尿核基質蛋白-22測定在膀胱癌中的臨床應用*

李輝英 陳彤 劉顯輝

（廣東省興寧市中醫醫院檢驗科興寧 514500）

●診療經驗●

尿核基質蛋白-22測定在膀胱癌中的臨床應用*

李輝英 陳彤 劉顯輝

（廣東省興寧市中醫醫院檢驗科興寧 514500）

目的：研究分析尿核基質蛋白-22測定在膀胱癌診斷中的應用價值。方法：隨機抽取我院2015年9月～2016年3月收治的疑似膀胱癌患者50例作為研究對象，采用酶聯免疫法對其尿樣中的核基質蛋白-22水平進行測定，并行尿脫落細胞學檢查，分別計算兩種方法檢查時患者的診斷陽性率。以患者的最終組織病理學診斷結果為依據，對核基質蛋白-22水平測定與尿脫落細胞學檢查診斷膀胱癌的靈敏度、特異性、準確度進行計算，同時分析核基質蛋白-22水平與膀胱癌患者病理分級之間的相關性。結果：核基質蛋白-22水平測定、尿脫落細胞檢查診斷膀胱癌的陽性率分別為66.00%和16.00%，檢測靈敏度分別為86.67%、40.00%，特異性分別為42.86%、94.29%，準確度分別為56.00%、78.00%，核基質蛋白-22水平測定在檢測陽性率、靈敏度上均顯著高于尿脫落細胞檢查，而檢測特異性和準確度低于尿脫落細胞檢查，差異均有統計學意義（P＜0.05）。在組織病理學檢查確診為膀胱癌的患者中，核基質蛋白-22檢測水平隨病理分級的升高而升高，且各級檢測結果的比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論：核基質蛋白-22測定應用于膀胱癌的篩查中，具有較高的靈敏度，且其檢測水平與膀胱癌患者的病理分級之間存在顯著相關性，可以將其作為膀胱癌的首選篩查方法，頗具臨床應用價值。

膀胱癌；核基質蛋白-22；尿脫落細胞學；診斷價值

膀胱癌是發生率最高的泌尿系統惡性腫瘤之一，且隨著生活工作環境的惡化，其發病率呈不斷上升趨勢，更有數據研究顯示，膀胱癌的術后復發率高達70%～80%[1]。對于膀胱癌的早期診斷、術后復發的預測與評估都是目前研究的重點。臨床上篩查、診斷膀胱癌的方法較多，其中，膀胱鏡和尿脫落細胞學檢查一直被認為是膀胱癌初診及隨訪探查的“金標準”[2]，但是前者因檢查有創無法用于合并出血傾向的急性膀胱炎患者，而后者則相對而言，敏感性略低，使其使用都受到一定程度的限制；尋找合適的、高敏感性、高特異性、可操作性強、重復性強的無創膀胱腫瘤標志物成為研究的重點。本文就我院2015年9月～2016年3月收治的疑似膀胱癌患者50例作為研究對象，探討核基質蛋白-22測定在膀胱癌診斷中的應用價值。現報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料隨機抽取我院2015年9月～2016年3月收治的疑似膀胱癌患者50例作為研究對象，患者均有肉眼血尿病史，且經超聲檢查提示膀胱位置存在占位性病變。50例患者中男36例，女14例；年齡32～79歲，平均（57.2±2.5）歲。

1.2 方法所有患者均行尿樣核基質蛋白-22水平測定和尿脫落細胞學檢查。尿樣的采集：選擇在上午8～12點完成尿液標本的一次性收集，將獲得的標本避光保存，并迅速轉入含有防腐劑的尿樣收集瓶中。尿樣核基質蛋白-22水平測定：抽取5 ml尿樣，在室溫下進行低速離心（離心速度為500 r/min，離心15 min），使用上海酶聯生物有限公司生產的雙抗體夾心ELISA試劑盒對尿樣中的核基質蛋白-22進行測定，具體方法：抽取9個孔條，將5個標準品、3個參考品以及經離心處理后的尿樣標本依次吸入到已包被單抗的小孔板內，在18～25℃的室溫下孵育，孵育時間為2 h，使其與含異羥基洋地黃毒甙元的單抗、酶聯羊抗異羥基洋地黃毒甙元相繼發生反應，并以顯色劑進行顯色處理，使用伯樂生命醫學產品（上海）有限公司生產的酶標儀進行比色（波長設定為490 nm）。所有操作均嚴格遵照試劑盒及檢測儀器的操作說明進行。以測定的標準品吸光度建立標準曲線，經參考品濃度對其線性可行性驗證之后，通過該標準曲線對尿樣中核基質蛋白-22的含量進行計算。當核基質蛋白-22的檢測結果在10 IU/ml以上時，可以判斷為檢測陽性[3]。尿脫落細胞學檢查：取20 ml尿樣，室溫下在1 500 r/min的離心速度下離心15 min，將獲得的尿沉渣依次進行涂片和HE染色處理，并于顯微鏡下觀察并尋找癌細胞，所有患者均進行為期3 d的連續檢查，只要有一次發現有癌細胞存在則可判斷為檢測陽性[3]。

1.3 評價指標分別計算核基質蛋白-22水平測定、尿脫落細胞檢查兩種方法診斷膀胱癌的陽性率。以患者的最終組織病理學診斷結果為依據，對核基質蛋白-22水平測定與尿脫落細胞學檢查診斷膀胱癌的靈敏度、特異性、準確度進行計算，同時分析核基質蛋白-22水平與膀胱癌患者病理分級之間的相關性。

1.4 統計學方法數據采用SPSS12.0軟件進行統計學分析，計量資料用（±s）表示，采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 核基質蛋白-22水平測定、尿脫落細胞檢查兩種方法診斷膀胱癌的結果分別對核基質蛋白-22水平測定、尿脫落細胞檢查診斷膀胱癌的結果進行觀察，可見其檢測陽性率分別為66.00%（33/50）和16.00%（8/50），以組織病理學診斷結果為依據，則其檢測靈敏度分別為86.67%（13/15）、40.00%（6/15），特異性分別為42.86%（15/35）、94.29%（33/35），準確度分別為56.00%（28/50）、78.00%（39/50），可見核基質蛋白-22水平測定在檢測陽性率、靈敏度上均顯著高于尿脫落細胞檢查，而檢測特異性和準確度低于尿脫落細胞檢查，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1、表2。

表1 核基質蛋白-22水平測定結果與組織病理學診斷結果的比較（例）

表2 尿脫落細胞檢查結果與組織病理學診斷結果的比較（例）

2.2 核基質蛋白-22水平與膀胱癌患者病理分級之間的相關性按照患者的組織病理學診斷結果，15例確診為膀胱癌的患者中，病理分級為G1、G2、G3的患者分別有5例、7例、3例，其核基質蛋白-22檢測水平隨病理分級的升高而升高，且各級檢測結果的比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 膀胱癌不同病理分級患者的核基質蛋白-22水平比較（±s）

表3 膀胱癌不同病理分級患者的核基質蛋白-22水平比較（±s）

3 討論

核基質是細胞核的骨架結構，可以在維持細胞核正常形態、大小等過程中發揮重要作用，并能參與DNA復制、轉錄、RNA合成以及基因表達的調控[4]。由于細胞大小、形態的異常改變被認為是細胞癌變的重要病理學特征，則核基質的改變也與癌細胞的出現息息相關。其中，核基質蛋白-22是核基質蛋白（與基質中的RNA結合的一種蛋白質）的一種，屬于中央核基質[5]。正常情況下，協調核有絲分裂期間的染色體正確并使其均等地分配到子代細胞中核有絲分裂裝置蛋白的主要功能，但當細胞發生癌變的時候，由于惡變細胞核中的遺傳物質無法在有絲分裂末期完成正常分配，核有絲分裂裝置蛋白的合成量急劇升高，作為核有絲分裂裝置蛋白的亞單位的核基質蛋白-22水平也會相應升高，并于細胞凋亡后經細胞核釋放，以可溶性復合物或片段的形式存在于尿液中。有調查數據顯示，與正常人尿路上皮細胞相比，膀胱癌患者的上皮細胞中核基質蛋白-22的含量可高出25倍，因而通過對尿液中核基質蛋白-22水平的測定可以對膀胱癌患者進行早期診斷[6]。

本文分別采用了核基質蛋白-22測定、尿脫落細胞檢查兩種方法對50例疑似膀胱癌的患者進行了檢查，結果發現核基質蛋白-22測定在檢測陽性率和靈敏度上均相對較高，且可隨癌癥患者病理分級的升高的升高，這與腫瘤細胞惡變程度升高導致的增殖分裂活躍度增加、組織細胞潰解數量增多有關，提示核基質蛋白-22是檢測膀胱癌的敏感指標[7]。但是其在檢測特異性上則比較低，僅為42.86%，這可能與尿管的留置、尿道異物的存在、泌尿系感染、腸代膀胱等有關。李盛寬等[8]的研究還對比了初發性膀胱癌和繼發性膀胱癌患者的術前術后的核基質蛋白-22水平，可見，初發性膀胱癌術前的核基質蛋白-22水平顯著更高，但經手術治療后，則核基質蛋白-22水平均顯著降低，提示核基質蛋白-22測定對于患者的術后評估與預測也有一定價值。總的來說，核基質蛋白-22測定應用于膀胱癌的篩查中，具有較高的靈敏度，且其檢測水平與膀胱癌患者的病理分級之間存在顯著相關性，可以將其作為膀胱癌的首選篩查方法，頗具臨床應用價值。

[1]李輝英.尿核基質蛋白-22和液基細胞學在血尿患者膀胱癌篩查中的應用[J].廣東微量元素科學,2016,23(7):42-44

[2]梁安坡,張玉香,張金莊.尿NMP22及Cox-2蛋白含量檢測對淺表性膀胱癌電切術后復發的預判價值研究[J].海南醫學院學報, 2015,21(12):1716-1718

[3]吳靜,方克偉.尿液中核基質蛋白22聯合端粒酶活性檢測診斷膀胱癌的實驗研究[J].現代腫瘤醫學,2013,21(3):595-598

[4]畢長富,張克榮,董浩,等.尿核基質蛋白22測定在膀胱癌診斷中的應用價值[J].河北醫藥,2010,32(14):1847-1848

[5]楊青,李俊,梁朝朝,等.核基質蛋白22聯合尿脫落細胞學檢查對膀胱癌診斷的價值[J].安徽醫科大學學報,2012,47(2):220-222

[6]崔國興.尿端粒酶、NMP22和ImmunoCyt聯合檢測在膀胱癌診斷中的應用[J].現代泌尿外科雜志,2013,18(2):145-148

[7]劉民,劉勝,趙萬里,等.尿腫瘤標志物聯合檢測在膀胱癌早期診斷中的應用價值[J].河北醫藥,2011,33(2):179-180

[8]李盛寬,鄧耀良,劉德云,等.尿核基質蛋白在膀胱癌中的臨床意義[J].廣西醫科大學學報,2013,30(5):682-685

The Clinical Application of Urinary Nuclear Matrix Protein-22 determination in Bladder Cancer

LI Hui-ying,CHEN Tong,LIU Xian-hui
(The Department of Clinical Laboratory,Xingning Chinese Medicine Hospital,Guangdong,Xingning514500)

Objective:To study the value of urinary nuclear matrix protein-22 determination in the diagnosis of bladder cancer. Methods:From September 2015 to March 2017,50 suspected bladder cancer patients were randomly selected as the research subjects,by using the method of enzyme-linked immune,the level of nuclear matrix protein-22 in the urine samples were determined,exfoliative urine cytology was also used,the patient's diagnosis positive rates were calculated for two methods respectively.On the basis of the final histopathologic diagnosis,the sensitivity,specificity and accuracy for diagnosis of bladder cancer by the nuclear matrix protein-22 level determination and exfoliative urine cytology examination were compared,at the same time the correlation between the nuclear matrix protein-22 level and pathology classification of patients with bladder cancer was analyzed.Results:The positive rate for the diagnosis of bladder cancer was 66.00%and 16.00%,respectively by the nuclear matrix protein-22 determination and exfoliated urine cytology and the sensitivity were 86.67%,40.00%,the specificity of 42.86%,94.29%and the accuracy of 56.00%,78.00%respectively,the positive rate and the sensitivity of the nuclear matrix protein-22 determination were significantly higher than those of exfoliated urine cytology,but the specificity and the total accuracy were lower than those of exfoliated urine cytology,the differences were statistically significant(P＜0.05).In the patients diagnosed by histopathological examination the level of nuclear matrix protein-22 increased when the pathological grade rose,and the differences of test results were statistically significant among different grades(P＜0.05).Conclusion:The nuclear matrix protein-22 determination has high sensitivity in bladder cancer screening,there is a significant correlation between the test level and the pathological grading of bladder cancer.It can be as the preferred method for screening of bladder cancer,and has clinical value.

Bladder cancer;Nuclear matrix protein-22;Exfoliative urine cytology;Diagnosis value

R737.14

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2016.11.030

2016-10-11）

廣東省梅州市醫藥衛生科研立項課題（編號：2015-B-81）