牛童 曾家豫 廖世奇 馬瑾 袁紅霞 馬梅蘭
·綜述·
免疫檢測技術(shù)及其研究進展
牛童曾家豫廖世奇馬瑾袁紅霞馬梅蘭
免疫檢測技術(shù)是一種以抗原抗體特異性識別和結(jié)合為原理對樣品中特定的目標物進行定性定量測定的分析方法,其在臨床醫(yī)學(xué)、現(xiàn)代生命科學(xué)、食品科學(xué)、生態(tài)學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。本文主要綜述近幾年應(yīng)用比較廣泛的免疫學(xué)檢測方法及其研究近況。
免疫學(xué)檢測技術(shù);酶標記;熒光素標記;放射免疫
1959年美國物理學(xué)家Berson和Yallow使用放射免疫檢測技術(shù)(Radioimmunoassay,RIA)檢測出血清中的微量胰島素,從而免疫檢測技術(shù)被引入分析化學(xué)界[1,2]。
免疫檢測技術(shù)的基本原理就是利用抗原與抗體之間的特異性和靈敏性反應(yīng),即以一種抗體或多種抗體作為反應(yīng)的分析試劑[2,3],進而對待測物進行定性及定量分析[2,4]。目前應(yīng)用比較廣泛的免疫檢測方法有:免疫沉淀(immunoprecipitate,IP),分子印跡技術(shù)(molecular imprinting technique,MIT)[2],酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),免疫PCR[5],免疫熒光技術(shù)(immunofluoreseence assay,IFA),免疫層析技術(shù),免疫磁珠分離技術(shù)[6],免疫傳感器((immunosensor)[7]等。
免疫熒光技術(shù)就是指用熒光色素對目標物標記后,再對其進行定性定量檢測的一種實驗技術(shù)[8]。其基本原理就是抗體和抗原發(fā)生特異性結(jié)合后,使用熒光顯微鏡對待測物進行觀察和鑒別。其基本操作步驟是先制備熒光標記物(熒光抗體或抗原),即在已知的抗體或者抗原上標記上相應(yīng)的熒光素,再將這種熒光標記物(熒光抗體或抗原)注入到細胞內(nèi)部作為探針,當(dāng)它們進入細胞后即可和細胞內(nèi)相應(yīng)的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合,此時使用熒光顯微鏡來觀察標本是否能發(fā)出熒光,以此來對細胞內(nèi)相應(yīng)的抗體或者抗原進行定位和檢測[6]?!?br>