付 杰,蔣興宇,劉 暢,蒲曉允
(第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗科,重慶 400037)
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·個案與短篇·
Addcare Elisa 800全自動酶免工作站臨床應(yīng)用經(jīng)驗總結(jié)*
付 杰,蔣興宇,劉 暢,蒲曉允△
(第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗科,重慶 400037)
Addcare Elisa 800; 酶聯(lián)免疫吸附試驗; 保養(yǎng)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)由于測定靈敏度高、特異度高、操作簡便、酶標(biāo)記試劑比較穩(wěn)定、無放射性污染、易于自動化,且易與其他相關(guān)技術(shù)偶聯(lián),使其成為目前應(yīng)用最廣泛而且發(fā)展最快的一種免疫測定技術(shù)[1]。Addcare Elisa 800 全自動酶免工作站以操作簡單、快速檢測、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點,實現(xiàn)了ELISA分析的自動化、標(biāo)準(zhǔn)化、快速化、網(wǎng)絡(luò)化逐漸在全國各大醫(yī)院使用[2-3]。本科于2013年6月引進(jìn)Addcare Elisa 800 全自動酶免工作站1臺,現(xiàn)將筆者使用的體會報道如下。
1.1 優(yōu)點 Addcare Elisa 800全自動酶免工作站是中文智能系統(tǒng),操作簡單;8根采樣針采樣,96孔洗板針洗板,提高檢測速度;一體式反應(yīng)體系,使常規(guī)ELISA的加樣稀釋、移液、孵育、振蕩、洗板、讀數(shù)分析功能在同一操作體系中分別進(jìn)行,增加結(jié)果準(zhǔn)確度;設(shè)置程序操作快速簡單,可按說明書設(shè)置開展所有ELISA項目;避免人工加樣錯誤,同時也降低檢驗人員感染的概率[4]。
1.2 缺點 Addcare Elisa 800全自動酶免工作站提供了16塊微孔反應(yīng)板模塊,對于開展大樣本檢測16塊反應(yīng)板就顯得略有不足。
2.1 樣本前處理 Addcare Elisa 800全自動酶免工作站加樣采用氣壓真空吸樣,高質(zhì)量的樣本前處理,不僅可以減少對加樣針的損耗,也是保證血液ELISA全自動檢驗質(zhì)量的重要前提[5]。標(biāo)本離心后,檢查標(biāo)本離心情況,若有血凝塊、纖維蛋白懸浮在血清中或者血清分離不足,此標(biāo)本可用微量移液器將血清吸至生化反應(yīng)杯中,避免全自動加樣針加樣時將加樣針堵塞。
2.2 開關(guān)機維護(hù) Addcare Elisa 800全自動酶免工作站在加樣結(jié)束后擁有機械臂自動復(fù)位初始化的功能,因此開關(guān)機維護(hù)更為方便簡單,將空白反應(yīng)板放至洗板槽,點擊開關(guān)機維護(hù)鍵,用去離子水沖洗管道,可通過反應(yīng)板所余留液面與設(shè)定液面高度是否一致,檢測洗板機注水通道和吸水通道是否通暢[6]。
2.3 酶標(biāo)板的檢查 酶標(biāo)板的微孔條放置要平整,如有凸起,酶標(biāo)儀檢測會導(dǎo)致進(jìn)板失敗,不能讀數(shù);另外,微孔內(nèi)要清潔:如有塑料屑、泡沫渣等異物,會影響洗板,導(dǎo)致洗板機洗頭針孔堵塞,出現(xiàn)假陽性[7]。
2.4 酶標(biāo)試劑準(zhǔn)備 Addcare Elisa 800全自動酶免工作站擁有試劑槽,可在試驗之前將所有ELISA試劑如陰陽性對照、稀釋液、酶標(biāo)記物、A B顯色劑、終止液準(zhǔn)備好,使用過后可用封閉條密閉放入2~8 ℃冰箱保存,但不宜反復(fù)多次使用[8]。
2.5 實驗過程中
2.5.1 在標(biāo)本未完全準(zhǔn)備好,但已知所有標(biāo)本量及其檢測項目時,可先錄入檢測命令,根據(jù)儀器所顯示反應(yīng)板位置及用量,放置反應(yīng)板,然后開始運行,實驗流程是先加稀釋液、陰陽對照,再加標(biāo)本,當(dāng)采樣至未準(zhǔn)備好的標(biāo)本處儀器會自動暫停,準(zhǔn)備完成后,點擊重新探測,儀器繼續(xù),可在一定程度縮短檢測時間。
2.5.2 當(dāng)所有標(biāo)本采樣結(jié)束,一步法實驗如乙型肝炎前S1抗原加酶標(biāo)記物后,可利用距離下步實驗加標(biāo)記物的時間間隔,將Tip頭裝載器拿出裝載Tip頭,避免Tip頭不夠浪費時間。
2.5.3 在工作中,儀器有時出現(xiàn)報警,經(jīng)觀察無異常情況,可點擊重試鍵或是忽略鍵,儀器就可以恢復(fù)正常運行。
2.5.4 實驗過程中,關(guān)注儀器運行狀況,因為如存在試劑不足、洗液不足或者酶標(biāo)儀讀數(shù)錯誤,儀器都會暫停并彈出對話窗口,立即添加試劑、洗液、或?qū)⒚笜?biāo)板微孔條放置平整,點擊重試鍵,儀器可以繼續(xù)正常運行。
2.6 實驗結(jié)束后
2.6.1 每天工作結(jié)束后,應(yīng)至少運行1次開關(guān)機維護(hù),然后用75%乙醇清洗洗板頭外壁,可避免血清和試劑中的蛋白類物質(zhì)在針內(nèi)外壁沉積[9]。重新配置洗液,清空廢液桶。
2.6.2 在發(fā)送結(jié)果時,一定要認(rèn)真核對,針對少見的模式一定要復(fù)檢后方能發(fā)報告,這樣可以避免因全自動酶免操作的錯誤而帶來的結(jié)果誤差。
2.7 全自動酶免維護(hù)保養(yǎng) 設(shè)備正常、高效的運行,正確使用是前提,維護(hù)保養(yǎng)更是關(guān)鍵。建議做日保養(yǎng):開關(guān)機維護(hù),儀器臺面;周保養(yǎng):75%乙醇清潔采樣針;定期檢查易損耗物件,酶標(biāo)儀光電傳感器,如發(fā)現(xiàn)問題,及時處理。保證設(shè)備正常運行和實驗室的質(zhì)量控制[10]。
以上是使用Addcare Elisa 800全自動酶免工作站的一點體會,正確使用儀器和做好儀器維護(hù)保養(yǎng),不但可延長儀器的使用壽命,還會降低儀器故障率,為血液ELISA自動化檢驗的質(zhì)量保證提供必要條件,進(jìn)而更好地提高工作效率,服務(wù)于臨床,使患者滿意。
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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.063
C
1673-4130(2016)23-3380-02
2016-04-24
2016-07-18)
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