少精、無精癥患者的染色體與性激素水平分析

趙亞梅 劉建剛

少精、無精癥患者的染色體與性激素水平分析

趙亞梅 劉建剛

目的分析少精、無精癥患者的染色體與性激素水平。方法59例少精癥患者和22例無精癥患者作為臨床研究對象,并選取20例精子數量正常人作為對照組。分別對其染色體核型、Y染色體微缺失情況以及血清性激素情況進行測定。結果無精組與少精組患者的促卵泡素(FSH)與促黃體素(LH)均顯著高于對照組,而無精組的FSH和LH又顯著高于少精組,差異有統計學意義(P＜0.05)；無精組與少精組睪酮(T)水平顯著低于對照組(P＜0.05)；無精組催乳素(PRL)顯著高于少精組和對照組,而少精組和對照組PRL水平比較,差異無統計學意義(P＞0.05)；染色體檢查 81例少精和無精癥患者中,有22例出現染色體畸變,畸變率為27.2%。81例無精、少精癥患者中,檢測到6例(7.4%)Y染色體微缺失；而對照組被試中,未出現Y染色體微缺失。結論臨床上應該對男性不育患者進行染色體核型分析、Y染色體微缺失和血清性激素測定,為后續的生殖治療提供合理的治療方案。

無精癥；少精癥；染色體；性激素

根據WHO數據顯示,現時全球約有15%的夫妻受到不孕不育的困擾,其中男性因素所導致的約占50%。而其中有30%的男性不育是由于男性的遺傳因素所導致。此外,研究還發現下丘腦-垂體-性腺軸系統對于那行性腺的生精和激素分泌都有重要的調節作用,而血清性激素的檢測能顯示該系統的功能。本研究對少精、無精癥患者進行細胞遺傳學檢查以及內分泌檢查,以探究染色體、Y染色體缺失和性激素水平與少精、無精癥的關系。現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1～12月臨床上確診為少精癥(精子數＜20×106/ml)患者59例和無精癥患者22例作為臨床研究對象,并選取20例精子數量正常人作為對照組。

1.2儀器和試劑 ①DNA提取和擴增試劑盒(上海康朗生物科技有限公司)； ②采用9700型PCR擴增儀(美國ABI公司)、的穩壓穩流電泳儀(興化分析儀器廠)和CI1000全自動化學發光免疫分析儀(北京利德曼公司)；性激素檢測試劑盒(拜爾公司)。

1.3方法

1.3.1性激素測定 清晨空腹采集研究對象的靜脈血,將血清進行分離,儲存在零下20℃冰箱,測定其T、PRL、LH和FSH［1］。

1.3.2染色體檢查 采集研究對象外周血進行淋巴細胞培養,G顯帶核型分析,鏡檢分析3～5個核型,若發現異常核型則加倍分析［2］。

1.3.3Y染色體微缺失 按照DNA提取試劑盒的要求提取研究對象DNA,按照說明書對DNA進行擴增,并對擴增的產物進行電泳檢測,根據電泳檢測的結果和正常男性的標準帶進行比較,確定患者Y染色體是否出現缺失。

1.4統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差(±s)表示,采用t檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1性激素測定 無精組與少精組患者的FSH與LH均顯著高于對照組,而無精組的FSH和LH又顯著高于少精組,差異有統計學意義(P＜0.05)；無精組與少精組T水平顯著低于對照組(P＜0.05)；無精組PRL顯著高于少精組和對照組(P＜0.05),而少精組和對照組PRL水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

2.2染色體檢查 81例少精和無精癥患者中,有22例出現染色體畸變,畸變率為27.2%。20例對照組被試的染色體檢查全部正常。見表2。

表1 三組血清T、PRL、LH和FSH比較(±s)

表1 三組血清T、PRL、LH和FSH比較(±s)

注：與對照組比較,aP＜0.05；與少精組比較,bP＜0.05

組別 例數 T(ng/L) PRL(mg/ml) LH(mlU/L) FSH(mlU/L)無精組 22 3.9±2.9ab13.7±6.2ab12.9±3.2ab15.3±9.9ab少精組 59 5.5±2.0a8.3±3.4 6.7±3.3a8.5±6.2a對照組 20 9.0±2.8 7.7±3.2 3.5±2.9 4.9±3.2

表2 81例研究對象核型異常情況(n)

2.3Y染色體微缺失 81例無精、少精癥患者中,檢測到6例(7.4%)Y染色體微缺失；而對照組被試中,未出現Y染色體微缺失。

3 討論

導致男性無精癥和少精癥的各種因素中,遺傳因素和內分泌因素起著十分重要的作用。本研究發現,81例少精和無精癥患者中,有22例出現染色體畸變,畸變率為27.2%。且檢測到6例(7.4%)Y染色體微缺失,而對照組正常。此外,T、PRL、LH和FSH等性激素和對照組相比,也出現異常。原因考慮如下：

男性生殖系統與中樞神經系統以及下丘腦-垂體-睪丸性腺軸系統密切相關,而有腺垂體促性腺激素細胞所分泌的FSH、LH、PRL和睪酮與此也密切相關。研究結果表明,少精癥和無精癥患者中,血清FSH和LH的水平均顯著高于對照組(P＜0.05),提示睪丸功能出現損傷,精子的發生和成熟受影響,令精子的活動度下降,從而導致不育［3］。

T為男性中十分重要的雄性激素,機體通過睪丸間質細胞分泌獲取。如果由于先天因素或者后天疾病導致睪丸受損,使生精能力降低、T含量下降。繼而影響精子的發育,導致少精或無精。研究結果也表明,無精癥組和少精癥組的T含量均低于對照組(P＜0.05),且無精癥組也顯著低于少精癥組(P＜0.05),表明T在無精、少精癥中的影響。

PRL是應激性激素,正常水平下能對LH有增強作用,從而促進T的分泌與合成,促進精子發生,同時對性腺的發育與功能維持都能產生十分重要的作用,研究結果表明,無精癥患者的PRL水平高于少精癥組和對照組(P＜0.05),導致性功能低下、不利于精子發育。由此可見,血清性激素的分泌對精子發育具有重要的調節作用［4］。

本研究發現,無精癥和少精癥患者中,有27.2%出現染色體編譯,其中以47,XXY和46,XY,Yqh+為主。47,XXY即患者比正常男性多出1條X染色體,令睪丸的發育產生影響,睪丸功能下降,出現睪丸發育差、第二性征不明顯和無精等。臨床上,發現Klinefelter綜合征患者出現的無精、少精的情況,普遍認為就是由于多出1條X染色體相關［5］。因此在進行ICSI輔助孕前檢查前,所進行的染色體核型分析不但能避免將父親遺傳缺陷傳給子代,還能幫助患者降低將來金錢和精神上的負擔。

染色體平衡易位的過程中,不會出現基因片段的丟失,因此男性的表現性是正常的。但有報道認為,染色體平衡易位也有可能出現無精癥或者少精癥,原因可能是同源染色體在減數分裂的前期無法聯合,導致染色體大量遺傳物質出現重復或者缺失,基因組發生不平衡,使配子凋亡。

1976年,Tiepolo等發現Y染色體上存在與精子發生相關的基因,被成為無精子因子,后來學者將該因子分為無精子因子a～d四個功能區,不同功能區的微缺失就會有不同的表現型［3］。由于Y染色體在精子發生時,無法好像其他常染色體一般進行DNA修復,因此只要有一個基因出現微缺陷就會發生效應。本次臨床研究中,檢測到6例(7.4%)Y染色體微缺失,表明Y染色體微缺失是導致男性不育的重要因素。

綜上所述,提示臨床上應該對男性不育患者進行染色體核型分析、Y染色體微缺失和血清性激素測定,為后續的生殖治療提供合理的治療方案。

［1］趙華萌.少精及無精不育患者血清性激素水平分析.蚌埠醫學院學報,2014,39(4):492-493.

［2］滕賢麟,施金俏,郭輝,等.無精癥及嚴重少精癥患者染色體核型和 Y 染色體微缺失分析.檢驗醫學,2014,29(12):1212-1214.

［3］李鋒.少精、無精癥患者染色體及性激素水平分析.國際檢驗醫學雜志,2012,33(4):506-507.

［4］陳斌鴻,陳社安.69 例少精、無精癥患者血清性激素水平分析.國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊,2005,26(7):406-408.

［5］楊歡利,毛英姿,諸溢揚,等.無精癥及嚴重少精癥患者 Y 染色體微缺失及細胞遺傳學研究.醫學研究雜志,2012,41(12): 106-109.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.16.052

2016-07-01］

835000 新疆維吾爾自治區伊犁哈薩克自治州婦幼保健院檢驗科