江蘇省鹽城市亭湖區豬口蹄疫O型滅活疫苗免疫效果分析

許志成

（江蘇省鹽城市亭湖區動物衛生監督所，江蘇鹽城224002）

江蘇省鹽城市亭湖區豬口蹄疫O型滅活疫苗免疫效果分析

許志成

（江蘇省鹽城市亭湖區動物衛生監督所，江蘇鹽城224002）

口蹄疫Aftosa（屬一類傳染病）俗名“口瘡”、“辟癀”，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。其臨診特征為口腔黏膜、蹄部和乳腺皮膚發生水皰。國家對豬口蹄疫的預防實行強制免疫政策。近年來江蘇省鹽城市亭湖區使用O型口蹄疫濃縮滅活疫苗進行口蹄疫預防接種工作。本試驗通過對亭湖區部分豬場母豬、商品豬的跟蹤免疫和監測來觀察O型口蹄疫抗體消長規律，分析存在的問題和原因，為制定適合亭湖區生豬養殖的口蹄疫疫苗免疫方案提供依據。

1 材料和方法

1.1 試驗動物

在亭湖區鹽東鎮、新興鎮、黃尖鎮選擇9戶養豬戶（其中一家為亭湖區東南種豬場，8戶為小型養豬戶）開展試驗工作，試驗前對被選場進行流行病學調查、臨床檢查，均為健康自繁自養豬群。

1.2 試驗疫苗

為政府采購苗，由某公司生產豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株），批號1510001。

1.3 檢測試劑

口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒為中國農業科學院蘭州獸醫研究所產品，批號20150415101-1、2015090101-1。

1.4 主要器材

微量移液器、生化培養箱、微量振蕩器、酶標分析儀，檢測環境20～25℃。

1.5 方法

1.5.1 試驗時間2015年6月10日至12月25日。

1.5.2 試驗分組1）在被選的種豬場中，開展免疫效果比較試驗，隨機選取60頭經產二元母豬，分成A、B兩個組，每組30頭，分別于孕豬產前第30天接種疫苗，其中：A組為說明書標準計量，B組為雙倍劑量。2）在其余被選場中，隨機選取10頭種豬，分成C、D兩個組，每組5頭，分別于孕豬產前第30天接種疫苗，其中：C組為說明書標準計量，D組為雙倍劑量。4組試驗豬所產仔豬35日齡首免、60日齡二免。3）由于按照標準計量免疫接種的A組試驗豬所產商品豬二免后免疫效果不佳，在該組中選取10頭母豬所產健康商品豬再次分為E、F兩個組，其中：E組于90日齡進行三免，免疫劑量同二免標準計量；F組為E組的空白對照組，只進行二免，不進行三免。

1.5.3 觀察反應每次疫苗接種后1～3 d，檢測直腸溫度，觀察飼料攝入情況，記錄應激性倒地及嘔吐等疫苗接種后的副反應。

1.5.4 采血日齡對接種疫苗的所有試驗孕豬分別在接種疫苗前和產仔后1 d內采血，所產仔豬分別在吮初乳前（0日齡）和產后第1、8、16、24、32日齡采血，商品豬一免后1、7、15、23 d，二免后10、20、30 d，三免后10、20、30 d，分離血清，每窩仔豬隨機采集半數仔豬的血清樣本，應用ELISA方法檢測血清中口蹄疫抗體的滴度。

1.5.5 免疫抗體效價測定用液相阻斷ELISA方法檢測口蹄疫O型滅活疫苗免疫抗體效價，試驗采用的口蹄疫O型檢測試劑盒購自于中國農業科學院蘭州獸醫研究所，試驗步驟按照說明書要求進行。抗體檢測在江蘇省鹽城市亭湖區動物衛生監督所獸醫實驗室進行。

1.5.6 免疫效果判定口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA的抗體效價≥26判定為合格，存欄家畜免疫抗體合格率≥80%判定為合格。

1.5.7 數據分析采用Excel軟件統計分析，用lg法將OD值轉換為以10為底的負對數表示不同組的仔豬口蹄疫抗體水平。

1.5.8 試驗要求1）試驗母豬接種疫苗前后7 d內未使用抗病毒藥物。2）產下的仔豬斷奶前沒有接種豬瘟疫苗和口蹄疫疫苗（本試驗均為30～35日齡斷奶）。

2 結果

2.1 試驗母豬口蹄疫抗體檢測情況

試驗組70頭母豬在接種疫苗后，注射4 mL/頭口蹄疫滅活苗的B組，其產生的抗體水平高于注射2 mL/頭的A組，其余各組口蹄疫O型抗體水平生物統計分析，差異均不顯著。

2.2 仔豬吃初乳前后口蹄疫母源抗體檢測結果

母豬體內口蹄疫O型抗體水平合格的前提下，其仔豬在吃初乳前的平均抗體水平經檢測為0。吃初乳后的24日齡左右仔豬口蹄疫O型母源抗體水平上升到26以上，達到頂峰，仔豬O型母源抗體水平基本與母豬體內抗體水平相當，隨后開始下降（表1）。

表1 部分母豬接種疫苗產生的抗體及其仔豬抗體水平的動態變化

2.3 35日齡閹割仔豬時注射疫苗和60日齡時加強免疫注射疫苗后免疫抗體產生情況

結果表明各組的抗體水平動態變化趨勢基本一致，即在首免后2～4周，抗體水平并未呈現迅速上升趨勢，推測與母源抗體水平影響有關。從組間不同時間抗體水平比較看，B組免疫效果最好，其抗體水平上升速度顯著高于其他各組，一免抗體水平上升較緩，23 d時抗體陽性率為44%；二免后抗體合格率進一步上升，并在30 d時達到88%。A組在首免后23 d僅31.8%抗體合格，二免后30 d只有59%免疫抗體合格。C組免疫效果最差。見表2、表3。

表2 35日齡首免后仔豬口蹄疫抗體水平的動態變化

表3 60日齡二免后仔豬口蹄疫抗體水平的動態變化

2.4 種豬場和小型養豬戶口蹄疫抗體檢測情況

免疫保護率差異較大。通過抗體檢測情況表明，被檢血樣中，規模戶和散戶免疫抗體有效保護率分別為74.47%和47.06%，口蹄疫有效免疫抗體平均合格率規模戶比散戶高出27.41個百分點。

2.5 90日齡時商品豬三免注射疫苗后免疫抗體產生情況

結果表明，對照組F組在60～90日齡期間抗體水平基本不變，E組在三免后抗體合格率進一步上升，并在接種后30 d時達到89.5%，高于F組34個百分點。見表4。

表4 90日齡三免后商品豬口蹄疫抗體水平的動態變化

3 討論

3.1 種豬場免疫抗體水平高于小型養豬戶

種豬規模養殖場通常可以做到封閉式飼養，飼養管理條件較好，能夠根據自身的具體情況制定較為合理的疫苗免疫程序，各類疫苗分期免疫有利于充分激活動物機體的免疫應答反應。并且疫苗從冷凍狀態取出到使用不需要再次經過運輸環節，開啟后基本可以一次用完，從而產生較高的抗體水平。

經觀察和分析，飼養管理條件差是散養戶抗體偏低的主要原因。在試驗場中有3戶的免疫工作由村級專職防疫員負責，由于工作量較大，在免疫過程中通常采取口蹄疫及豬瘟疫苗同時注射的方法，其雖然配備有疫苗保溫箱，但開啟后的疫苗經過再次的運輸與反復的取用，在一定程度上影響了免疫效果。

3.2 不同免疫劑量對免疫抗體影響顯著

從抗體檢測結果可知，不同劑量免疫組產生的抗體水平差異較大，加倍劑量的B組二免后抗體水平明顯提高，但是因其劑量加大1倍，成本也增加1倍，其免疫副反應也明顯加大。目前，在實際的防疫工作中，O型口蹄疫免疫抗體監測結果普遍低下，通過本試驗的比對可以反向推測：1）疫苗產品濃度偏低，按照標準計量免疫，免疫效果不佳；2）養殖戶不重視疫苗的2次免疫，由于目前使用的滅活疫苗對豬刺激性相對較大，二免劑量達不到標準，從而導致免疫效果不佳。

3.3 3次免疫對免疫合格率提升明顯

從追加的商品豬三免對比試驗組E組和F組的抗體檢測結果可知，進行三免的E組商品豬免疫合格率顯著高于對照組F組。口蹄疫三免在原來的2次免疫基礎上增加了1次免疫注射工作，對生豬總體免疫程序的時間安排造成壓力，成本有所增加（介于A組和B組之間），但是由于沒有增加免疫劑量，免疫副反應沒有增加，總體效果優于雙倍劑量的B組。

（編輯：郭玉翠）

S858.285.3

A

1002-1957(2016)05-0113-03

2016-07-26

許志成（1982-），男，江蘇鹽城人，獸醫師，主要從事規模養殖場動物疫病的防控與獸醫實驗室診斷工作. E-mail:xzc821121@sohu.com