FLT3基因突變在急性早幼粒細胞白血病中的臨床意義

許惠麗

·臨床醫學·

FLT3基因突變在急性早幼粒細胞白血病中的臨床意義

許惠麗

目的探析FMS樣酪氨酸激酶3(FLT3)基因突變在急性早幼粒細胞白血病(APL)中的臨床意義。方法40例APL患者骨髓標本,使用DNA酶切、RT-PCR以及PCR等技術檢測FLT3基因D835突變(FLT3-D835)和FLT3基因內部串聯重復(FLT3-ITD),并分析其與患者臨床療效和表現的關系。結果APL患者外周血白細胞(WBC)的陽性率,FLT3-ITD突變型患者高WBC(HW)比例明顯高于FLT3-ITD野生型(P＜0.05)；FLT3-D835突變型患者HW比例與FLT3-D835野生型比較差異無統計學意義(P＞0.05)。結論FLT3-ITD突變型的所有患者,都具備高外周血WBC計數,但在FLT3-ITD野生型患者中,只有少數患者是高外周血WBC計數。

急性早幼粒細胞白血病；FMS樣酪氨酸激酶3；基因突變

早幼粒細胞白血病-維甲酸受體α(PML-RARα)融合基因被認為是APL發生的重要機制,選用全反式維甲酸(ATRA)靶向治療能使大部分APL患者獲得完全緩解(CR),若對ATRA進行單獨使用,則不能讓全部APL患者獲得長期無病生存［1］。所以,本文通過分析FLT3-D835、FLT3-ITD突變和APL患者臨床表現與治療關系,闡述FLT3基因突變在APL中的臨床意義,現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1～12月本院收治的40例APL患者為研究對象,其中男24例,女16例,年齡15～57歲,平均年齡(30.12±9.25)歲。通過骨髓細胞形態學檢查,可確診為APL。按照FLT3突變可分為FLT3-ITD野生型(32例)與FLT3-ITD突變型(8例),同時還可分FLT3-D835野生型(32例)與FLT3-D835突變型(8例)。外周血WBC計數≥10×109/L為HW,WBC＜10×109/L為低WBC(LW)；早幼粒細胞和骨髓原細胞之和≥80%為高含量(HB),＜80%為低含量(LB)；出血癥狀可分為0、1、2級,0、1級又合稱為A級(BA),2級則稱為B級(BB)。

1.2方法 分析FLT3-ITD突變,設計引物12R與11F,基因組DNA的擴增可采用PCR技術,并對FLT3-ITD突變進行分析。1*PCR反應緩沖液是PCR擴增體系,2.0 mmol/L MgCl2,基因組DNA 1 μg,0.2 mmol/L dNTPs,12R與11F引物各25 pmol,2.5 U的Tap DNA聚合酶,至終滅菌雙蒸水體積50 μl。反應體系在94℃反應5 min后,再按72℃2 min,55℃1 min,94℃45 s程序增擴35個周期,而后在72℃繼續加長2 min。增擴后,把2.0%瓊脂糖凝膠電泳融入到5 μl PCR產物后,對其進行分析。

1.3統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件處理數據。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

APL患者外周血WBC的陽性率,FLT3-ITD突變型患者HW比例明顯高于FLT3-ITD野生型(P＜0.05);FLT3-D835突變型患者HW比例與FLT3-D835野生型比較差異無統計學意義(P＞0.05)。FLT3突變型與野生型HB、BB、CR率比較差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 APL患者FLT3基因突變和臨床關系［n(%)］

3 討論

本文應用PCR技術,以40例APL患者為研究對象,探析了FLT3基因突變以及患者臨床療效與表現的關系。結果表明,8例具有FLT3-ITD突變,8例具有FLT3-D835突變。在FLT3-ITD突變型的8例患者中,均具備高外周血WBC計數,但在FLT3-ITD野生型患者中,只有2例具備高外周血WBC計數,通過上述可知,外周血WBC計數和FLT3-ITD突變具有相關性。通常FLT3-ITD突變APL患者具備高外周血WBC計數的原因主要包括FLT3酪氨酸激酶近膜區氨基酸序列,該序列串聯將會導致近膜區產生重復,從而對激酶活性產生抑制,進而激活下游的信號傳導通路,比如PI3K/AKT、RAS/MAPK以及STAT5等,并激活酪氨酸激酶,最終造成的細胞凋亡抑制與過度增殖有關［2-4］。

本研究顯示,FLT3野生型和突變型患者CR率比較差異無統計學意義(P＞0.05),此結果可能和FLT3突變樣品數不足有關。

［1］袁燕慧,歐陽建,陳兵,等.FLT3基因內部串聯重復突變在急性早幼粒細胞白血病中的臨床意義.白血病: 淋巴瘤,2015,24(4):220-223.

［2］程輝,邱慧穎,高磊,等.急性早幼粒細胞白血病41例分子生物學特征及其臨床意義.白血病: 淋巴瘤,2013,22(5):275-277.

［3］王迎,魏輝,劉兵城,等.三種PML/RARA亞型急性早幼粒細胞白血病臨床特點對比分析.山東醫藥,2015,55(27):7-10.

［4］朱化超.FLT3-ITD基因在急性髓細胞白血病患者中的突變及對預后影響分析.臨床血液學雜志,2015,28(3):392-396.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.08.017

2016-01-14］

467000 河南省平頂山市第一人民醫院血液科