絞股藍皂苷聯合非諾貝特灌胃治療大鼠高脂血癥效果觀察

白清，郭莉閣

(河南省中醫院，鄭州 450002)

·基礎研究·

絞股藍皂苷聯合非諾貝特灌胃治療大鼠高脂血癥效果觀察

白清，郭莉閣

(河南省中醫院，鄭州 450002)

目的 觀察絞股藍皂苷聯合非諾貝特灌胃治療大鼠高脂血癥的效果。方法 選取SPF級雄性SD大鼠60只，喂以高脂飼料，分為模型組、絞股藍組、非諾貝特組、聯合組。模型組給予0.5% CMC-Na溶液灌胃，絞股藍組給予150 mg/kg絞股藍皂苷灌胃，非諾貝特組給予30 mg/kg非諾貝特灌胃，聯合組給予150 mg/kg絞股藍皂苷+30 mg/kg非諾貝特灌胃。連續給藥6周，每天灌胃1次。采血分離血清測定TG、TC、LDL-C、HDL-C、載脂蛋白A(apoA)、載脂蛋白B(apoB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)；解剖分離組織、臟器，計算肝臟系數、腎臟系數。結果 與模型組相比，絞股藍組、非諾貝特組和聯合組血清TC、TG、LDL-C低(P均<0.05),非諾貝特組HDL-C高(P<0.05)，非諾貝特組和聯合組HDL-C/LDL-C高(P均<0.05)；與絞股藍組相比，聯合組TC、TG、LDL-C低(P均<0.05)，HDL-C/LDL-C高(P<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組TC、TG低(P均<0.05)。與模型組相比，絞股藍組、聯合組肝臟系數、腎臟系數低(P均<0.05),非諾貝特組肝臟系數低(P<0.05)；與絞股藍組相比，聯合組肝臟系數、腎臟系數低(P均<0.05)，非諾貝特組肝臟系數低(P<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組肝臟系數低(P<0.05)。與模型組相比，絞股藍組、非諾貝特組和聯合組血清apoA高(P均<0.05)，非諾貝特組和聯合組血清apoB低、apoA/apoB高(P均<0.05)。與絞股藍組相比，聯合組血清apoA和apoA/apoB高(P均<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組apoA/apoB高(P<0.05)。與模型組相比，非諾貝特組、絞股藍組、聯合組血清SOD高(P均<0.05)，非諾貝特組、聯合組血清MDA低(P均<0.05)。與絞股藍組相比，非諾貝特組、聯合組血清MDA低(P均<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組血清SOD、MDA變化不顯著。結論 非諾貝特與絞股藍聯合灌胃可以降低高脂血癥大鼠血脂血清TC、TG、LDL-C、apoB及肝臟系數、腎臟系數，提高血清HDL-C和血清apoA，其效果優于單用非諾貝特或絞股藍。

高脂血癥；絞股藍皂苷；非諾貝特；血脂代謝；載脂蛋白；動物實驗

絞股藍又名七葉膽、五葉參、七葉參、小苦藥等，根莖或全草可入藥。迄今為止，己從絞股藍中分離得到將近169種達瑪烷型絞股藍皂苷，是人參皂苷的5～6倍[1,2]。絞股藍所含有的83種與人參皂苷有類似結構骨架的達瑪烷型皂苷,在降低膽固醇、降血糖、抗炎和免疫調節等方面有效[3]。非諾貝特是PPARα激動劑，是臨床上常用的降脂藥[4]。二者聯合應用治療高脂血癥的效果尚不明確。本研究用絞股藍皂苷聯合非諾貝特治療大鼠高脂血癥,觀察其治療效果。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 SPF級雄性SD大鼠60只，體質量180～220 g，購于武漢生物制品研究所，許可證號：SCXK(鄂)2013-0006。每籠5只，分開飼養。適應性喂養期間所有大鼠自由進食普通飼料和飲用蒸餾水。飼養環境：每天12 h黑、白循環光照，室溫(25±2)℃，相對濕度50%±10%，并定期清潔飼養環境。絞股藍皂苷由本實驗室自制(純度>60%)，非諾貝特購自Sigma公司；TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。高脂飼料依據文獻[5,6]說明，按基礎飼料78.8%、豬油10%、蛋黃粉10%、膽固醇1%、膽酸鈉0.2%的比例配制。

1.2 高脂血癥模型建立、分組及用藥方法 所有大鼠適應性飼養7 d后，改喂高脂飼料，自由進食進水，喂養4周，建立高脂血癥模型。隨機分為模型組、絞股藍組、非諾貝特組、聯合組，各15只。模型組給予0.5% CMC-Na溶液灌胃，絞股藍組給予150 mg/kg絞股藍皂苷灌胃，非諾貝特組給予30 mg/kg非諾貝特灌胃，聯合組給予150 mg/kg絞股藍皂苷+30 mg/kg非諾貝特灌胃。連續給藥6周，每天灌胃1次。飼養方式不變。

1.3 療效觀察方法 各組大鼠給藥6周時，禁食12 h，乙醚麻醉，摘眼球采血，分離血清。根據試劑盒方法測定TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoA、ApoB、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),其中TC、TG、LDL-C、HDL-C用過氧化物酶法測定，ApoA、ApoB用免疫比濁法測定，SOD用羥胺法測定，MDA用硫代巴比妥酸法測定。處死各組大鼠，解剖分離肝臟、腎臟，測定大鼠體質量、肝臟質量、腎臟質量，計算肝臟系數(肝臟系數=肝臟質量/體質量×100%)、腎臟系數(腎臟系數=腎臟質量/體質量×100%)。

2 結果

2.1 各組大鼠給藥6周時血脂比較 給藥6周時各組大鼠血脂見表1。給藥6周時，與模型組相比，絞股藍組、非諾貝特組和聯合組血清TC、TG、LDL-C低(P均<0.05),非諾貝特組HDL-C高(P<0.05)，非諾貝特組和聯合組HDL-C/LDL-C高(P均<0.05)；與絞股藍組相比，聯合組TC、TG、LDL-C低(P均<0.05)，HDL-C/LDL-C高(P<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組TC、TG低(P均<0.05)。

表1 給藥6周時各組大鼠血脂比較±s)

注：與模型組比，aP<0.05；與絞股藍組相比，bP<0.05；與非諾貝特組相比，cP<0.05。

2.2 各組大鼠給藥6周時肝臟系數、腎臟系數比較 給藥6周時各組大鼠肝臟系數、腎臟系數見表2。給藥6周時，與模型組相比，絞股藍組、聯合組肝臟系數、腎臟系數低(P均<0.05),非諾貝特組肝臟系數低(P<0.05)；與絞股藍組相比，聯合組肝臟系數、腎臟系數低(P均<0.05)，非諾貝特組肝臟系數低(P<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組肝臟系數低(P<0.05)。

表2 給藥6周時各組大鼠肝臟系數、腎臟系數比較±s)

注：與模型組比，aP<0.05；與絞股藍組相比，bP<0.05；與非諾貝特組相比，cP<0.05。

2.3 各組大鼠給藥6周后血清載脂蛋白比較 給藥6周后各組大鼠血清載脂蛋白水平見表3。給藥6周后，與模型組相比，絞股藍組、非諾貝特組和聯合組血清ApoA高(P均<0.05)，非諾貝特組和聯合組血清ApoB低、ApoA/ApoB高(P均<0.05)。與絞股藍組相比，聯合組血清ApoA和ApoA/ApoB高(P均<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組ApoA/ApoB高(P<0.05)。

2.4 各組大鼠給藥6周后血清SOD、MDA比較 給藥6周后各組大鼠血清SOD、MDA見表4。給藥6周后,與模型組相比，非諾貝特組、絞股藍組、聯合

表3 給藥6周時各組大鼠血清載脂蛋白水平比較±s)

注：與模型組比，aP<0.05；與絞股藍組相比，bP<0.05；與非諾貝特組相比，cP<0.05。

組血清SOD高(P均<0.05)，非諾貝特組、聯合組血清MDA低(P均<0.05)。與絞股藍組相比，非諾貝特組、聯合組血清MDA低(P均<0.05)。與非諾貝特組相比，聯合組血清SOD、MDA變化不顯著(P均>0.05)。

表4 各組大鼠血清SOD、MDA比較

注：與模型組比，aP<0.05；與絞股藍組相比，bP<0.05。

3 討論

高脂血癥是指以血漿中一種或多種脂質成分(主要指甘油三酯和膽固醇)異常增高為特征的代謝紊亂綜合征[10]。脂質代謝異常是動脈粥樣硬化的首要危險因素，動脈粥樣硬化則是導致心腦血管疾病的罪魁禍首。LDL-C一直被認為有致動脈粥樣硬化作用，ApoB是LDL-C的主要成分，故ApoB水平的升高也反映了LDL-C的增高。而HDL被認為是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護因子，HDL-C參與膽固醇逆向運轉，促進動脈壁膽固醇的清除，是膽固醇從細胞移出不可缺少的接受體。ApoA為HDL-C的主要成分，ApoA既是卵磷脂膽固醇酰基轉移酶(LCAT)的激活劑和HDL-C受體的配體，又是HDL-C的主要成分，故ApoA水平的升高也反映了HDL-C的增高。

絞股藍是名貴中草藥，含有人參皂苷類化合物，抗腫瘤、降血糖[11]、調節血脂[12]、抗炎[13]等作用顯著。黃萍等[14]發現絞股藍復方對大鼠性糖尿病腎病模有良好的治療作用，能有效調節血糖、血脂代謝，抑制糖尿病腎病大鼠早期腎臟肥大和高濾過，減少尿蛋白的排出，保護腎功能，延緩糖尿病腎病的發展。黃曉飛等[15]發現，絞股藍膠囊具有良好的降血脂作用，其機制是其中的活性成分對肝臟中與脂代謝相關基因的表達有調控作用。非諾貝特是PPARα激動劑，是臨床上常用的降脂藥，其調節血脂的作用主要體現在降低TC、升高HDL-C。近年來多項研究顯示非諾貝特除了降脂作用，還具有抗氧化應激、抑制炎癥反應、抑制內質網應激、抗凋亡等作用，并可降低2型糖尿病血管并發癥的風險[7～9]。

本研究結果顯示,給藥6周后，與模型對照組相比，絞股藍組TC、LDL-C顯著降低；與單獨應用非諾貝特的調脂作用相似，說明絞股藍皂苷的調脂作用確切。聯合組與絞股藍組相比較，肝重和肝臟系數都明顯降低，但單用絞股藍或非諾貝特者肝臟重量降低不明顯，說明兩者聯用有一定的增效作用。經給藥治療調節脂代謝后，與模型組相比，絞股藍組ApoA顯著升高，但絞股藍組ApoB、ApoA/ApoB變化不顯著，這可能與給藥劑量有關。

高脂飲食在許多組織中能夠引起氧化應激效應。當機體氧化應激水平升高后,體內氧自由基增多,使得脂質過氧化產物MDA增加。MDA水平可反映機體過氧化的程度,從而間接地反映機體血管老化的程度。在生理狀態下,機體也會有自由基產生,但體內存在的抗氧化酶系統能清除氧自由基,因此不會引起組織細胞過氧化而導致損傷。SOD是這些抗氧化酶的主要代表。本研究結果顯示，給藥6周后，非諾貝特組、聯合組大鼠血清MDA均降低(P<0.05)，聯合組與模型組相比血清MDA顯著降低(P<0.05)，而其余組降低不明顯，說明絞股藍聯合非諾貝特可以提高高脂血癥大鼠血清SOD水平，降低血清MDA水平。

調脂藥物是否聯合應用，也是臨床上歷來存在分歧的問題。本研究結果顯示，絞股藍皂苷與非諾貝特聯合應用6周后，大鼠血清各項檢測指標略優于單用絞股藍組，提示調脂治療可以聯合用藥。本研究僅比較了聯合用藥與單藥絞股藍治療大鼠高血脂癥的療效及安全性，觀察的時間較短，遠期的療效和安全性尚需進一步研究。

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2016-01-12)