CA125、CA724、HE4和CEA聯合檢測在卵巢癌診斷中的應用

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·綜述·

CA125、CA724、HE4和CEA聯合檢測在卵巢癌診斷中的應用

白珊珊 綜述，何雅軍△審校

(暨南大學醫學院附屬廣州紅十字會醫院，廣東廣州 510220)

關鍵詞:卵巢癌；糖類抗原125；人附睪蛋白4；癌胚抗原；糖類抗原724；聯合檢測

隨著人類生活水平的提高，壽命的延長，內分泌代謝疾病的增加，近年來卵巢癌發病率逐年上升且有年輕化的趨勢。卵巢癌是發病率僅次于子宮頸癌和子宮內膜癌的一種女性生殖系統常見腫瘤，并且其病死率位居婦科腫瘤之首。主要原因是卵巢癌早期癥狀與卵巢良性病變相似，且進展迅速。由于缺乏有效的早期診斷手段，僅有不到25%的患者就診時屬于早期[1]。卵巢癌晚期5年生存率僅20%～30%，且術后復發率高達70%，而早期發現卵巢癌并選擇適當的手術治療與有效的化療，其5年生存率高達90%[2]，故早期發現、及時治療對改善卵巢癌預后意義重大。目前臨床上常采用盆腔檢查、宮腔鏡、陰道超聲、診斷性刮宮和血清腫瘤標志物(TM)對卵巢癌進行診斷，可是至今仍沒有高靈敏度的特異指標用于卵巢癌早期診斷、發現復發、監測治療反應和判斷預后。由于附件在盆腔內的位置較深，頻繁卵巢外擴散使盆腔檢查及影像學檢查的應用受到限制。而卵巢癌患者在亞臨床階段有一些相關基因的變異，產生一些相應的代謝產物，這些代謝物即為TM，近年來發現其出現在血液或其他體液中并可以被檢測用以協助診斷。此外，TM在影像學改變及出現臨床癥狀前數月即升高[3]，因此早期TM檢測有助于卵巢癌的早期診斷。目前，TM已廣泛用于卵巢癌的早期診斷，常用標志物有糖類抗原125(CA125)、人附睪蛋白4(HE4)、糖類抗原199(CA199)、糖類抗原153(CA153)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原724(CA724)等，幾種標志物診斷價值并不完全重疊。本文就卵巢癌常用標志物CA125、HE4、CEA及CA724的聯合應用進行綜述。

1CA125

CA125是相對分子質量為(2～10)×105的糖蛋白抗原，存在于人體間皮組織(腹膜、胸膜、心包膜)及米勒管上皮組織(輸卵管、子宮內膜、宮頸內膜)，在上皮性卵巢癌細胞中CA125高度表達，并分泌入血液。此外，CA125在胚胎發育過程中存在于體腔上皮化生組織細胞表面，出生后即消失，在卵巢癌中復現。用卵巢漿液性乳頭狀囊腺瘤癌細胞株OVCA433免疫BALB/c小鼠，經與骨髓瘤細胞雜交得到單克隆抗體OC125，OC125識別的抗原即為CA125。因此，血清CA125檢測對上皮性卵巢癌診斷價值高。

CA125是卵巢癌篩查常用的標志物，是漿液性卵巢癌首選標志物，可在臨床癥狀出現前4～6個月升高。早在2009年，Medeiros等[4]完成了評估CA125診斷卵巢癌準確性的Meta分析，結果顯示CA125對卵巢癌的靈敏度為80%、特異度為75%。CA125對卵巢癌的敏感性與卵巢癌病理分期相關，按國際婦產科聯盟(FIGO)分期法，CA125的臨界值(cut-off值)為35 U/mL時，CA125對FIGOⅠ期的靈敏度為66%，Ⅱ期為74%，Ⅲ期為94%，Ⅳ期為100%。CA125對腫瘤組織具有高靈敏度和特異度，但單獨用于人群篩查時其靈敏度不夠。朱振寧等[5]得出當CA125的cut-off值為35 U/mL時，其診斷卵巢癌的靈敏度為65%、特異度為75%。另外，CA125對卵巢癌的特異性不強，除卵巢癌外，CA125在許多良性疾病(子宮內膜異位癥、卵巢囊腫)及生理情況(月經期、妊娠期)均升高。在大多數研究中，Ⅰ期卵巢癌檢查CA125的靈敏度在50%～60%。鑒于CA125的靈敏度有限，易發生漏診，需要新的TM來代替或補充，以更靈敏地發現早期卵巢癌。

2HE4

HE4由Kirchhoff在1991年發現，屬于蛋白質“4-硫”核心家族。HE4是由兩個“乳清蛋白域”和一個“4-二硫化中心”組成的一種相對分子質量為13×103的一種酸性、半胱酸豐富的分泌型糖蛋白。HE4的相對分子質量遠低于CA125，這可能是由于腫瘤發生時HE4比CA125更早、更易分泌進入血液。HE4在良性疾病患者和健康人血清中水平極低，但在卵巢癌患者血清中很高。HE4作為卵巢癌cDNA后出現的一個潛在生物標志物，雜交試驗發現在一些卵巢癌組織HE4表達相對于正常組織增加，說明HE4在癌旁細胞不表達。進一步使用基因表達序列分析(SAGE)技術研究卵巢癌細胞、組織和原發癌，證實了HE4作為一個潛在標志物在卵巢癌中表達上調。

HE4促進卵巢癌轉移和黏附。在體外研究顯示，HE4敲除可導致腫瘤生長抑制。將HE4基因轉入癌細胞后發現HE4能抑制細胞轉移和活體外移植癌形成。HE4可分泌進入體液中，在漿液性和子宮內膜樣卵巢癌中檢測到的HE4被認為是一種分泌型糖蛋白，即N-糖基化分泌蛋白。

HE4并非腫瘤特異性蛋白。乳腺正常腺上皮、女性生殖道、附睪、輸精管、遠端腎小管、呼吸道上皮細胞、結腸黏膜和唾液腺都表現HE4免疫反應[6-7]。在Drapkin等[8]研究發現,大多數非卵巢癌不表達HE4，正常組織表達僅局限于生殖道及呼吸道上皮。HE4陽性免疫反應在卵巢癌中突出，但在其他腫瘤中也發現陽性。在不同腫瘤中，卵巢癌的HE4表達水平最高。卵巢癌中HE4高表達已引起廣泛的關注。Drapkin等[8]應用免疫組化比較HE4在惡性卵巢癌、良性卵巢腫瘤和部分卵巢惡性疾病組織中的表達。卵巢癌不同組織學亞型HE4表達不同：93%漿液性卵巢癌呈陽性，子宮內膜腫瘤100%陽性，透明細胞癌50%陽性，黏液性卵巢癌不呈陽性。原發性輸卵管癌和正常輸卵管上皮都發現HE4表達，這降低了HE4的特異性。

HE4的相對分子質量低于腎小球濾過閾，卵巢癌患者尿液HE4水平較健康人或良性疾病患者高。因此，尿液HE4有可能成為檢測及診斷卵巢癌的非創傷性方法。CA125水平隨著年齡的增長而降低，而HE4水平隨著年齡增長顯著升高?？紤]到年齡對HE4檢測的劇烈影響，Urban等[9]建議從30～80歲，每隔10歲設定HE4年齡特異閾值，計算其95%置信區間。除了惡性卵巢疾病，許多因素會影響血清HE4水平。妊娠、肝腎功能異常也會影響HE4血清水平。

2.1HE4用于卵巢癌的早期診斷大量研究指出，HE4對卵巢癌的靈敏度高于CA125，適合早期診斷。侯娟娟等[10]比較7種常見卵巢TM的研究中指出，當cut-off值為140 pmol/L時，HE4的靈敏度(77%)最高，特異度為97%，受試者工作特征(ROC)曲線下面積為0.949。其靈敏度、特異度均優于CA125，ROC曲線下面積大于CA125，伍雪梅等[11]、朱文磊[12]也得出相似結論。由于HE4受年齡和月經影響較大，田峰等[13]研究絕經前后HE4對卵巢癌診斷的影響得出，絕經期cut-off值為70 pmol/L，絕經后cut-off值為150 pmol/L時，HE4的靈敏度為88%，特異度為87%，診斷符合率為87%。有薈萃分析結論指出，HE4對卵巢癌的靈敏度為83%、特異度為90%，ROC曲線下面積為0.927 1。

2.2HE4彌補CA125對早期卵巢癌診斷靈敏度較低的缺陷田峰等[13]研究指出，Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌組HE4水平明顯高于卵巢良性腫瘤及健康對照組。HE4有較高的特異度，CA125有較高的靈敏度。HE4對早期卵巢癌的靈敏度(59%)高于CA125(53%)，尤其對Ⅰ期卵巢癌的靈敏度(47%)明顯高于CA125(20%)。程洪艷等[14]、程雪菊等[15]研究得出HE4特別是對Ⅰ期卵巢癌的診斷靈敏度高于CA125。Rosen等[16]采用免疫組化技術對296例患者卵巢癌組織進行研究發現，在一部分沒有CA125表達的卵巢癌組織中存在HE4的高表達，提示HE4作為卵巢TM對CA125起互補作用。故HE4和CA125聯合檢測能更好地發現不同組織學類型的卵巢癌。

2.3HE4用于療效評估及復發監測超過80%晚期卵巢癌患者經過標準化化療方案治療后能獲得臨床緩解，但其中大多數在2～5年內將面臨復發危險。因此，有必要對這些患者進行定期監測。程洪艷等[14]對21例卵巢癌患者術前及每次化療后血清CA125和HE4進行監測，發現CA125和HE4高度相關。CA125于治療后3周下降至正常水平，HE4于治療后2周下降至正常水平，說明HE4較CA125更早隨病情變化，能更有效地評判療效。還有研究表明，HE4將發現復發的時間提前到4.5個月，在CA125升高的患者中部分患者HE4在CA125之前升高，且上升水平更高。說明HE4比CA125能更好地預測復發。王芝琴等[17]對75例卵巢癌患者出院后1年HE4、CA125水平進行動態監測，發現術后CA125、HE4均低于術前；復發組血清HE4、CA125水平高于穩定組。李玉芳等[18]觀察不同病理分期水平的92例卵巢癌和46例良性卵巢腫瘤患者術前、術后HE4與CA125水平，發現術后CA125、HE4明顯降低，卵巢癌組水平明顯高于卵巢良性腫瘤組，Ⅲ、Ⅳ期水平高于Ⅰ、Ⅱ期，中低分化組明顯高于高分化組，存活組明顯低于死亡組?？梢缘贸鯤E4可以用于判斷預后，發現復發。良性婦科疾病患者HE4水平很少升高，故HE4是鑒別卵巢良惡性腫瘤的良好指標，并可彌補CA125對早期卵巢癌靈敏度低的缺陷。HE4和CA125聯合檢測可提高陽性檢出率。姜靖等[19]驗證了Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌診斷中HE4聯合CA125優于單獨檢測。

3CA724

CA724是胃腸道腫瘤和卵巢癌的TM，特別是黏液性卵巢癌，且即使在交界性黏液性腫瘤中其陽性率也很高。與CA125聯合可彌補CA125對黏液性卵巢癌敏感性差的缺陷。CA724是通過以乳腺癌轉移癌細胞膜免疫所制備的McAbB72.3及純化抗原后制備的第二代McAbCC49所識別的抗原，相對分子質量為(220～400)×103。研究者應用免疫組化技術證明CA724在健康人的絕大多數組織中不表達，而在成人的結直腸、胰腺、乳腺、卵巢中強表達[7]。CA724對卵巢癌有一定特異性，常與其他TM聯合應用。Bian等[20]指出CA724與CEA聯合檢測卵巢癌組陽性率明顯高于良性對照組和健康對照組。吳能龍等[21]也得出CA724對于卵巢癌的靈敏度為16%，特異度為92%，可彌補CA125對黏液性腺癌敏感性欠佳的缺點。另外，朱振寧等[5]指出CA724對于Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌的靈敏度為23%，特異度為95%。CA724、HE4及CA125三項聯合檢測可提高診斷靈敏度，減少漏診率。

4CEA

CEA屬細胞表面糖蛋白家族，相對分子質量為(150～300)×103，存在于胚胎、胃黏膜上皮與一些惡性組織的上皮。通常在妊娠前6個月內水平升高，出生后水平已很低。而在腫瘤狀態時血清CEA水平異常升高。CEA是一種廣譜腫瘤標志物，對女性生殖系統惡性腫瘤均具有不同程度的靈敏度，其中卵巢黏液性囊性癌陽性率最高。對于上皮性卵巢惡性腫瘤，CEA在病情檢測、療效評價等方面均有較好的應用。伍雪梅等[11]研究得出，CEA對卵巢癌的靈敏度為26%，特異度為98%。姜靖等[19]均有相似結論。廖玲等[22]研究CEA、CA125及CA199聯合檢測不同腫瘤類型得出，CEA、CA125升高常見于肺癌、食管癌、乳腺癌、卵巢癌?？梢奀EA對卵巢癌的靈敏度低但有一定的特異性，適合聯合檢測。

TM是腫瘤細胞表達或宿主對腫瘤細胞反應產生的物質,是反映腫瘤存在和生長的化學物質，包括蛋白質、激素、酶、多胺、癌基因產物。可在血液、組織液、分泌物或腫瘤組織中檢測到，正常情況下血清濃度很低或無。TM與腫瘤組織分化特點、臨床分期均有一定關系，不同類型的TM相對于不同的腫瘤具有一定的特異性，由于腫瘤基因的復雜性，至今尚未發現一種TM為癌細胞所特有。在某一惡性腫瘤組織中常常出現兩項及以上指標升高。腫瘤患者常存在多種TM表達同時升高。由于卵巢癌組織的生物學多樣性，導致不同標志物表達水平差異較大[23]，提示通過對不同生物學來源的卵巢癌標志物聯合應用正好可以使它們優勢互補，彌補其單獨應用的不足。伍雪梅等[11]采用CA125、HE4及CEA聯合檢測，其靈敏度、診斷符合率、約登指數、陰性預測值均有不同程度的提高。CA125、CA724、HE4聯合檢測也可提高靈敏度[12，21]。崔美蘭等[24]采用CA724、HE4及CA125三項聯合檢測，靈敏度達92%，較單項檢測有所提高，減少了漏診率。多項TM聯合檢測可提高靈敏度和準確性，四項聯合檢測優于三項，三項優于兩項[25]。大量研究顯示，單一檢測陽性率偏低，臨床上多采用TM聯合檢測的方法用于腫瘤的篩查，TM聯合檢測可提高腫瘤診斷的靈敏度和特異度，降低漏診率和誤診率。CA125、CA724、HE4和CEA聯合檢測能進一步提高陽性檢出率，提高靈敏度，降低漏診率，是一組較科學、合理的TM群。

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(收稿日期：2015-11-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.025

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)05-0639-03

作者簡介：白珊珊，女，在讀碩士研究生，主要從事臨床免疫學檢驗工作。△通訊作者，E-mail:heyajun0801@163.com。