柱前衍生化HPLC法測定不同產(chǎn)地胡蘆巴中4-羥基異亮氨酸的含量

馮　歡，李新霞，馮　崴，李琳琳*(.新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理教研室，烏魯木齊　800；.新疆醫(yī)科大學(xué)分析測試中心，烏魯木齊　800；.金駿陽光生物科技有限公司，烏魯木齊　800)

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柱前衍生化HPLC法測定不同產(chǎn)地胡蘆巴中4-羥基異亮氨酸的含量

馮歡1，李新霞2，馮崴3，李琳琳1*(1.新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理教研室，烏魯木齊830011；2.新疆醫(yī)科大學(xué)分析測試中心，烏魯木齊830011；3.金駿陽光生物科技有限公司，烏魯木齊830011)

摘要：目的柱前衍生化法測定4-羥基異亮氨酸含量。方法采用異硫氰酸苯酯作為衍生化試劑，色譜柱(Zorbax Eclipse XDB-C18，150 mm×4.6 mm，5 μm，Agile)；流動相A：乙腈，流動相B：1 mL·L-1磷酸水，梯度洗脫(A相∶B相):(0~20 min，20∶80；20 min，60∶40)；流速：1.5 mL·min-1；進(jìn)樣體積：20 μL ；檢測波長：254 nm；柱溫：30 ℃。結(jié)果4-羥基異亮氨酸在質(zhì)量濃度4.2～20.9 μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 3)，平均回收率為96.8%，RSD為1.7%。結(jié)論該方法簡便、穩(wěn)定，結(jié)果準(zhǔn)確，可作為4-羥基異亮氨酸的含量測定方法。

關(guān)鍵詞：胡蘆巴；4-羥基異亮氨酸；柱前衍生化法；反相高效液相色譜法

胡蘆巴為豆科植物胡蘆巴屬胡蘆巴Trigonellafoenum-graecumL.的種子，具有溫腎壯陽、祛寒除濕等功效[1]。胡蘆巴作為一種藥食兩用的中藥材，其含有的化學(xué)成分種類繁多，各類甾體皂苷、黃酮類化合物、氨基酸、生物堿等成分被認(rèn)為是主要的功效成分。胡蘆巴中的氨基酸有4-羥基異亮氨酸、精氨酸、賴氨酸、組氨酸等。其中4-羥基異亮氨酸的含量占胡蘆巴中游離氨基酸的80%以上[2]。近年來，國內(nèi)外學(xué)者對4-羥基異亮氨酸的活性及其藥理作用的研究結(jié)果表明，4-羥基異亮氨酸除了具有顯著地降血糖活性外，還具有改善肝功能、降低血脂及膽固醇[3]、抗炎[4]、抗抑郁[5]等作用。……