應擴大診斷面，當豬嚴重腹瀉時還應檢查豬糞便中的芽囊原蟲。

（編輯：柳青）

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2016-03-17

翁善鋼（1985-），男，江蘇常熟人，碩士，主要從事各類動物疫病流行病學及其防控對策研究.E-mail：sgweng@163.com