噻托溴銨吸入治療COPD患者痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)及相關(guān)炎癥因子表達(dá)變化

單淑香，徐向英，劉艷霞，馮麗君，唐淑金，崔學(xué)榮(天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院，天津 301800)

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噻托溴銨吸入治療COPD患者痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)及相關(guān)炎癥因子表達(dá)變化

單淑香，徐向英，劉艷霞，馮麗君，唐淑金，崔學(xué)榮(天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院，天津 301800)

摘要：目的觀察噻托溴銨吸入治療慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)及相關(guān)炎癥因子表達(dá)變化。方法 60例中度及以上COPD患者分為A、B組各30例，A組患者吸入噻托溴銨，B組患者口服茶堿緩釋片，另選10例年齡相當(dāng)?shù)慕】滴鼰熣呋蛟?jīng)吸煙者作為對照(C組)，比較各組誘導(dǎo)痰沉渣炎癥細(xì)胞及誘導(dǎo)痰上清液炎癥因子[白三烯B4(LTB4)、IL-8、髓過氧化物酶(MPO)]。結(jié)果與C組比較，A、B組治療前誘導(dǎo)痰沉渣中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)增加，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)減少；與C組比較，誘導(dǎo)痰上清液IL-8、LTB4、MPO水平升高；P均<0.05。與同組治療前比較，A組其他細(xì)胞計(jì)數(shù)增加，IL-8、LTB4水平降低；與同組治療前比較，B組嗜酸細(xì)胞、其他細(xì)胞計(jì)數(shù)增加，IL-8、LTB4水平降低；P均<0.05。結(jié)論 噻托溴銨可降低COPD患者誘導(dǎo)痰中炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)及相關(guān)炎癥因子表達(dá)，在COPD治療中發(fā)揮抗炎作用。

關(guān)鍵詞：噻托溴銨；慢性阻塞性肺疾病；炎癥細(xì)胞；白三烯B4；白細(xì)胞介素8；髓過氧化物酶

目前，慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)病機(jī)制尚未明了，普遍認(rèn)為是以氣道、肺實(shí)質(zhì)和肺血管的慢性炎癥為特征，在肺的不同部位有巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞聚集。激活的炎癥細(xì)胞釋放多種炎癥因子，包括白三烯B4(LTB4)、IL-8、髓過氧化物酶(MPO)等。以往臨床上有關(guān)小劑量茶堿治療COPD的抗炎作用已基本確定。噻托溴銨是一種長效抗膽堿藥，具有舒張氣道平滑肌的作用，但其是否有抗炎作用鮮有報(bào)道。本研究觀察了噻托溴銨吸入治療COPD患者痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)及相關(guān)炎癥因子表達(dá)變化，并與小劑量茶堿緩釋片比較。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院收治的中度及以上COPD患者60例，男33例，女27例；年齡(68.57±7.90)歲。按照COPD診治指南(2007年修訂版)[1]。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡60～75歲，吸煙及曾吸煙者(戒煙<5 a，吸煙指數(shù)≥10包年)，且一秒鐘用力呼氣容積/用力肺活量<70%，一秒鐘用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比<80%的穩(wěn)定期COPD患者。體質(zhì)量指數(shù)24.41±4.55，吸煙指數(shù)412[0,1850]。所有患者分為A、B組各30例。另選10例年齡相當(dāng)?shù)慕】滴鼰熣呒霸?jīng)吸煙者(戒煙<5 a，吸煙指數(shù)≥10包年)作為對照(C組)，男6例，女4例；年齡(69.50±7.02)歲；體質(zhì)量指數(shù)24.33±2.59，吸煙指數(shù)375[0,1500]。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無中樞性或阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、支氣管哮喘、支氣管擴(kuò)張、肺間質(zhì)纖維化病史者；②無閉角型青光眼、前列腺增生癥、腫瘤、慢性心力衰竭、惡性心律失常、肝腎衰竭者；③1個(gè)月內(nèi)無COPD急性發(fā)作史且未使用過抗生素者；④3個(gè)月內(nèi)未接受過糖皮質(zhì)激素(全身或吸入)和茶堿類、噻托溴銨類藥物或應(yīng)用任何針對抗炎治療藥物者。

1.2治療方法A組患者吸入噻托溴銨，劑量為18 μg，1次/d，共治療30 d。B組患者口服茶堿緩釋片，劑量為0.1 g，2次/d，共治療30 d。

1.3誘導(dǎo)痰沉渣細(xì)胞計(jì)數(shù)及誘導(dǎo)痰上清液炎癥因子檢測光學(xué)顯微鏡下觀察誘導(dǎo)痰沉渣，對沉渣中細(xì)胞進(jìn)行分類并計(jì)數(shù)；雙抗體夾心ELISA法檢測痰上清液炎癥因子(IL-8、LTB4、MPO)。

2結(jié)果

2.1各組誘導(dǎo)痰沉渣炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較誘導(dǎo)痰沉渣炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較見表1。

2.2各組誘導(dǎo)痰上清液炎癥因子水平比較誘導(dǎo)痰上清液炎癥因子水平比較見表2。

表1　各組誘導(dǎo)痰沉渣炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較±s)

注：與C組比較，*P<0.05；與同組治療前比較，△P<0.05。

表2　各組誘導(dǎo)痰上清液炎癥因子水平比較±s)

注：與C組比較，*P<0.05；與同組治療前比較，△P<0.05。

3討論

COPD患者中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)增高，說明COPD患者氣道中的主要炎癥細(xì)胞為中性粒細(xì)胞。而巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞在COPD發(fā)病中亦起著至關(guān)重要的作用[2]。有研究[3]顯示，巨噬細(xì)胞在COPD的中心和外周氣道中均增加。T細(xì)胞在COPD的發(fā)病過程中除了其自身細(xì)胞毒性作用外，還通過其炎癥因子與其他細(xì)胞相互作用，以還不甚明確的作用機(jī)制協(xié)同導(dǎo)致了COPD的發(fā)生發(fā)展。在COPD發(fā)病機(jī)理中，嗜酸細(xì)胞也參與其中，但有關(guān)嗜酸細(xì)胞在COPD中是否被激活亦存在爭議[4,5]。本研究顯示，與C組比較，A、B組治療前誘導(dǎo)痰沉渣中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)增加，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)減少。與同組治療前比較，A組其他細(xì)胞計(jì)數(shù)增加，B組嗜酸細(xì)胞、其他細(xì)胞計(jì)數(shù)增加。提示經(jīng)藥物治療后，一部分細(xì)胞被抑制，而另一部分細(xì)胞有可能被激活，但這些細(xì)胞的變化在COPD的炎癥過程中所發(fā)揮的作用及機(jī)制如何，有待于進(jìn)一步探討。

IL-8主要由氣道的肺泡巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等分泌的一種環(huán)氧酶趨化因子，對中性粒細(xì)胞有趨化作用，后者的趨化和分泌作用在肺的炎癥和氧化損傷中發(fā)揮重要作用[6]。本研究顯示，A、B組治療前IL-8水平較C組升高，治療后降低，提示噻托溴銨、茶堿緩釋片均具有抗炎作用。本研究還顯示，A、B組治療前LTB4水平較C組升高，治療后降低，說明在COPD穩(wěn)定期仍存在以中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等浸潤為主的慢性氣道炎癥，并且LTB4與氣道阻塞密切相關(guān)，這可能與COPD屬于慢性氣道炎癥疾病，即使在穩(wěn)定期氣道中仍存在中性粒細(xì)胞部分激活的表現(xiàn)，而炎癥細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞產(chǎn)生大量LTB4這一強(qiáng)有力的中性粒細(xì)胞和嗜酸粒細(xì)胞趨化劑、激活劑，同時(shí)中性粒細(xì)胞表面還存在大量LTB4受體，從而形成惡性循環(huán)，引起炎癥擴(kuò)大和持續(xù)存在[7]。MPO是中性粒細(xì)胞所特有的，即使在有強(qiáng)吞噬作用的巨噬細(xì)胞中也極少見。在細(xì)胞化學(xué)上，一般將MPO作為中性粒細(xì)胞的標(biāo)志，是反映中性粒細(xì)胞活性的標(biāo)志物之一[8]。本研究亦顯示，A、B組治療前MPO水平高于C組，與相關(guān)研究[9]一致，提示在COPD穩(wěn)定期，氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞仍呈明顯活化狀態(tài)，參與COPD的炎癥進(jìn)程。

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(收稿日期:2015-09-17)

中圖分類號：R563

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)03-0074-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.03.030

基金項(xiàng)目：天津市衛(wèi)生局科技基金資助項(xiàng)目(2011KZ67)。