犬外耳道耵聹腺腺瘤的病理學診斷

付祖權，黃紹宋，姚　嬌，劉　波，夏浩坤，劉曉麗，張萬坡，谷長勤，程國富，胡薛英

（華中農業大學動物醫學院，湖北 武漢 430070）

犬外耳道耵聹腺腺瘤的病理學診斷

付祖權，黃紹宋，姚嬌，劉波，夏浩坤，劉曉麗，張萬坡，谷長勤，程國富，胡薛英

（華中農業大學動物醫學院，湖北 武漢 430070）

通過臨床觀察、組織學診斷結合免疫組織化學染色對一例犬外耳道腫瘤進行病理學診斷。本病例為13歲雄性蘇格蘭牧羊犬，腫瘤發生于左側外耳道，眼觀腫物呈灰白色，形成乳頭狀結節，與周圍組織界限清晰。組織學觀察可見結締組織將實質分成小的囊狀結構；實質細胞增生，呈典型的頂漿分泌性腺體結構，核大而圓，異型性小，形成乳頭狀突起；間質中有多量的血管，并伴有炎性細胞浸潤。免疫組織化學中的CK染色發現增生的實質細胞為上皮細胞，而通過SMA染色可見腺上皮被覆一層完整的肌上皮細胞。通過以上診斷方法確定該犬患為外耳道耵聹腺腺瘤。

犬；組織病理學；免疫組織化學；耵聹腺腺瘤。

耵聹腺是來自于耳道結締組織層的一種頂漿分泌型汗腺，在外耳道分泌黃色黏稠液體，對外耳道起保護、濕潤作用［1］。2010年Park J K等報道稱，在所有犬腫瘤中，僅2%～6%為外耳道腫瘤［2］，犬的耵聹腺腺瘤在臨床上極為少見，所以根據外耳道腫瘤分類，犬外耳道常見腫瘤有耵聹腺腺瘤、炎性息肉、乳頭狀瘤、基底細胞瘤、耵聹腺腺癌、鱗狀細胞癌、未知起源的癌［3］，而犬常見的耵聹腺腫瘤則包括耵聹腺腺瘤、混合型耵聹腺腺瘤、耵聹腺腺癌、混合型耵聹腺腺癌［4］。犬的外耳道腫瘤在臨床上極為少見，對于犬外耳道耵聹腺腺瘤的報道亦極少。本試驗將一例疑似犬耵聹腺腫瘤組織進行病理組織學觀察，并通過SMA、CK兩個指標進行了免疫組織化學染色，結合臨床癥狀對該腫瘤進行病理學診斷，從而豐富犬外耳道耵聹腺腫瘤的臨床資料。

1　材料與方法

1.1材料本病例由犬主人送往深圳市福華寵物醫院就診的蘇格蘭牧羊犬。切下的腫瘤送往華中農業大學動物醫學院病理實驗室制作蠟塊并保存。

1.2試劑鼠抗CK抗體（1∶200），鼠抗SMA抗體（1∶200），DAB顯色液（固體），SABC試劑盒，5% BSA封閉液，以上試劑都購自武漢博士德生物工程有限公司；H.E.染色相關試劑（蘇木素-伊紅），自行配制。

1.3方法

1.3.1臨床診斷通過對該犬左側外耳道腫瘤的視診及觸診確定其位置、大小以及對機體的影響。切除腫瘤后觀察腫瘤特征。

1.3.2腫瘤組織的病理學檢查將切除的腫塊放在10%福爾馬林溶液中固定3 d后取材、脫水、浸蠟、包埋。并將組織切成3 μm厚度的切片。一部分進行H.E.染色，觀察病理變化；另一部分進行免疫組織化學法（SABC）染色，對腫瘤進行更準確的診斷。H.E.染色采用常規的染色方法；SABC法參考武漢博士德生物工程有限公司的即用型SABC免疫組化試劑盒內說明書。

1.3.3采圖與觀察將H.E.染色切片和免疫組化切片在顯微鏡下觀察，并通過NIS-Elements高清晰度彩色圖文分析系統配合Nikon80i生物光學顯微鏡對典型病變進行顯微采圖。

2　結果

2.1臨床癥狀患犬為蘇格蘭牧羊犬、雄性、13歲。眼觀腫物位于左側外耳道，幾乎占據了整個外耳道。切除后觀察腫物呈灰白色、質地硬，表面凹凸不平，形成乳頭狀結節，與周圍組織界限清晰，無包膜，但易于剝離，無向周圍組織浸潤的現象（見中插彩版圖1A）。

2.2病理組織學特征鏡下觀察可以外側為表皮層，表皮下有大量的結締組織，將實質分成小的囊狀結構，囊內實質細胞增生，向內凹陷，呈乳頭狀結構（見中插彩版圖1B）。實質細胞外側間質結締組織中有多量的血管（見中插彩版圖1C）。高倍鏡下可見實質細胞有典型的頂漿分泌性腺特點，即內層為一層腺上皮，排列整齊，為立方上皮細胞。腺上皮細胞核大而圓，細胞質嗜酸性，并且向胞外分泌嗜酸性物質。細胞大小一致，異型性小；核分裂相少（見中插彩版圖1D）。在腺上皮的外側被覆一層肌上皮。肌上皮外側充滿了結締組織及血管、紅細胞；同時，在結締組織中有大量的炎性細胞浸潤。可見在腫瘤的同時伴有外耳炎的發生。

免疫組織化學染色（IHC）可見，對腫瘤組織的CK染色可見，乳頭狀凸起外側均被著上棕黃色，著色部位為細胞質，說明該腫瘤的增生細胞含有CK抗原，而內側的結締組織即血管則沒有被著色（見中插彩版圖圖1E）；SMA染色可見，在結締組織外側與外層的立方上皮之間的一層細胞著色，著色部位為細胞質（見中插彩版圖圖1F）。

3　討論

犬外耳道表面襯有皮膚，是體表皮膚的延生，其內含有毛、皮脂腺和管狀的耵聹腺。其外側部分由軟骨支撐，其他部分由骨支撐［5］。耵聹腺為頂漿分泌性腺，是一種變異的大汗腺，所以具有頂漿分泌性腺的特點。

對于犬腫瘤的確診，主要是依據組織學診斷結合免疫組織化學的方法。耵聹腺腺瘤在組織學上主要表現出耵聹腺的囊性增生，乳頭狀排列［6］。形成與正常耵聹腺或者頂漿分泌性腺相似的結構，并且具有腺上皮以及被覆的肌上皮的雙層結構，腺上皮細胞中含有分泌的嗜酸性物質。這種腫瘤常伴有外耳道炎，通過這種慢性刺激，使腫瘤有惡化的傾向［7］。本試驗通過H.E.染色可以發現腫瘤的增生組織與耵聹腺腺瘤相似，同時外側細胞的特征，可以判定為頂漿分泌性腺。而在免疫組織化學染色中，CK染色可判斷增生的實質細胞來源于上皮組織；SMA染色結果可知腺上皮下被覆一層較完整的肌上皮。

通過組織學與免疫組織化學染色結果，可以確定本犬所患為外耳道耵聹腺腺瘤。

同時，有文獻報道，大多數的耵聹腺腺瘤會伴有炎癥的發生，且老年犬多發［8］。問診可知患病犬為13歲雄性犬，而在組織學觀察中可見多量的炎性細胞浸潤。即為伴發炎癥的老年犬，符合犬耵聹腺腫瘤的一般特性。對于耵聹腺腺癌，癌細胞會以不同的方式排列，并且細胞核的異形性大等特點，同時具有向腮腺侵襲的可能［9］；而對于混合性耵聹腺腺癌中在耵聹腺腺癌的基礎上伴隨有軟骨和骨的增生，混合型耵聹腺腺瘤伴隨有肌上皮的增生［10］。

志謝：深圳福華寵物醫院黃平華院長為本試驗提供腫瘤病例。

［1］張信軍，陳靜，秦衛紅，等.犬耵聹腺腺瘤的手術治療與病理學診斷［J］.中國獸醫雜志，2013，49（11）：55-56.

［2］Park J K，Lee S K，Park S J，et al.Fibroma with osseous metaplasia of external auditory canal in a dog［J］.Journal of veterinary diagnostic investigation，2010，22（4）：635-638.

［3］Stephen J Withrow，David M.Vail.Small Animal Clinical Oncology（Fourth Edition）［M］.United States：Elsevier Health Sciences，2007：393.

［4］Sharif M A M.Epidemiology of skin tumor entities according to the new WHO classification in dogs and cats［D］.Universit?tsbibliothek Giessen，2006：17.

［5］Willam J Bacha.Jr，Linda M.Bacha.獸醫組織學彩色圖譜［M］.2版.北京：中國農業大學出版社，2000：261.

［6］Vivek Taneja，Taneja M K.Ceruminous gland adenoma［J］.Indian Journal of Otology，2014（2）：41-43.

［7］Bellah J R.Neoplasia of the Ear in the Dog and Cat［C］.XI Congreso Nacional de Medicina Veterinaria，Santiago de Chile，2000.

［8］Van der Gaag I.The pathology of the external ear canal in dogs and cats［J］.Veterinary Quarterly，1986，8（4）：307-317.

［9］Crain N，Nelson B L，Barnes E L，et al.Ceruminous gland carcinomas：a clinicopathologic and immunophenotypic study of 17 cases［J］.Head and neck pathology，2009，3（1）：1-17.

［10］Alecsandru L B.Comparative Oncology［M］.Bucharest：The Publishing House of the Romanian Academy，2007：340-370.

A caseof ceruminous gland adenoma in dog for pathology diagnose

FU Zu-quan，HUANG Shao-song，YAO Jiao，LIU Bo，XIA Hao-kun，LIU Xiao-li，ZHANG Wan-po，GU Chang-qin，CHEN Guo-fu，HU Xue-ying
（College of Veterinary Medicine，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China）

We diagnosed an ear tumor in a dog through clinic observation，histology examination and immunochemistry.In a 13-years-old Rough Collie，the tumor in the left external auditory canal formed papillary nodules in hoary，but boundaries were clear with the surrounding tissue.In histology examination，substantive tissues in apocrine glands structure was divided in small ones by connective tissue，and the cell nucleus was big，circle and small pleomorphic.The blood vessel and inflammatory cells were observed in mesenchyme.Immunochemistry staining with CK and SMA showed that the proliferation happened in ceruminous gland.The result indicated that the tumor in external auditory canal was ceruminous gland adenoma.

canine；histology pathology；immunochemistry；ceruminous gland adenoma.

HU Xue-ying

S858.292

A

0529-6005（2016）09-0075-02

2015-09-28

付祖權（1991-），男，碩士生，從事動物病理學研究，E-mail：1051496317@qq.com

胡薛英，E-mail：hxying@mail.hzau.edu.cn