豬瘟疫苗研究及使用中的增效方法

賈向陽，文新望，曾 杰，夏鳴雷（.湖南省益陽市赫山區(qū)畜牧水產(chǎn)局，湖南 益陽 4000；.湖南省益陽市綜合職業(yè)中等專業(yè)學(xué)校，湖南 益陽 4000；.湖南省益陽市赫山區(qū)泥江口鎮(zhèn)動物防疫站，湖南 益陽 4000）

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豬瘟疫苗研究及使用中的增效方法

賈向陽1，文新望2，曾 杰1，夏鳴雷3
（1.湖南省益陽市赫山區(qū)畜牧水產(chǎn)局，湖南 益陽 413000；2.湖南省益陽市綜合職業(yè)中等專業(yè)學(xué)校，湖南 益陽 413000；3.湖南省益陽市赫山區(qū)泥江口鎮(zhèn)動物防疫站，湖南 益陽 413000）

作者介紹：賈向陽（1973-）男，漢族，湖南益陽，獸醫(yī)師，主要從事畜牧獸醫(yī)工作。

豬瘟是由豬瘟病毒引起豬的一種高度接觸性和致死性的傳染病，其主要臨床特征表現(xiàn)為發(fā)病急、全身泛發(fā)性點(diǎn)狀出血、高熱稽留以及脾梗死等癥狀，被我國列為一類動物傳染病。盡管已有20多個(gè)國家宣布豬瘟得以凈化，但是由于國際貿(mào)易增加，導(dǎo)致豬瘟在近年來似有逐年上升的趨勢，突然暴發(fā)的新聞時(shí)有傳出，此外，疫苗質(zhì)量差異、豬場免疫計(jì)劃不科學(xué)以及源頭性牛病毒性腹瀉病毒污染等因素也導(dǎo)致豬瘟流行趨勢上升。迄今為止，接種豬瘟疫苗仍然是預(yù)防、控制和凈化豬瘟的主要有效手段，并且隨著對豬瘟的研究不斷深入，研究表明一些中草藥添加劑和免疫增強(qiáng)劑等對豬瘟疫苗的免疫效果發(fā)揮積極的作用，從而在預(yù)防豬瘟中發(fā)揮重要的作用。因此，本文在詳細(xì)介紹了豬瘟疫苗的類型和正確使用的基礎(chǔ)上，闡述了中草藥添加劑和免疫增強(qiáng)劑等增強(qiáng)豬瘟疫苗免疫效果的作用，以期為各豬場預(yù)防豬瘟暴發(fā)提供一定的參考。

1 豬瘟疫苗

1.1 普通疫苗

常見的普通疫苗包括滅活疫苗和弱毒疫苗，二者各具特點(diǎn)，均在預(yù)防豬瘟中發(fā)揮了重要的作用。滅活疫苗的主要代表是滅活結(jié)晶紫疫苗，相對較為安全，在早期豬瘟的預(yù)防和控制中發(fā)揮了重要作用，但是使用該疫苗免疫后，在豬體內(nèi)形成的抗體較少且抗體存續(xù)時(shí)間較短，難以達(dá)到長時(shí)間免疫保護(hù)的效果，此外在組織培養(yǎng)中病毒滴度低也是限制滅活疫苗發(fā)展的一個(gè)重要因素。弱毒疫苗是在豬瘟防控過程中使用最為廣泛的疫苗，目前在全世界范圍內(nèi)推廣使用的有3種，即“C株”兔化弱毒疫苗（中

1.2 新型疫苗國）、“Thiveosal”冷變異毒株（法國）以及GPE-細(xì)胞弱毒疫苗（日本）。相比于滅活疫苗，弱毒疫苗的優(yōu)點(diǎn)更為突出，具有產(chǎn)生抗體快、體內(nèi)抗體存續(xù)時(shí)間更長，質(zhì)量穩(wěn)定，外源病毒污染得 到很大程度的減少，但是不同廠家生產(chǎn)的弱毒疫苗的免疫原性存在差異。

在豬瘟流行暴發(fā)的新形勢下，滅活疫苗和弱毒疫苗逐漸顯示出其一些不足之處，主要表現(xiàn)為安全性不高、難以區(qū)分免疫豬群和野毒感染豬群等。因此，利用基因工程技術(shù)和現(xiàn)代生命科學(xué)研究出來的新型豬瘟疫苗逐漸嶄露頭角，并取得了一定的研究進(jìn)展，為全面防控和凈化豬瘟病毒增添了一個(gè)新的保護(hù)平臺。新型疫苗主要包括核酸疫苗、亞單位疫苗、合成肽疫苗和嵌合病毒載體疫苗等［1］。

1）核酸疫苗是將編碼免疫原的基因克隆至質(zhì)粒中，然后將質(zhì)粒DNA接種至動物，隨著外源基因在動物體內(nèi)的表達(dá)而激活動物本身的免疫系統(tǒng)，從而形成特異性免疫，具有穩(wěn)定性較好、產(chǎn)生抗體的效率高、能構(gòu)成多價(jià)疫苗等優(yōu)點(diǎn)。

2）亞單位疫苗是利用不含核酸的微生物的某種表面結(jié)構(gòu)成分制成的具有誘導(dǎo)動物機(jī)體產(chǎn)生抗體的疫苗，具有穩(wěn)定性強(qiáng)和安全性高等優(yōu)點(diǎn)。

3）合成肽疫苗是將具有抗原效應(yīng)的寡肽連接在載體后輔以佐劑制成的疫苗，也可以在同一載體上連接多個(gè)寡肽從而制成具有多價(jià)效應(yīng)的疫苗，具有多價(jià)性和安全性高等優(yōu)點(diǎn)。

4）嵌合病毒載體疫苗是將2種載體以某種方式嵌合在一起，集二者優(yōu)點(diǎn)于一身而實(shí)現(xiàn)優(yōu)點(diǎn)的疊加和放大效應(yīng)，相比而言，嵌合病毒載體疫苗更有希望作為新型豬瘟標(biāo)記疫苗應(yīng)用于生產(chǎn)中防控豬瘟。

1.3 增強(qiáng)豬瘟疫苗免疫效果的措施

影響豬瘟疫苗免疫效果的因素較多，主要包括：機(jī)體因素，即母源抗體的干擾、母豬持續(xù)感染、仔豬胎盤感染、免疫抑制性疾病、免疫抑制性藥物、應(yīng)激；疫苗因素，即疫苗質(zhì)量、運(yùn)輸、保存以及疫苗間的干擾等；免疫程序不科學(xué)、免疫操作技術(shù)不規(guī)范；霉菌毒素的影響以及飼料質(zhì)量和飼養(yǎng)管理的影響等［2］。因此，科學(xué)合理地使用疫苗才能達(dá)到最佳的防控效果。結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，提出以下幾點(diǎn)供參考：

1）選擇品質(zhì)優(yōu)良的疫苗，應(yīng)當(dāng)選擇高質(zhì)量、高效價(jià)、主管部門指定的疫苗，也可以選擇國內(nèi)幾個(gè)知名品牌的豬瘟弱毒疫苗聯(lián)合使用，效果更佳，此外，在使用疫苗時(shí)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照使用說明，現(xiàn)配現(xiàn)用，根據(jù)疫苗的特點(diǎn)保存于適宜的環(huán)境下。

2）制定個(gè)性化的、科學(xué)的免疫程序，因?yàn)椴淮嬖趦蓚€(gè)完全相同的豬場，對于任何豬場，其免疫程序均具有個(gè)性，切不可照搬照抄別人的免疫程序，因此需要在定期了解豬群豬瘟抗體水平和注射豬瘟疫苗后的免疫效果的基礎(chǔ)上，制定最適宜本豬場的、具有鮮明個(gè)性的免疫程序，科學(xué)的免疫程序是提高免疫效果的基礎(chǔ)。

3）規(guī)范使用藥物，在注射豬瘟弱毒疫苗前后7 d內(nèi)，不能對豬群使用抗菌和抗病毒藥物，此外應(yīng)當(dāng)與接種豬繁殖與呼吸綜合征疫苗間隔15 d以上，與接種其他病毒疫苗間隔7～10 d為宜，以避免疫苗之間的相互干擾。

4）加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、環(huán)境控制和飼料質(zhì)量，為豬群創(chuàng)造一個(gè)舒適的環(huán)境，提高群體整體健康水平，進(jìn)而提高豬群免疫應(yīng)答水平，尤其是目前飼料中霉菌毒素含量嚴(yán)重超標(biāo)，應(yīng)提前在飼料中添加霉菌毒素處理劑，禁止飼喂霉變飼料［3-4］。

2 中草藥添加劑對豬瘟疫苗作用效果的影響

中草藥作為我國人民在長期的生產(chǎn)、生活中積累沉淀下來的寶貴財(cái)富，不但具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、抑殺病毒的功能，還具有非特異性的抗病毒功能，其價(jià)格低廉、資源豐富、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)使得其成為畜禽養(yǎng)殖業(yè)中防治病毒性疾病的理想藥物。研究表明中草藥復(fù)方制劑能夠顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果，還能明顯改善機(jī)體免疫能力，對防治豬瘟具有重要作用。林秋敏等［5］研究表明，復(fù)方中草藥制劑（主要包含黃芪、黨參、馬齒莧、淫羊藿、神曲、白術(shù)、麥芽、甘草、當(dāng)歸和山楂）能夠顯著提高25日齡仔豬豬瘟抗體水平，且存在劑量效應(yīng)，其中以1.2%的添加劑量的效果最佳。林雪玲等［6］利用黃芪、黨參、魚腥草、板藍(lán)根、白芷和甘草等制成中藥方劑，研究其對仔豬豬瘟疫苗免疫應(yīng)答的影響，結(jié)果表明：1.0%、1.5% 和2.0%的添加水平的豬瘟抗體阻斷率分別比對照組高9.57%、18.27%和30.93%，豬瘟抗體陽性率均大于70%，其中1.5%和2.0%添加水平的豬瘟抗體變異系數(shù)均小于40%，綜合分析顯示中藥方劑可顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答，且以2.0%的添加劑量效果最佳。閆益波等［7］研究了復(fù)方中草藥（主要包含人參、黃芪、黨參、茯苓、當(dāng)歸、白術(shù)、砂仁、陳皮、西洋參和甘草）對仔豬豬瘟疫苗免疫效果的影響，結(jié)果表明：復(fù)方中草藥可顯著提高豬瘟疫苗免疫豬群血液中IgG、IgM的含量和T、B淋巴細(xì)胞增殖率，而且T淋巴細(xì)胞亞群比例（CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD8+）也得到明顯改善，還能顯著提高抗氧化酶SOD活性和嗜中性粒細(xì)胞的吞噬功能，從而證實(shí)復(fù)方中草藥可顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果。王自然［8］研究表明：1.0%添加水平的中藥免疫增強(qiáng)劑（包含黃芪、黨參、何首烏、淫羊藿、女貞子、白術(shù)、白芍、五味子）可顯著提高豬瘟血清抗體效價(jià)和T淋巴細(xì)胞百分率，表明其具有促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖作用，從而顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果。

黃芪多糖作為中草藥黃芪的主要活性成分，由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖等組成，多項(xiàng)研究表明黃芪多糖具有增強(qiáng)豬瘟疫苗免疫效果的作用，主要采用拌料口服和肌肉注射或與豬瘟疫苗配伍注射。黃保平等［9］研究表明在基礎(chǔ)日糧中添加500 mg/kg、1 000 mg/kg黃芪多糖（純度70%）可顯著升高斷奶仔豬血清中豬瘟抗體效價(jià)、IL-4和IL-γ含量，從而證實(shí)其具有明顯的增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果。杜繼紅等［10］在接種豬瘟疫苗前3 d起分別以100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg的劑量將黃芪多糖拌料口服至疫苗接種后4 d，抗體水平檢測顯示與對照組相比添加黃芪多糖可提高豬瘟抗體滴度1個(gè)以上，具有提高豬瘟疫苗抗體水平的作用，其中以200 mg/kg的添加劑量最佳。杜立中等［11］以0.5%的黃芪多糖、疫苗專用稀釋液和生理鹽水作為豬瘟疫苗的稀釋劑，結(jié)果顯示，與生理鹽水相比，黃芪多糖作為豬瘟疫苗稀釋液可顯著提高血清中IgG及其亞型和細(xì)胞因子IL-2、IL-6的含量，與疫苗專用稀釋液相比分別在免疫7、14、28 d提高IgG含量1.6%、6.4%、7.1%，IL-2含量分別提高12.1%、2.9%、15.3%，表明黃芪多糖作為疫苗稀釋液對豬瘟疫苗具有良好的佐劑作用。鐘靜寧等［12］研究表明在豬瘟疫苗首免接種前3 d或接種后3 d連續(xù)肌肉注射3 d黃芪多糖注射液（0.2 mL/kg），抗體水平升高最快，明顯優(yōu)于0.4 mL/kg注射劑量。陳禮等［13］在注射豬瘟疫苗的同時(shí)按每千克體重0.1 mL的劑量注射健力素（黃芪多糖注射液），結(jié)果表明首免和二免后25 d的免疫抗體合格率分別達(dá)85%和100%，均高出對照組15個(gè)百分點(diǎn)，表明黃芪多糖具有明顯的免疫增效作用。由此，不難看出黃芪多糖具有明顯增強(qiáng)豬瘟疫苗免疫效果的作用，但是其具體采用肌肉注射或拌料飼喂以及劑量水平還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，以確定最佳的添加方式和劑量。

3 小結(jié)

綜上所述，在豬瘟反復(fù)流行的新形勢下，新型疫苗的研發(fā)應(yīng)用則顯得尤為重要，而且在注射疫苗時(shí)應(yīng)當(dāng)科學(xué)合理地使用疫苗才能達(dá)到最佳的防控效果。此外，中草藥添加劑具有明顯增強(qiáng)豬瘟疫苗免疫效果的作用，而且價(jià)格低廉、資源豐富、毒副作用小，具有廣闊的開發(fā)利用前景，黃芪多糖更是有極具開發(fā)利用的價(jià)值，有望作為豬瘟疫苗免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐。

參考文獻(xiàn)

［1］ 王春花，孫元，仇華吉.新型豬瘟疫苗研究進(jìn)展［J］.生物工程學(xué)報(bào)，2013，29 （7）：880-890.

［2］ 王彬，萬莉，張琦，等.豬瘟免疫失敗原因分析［J］.豬業(yè)科學(xué)，2013，30（5）：100-102.

［3］ 李嬌，祖立闖，王艷，等.豬瘟疫苗免疫失敗原因分析與防制對策探討［J］.養(yǎng)豬，2013（4）：105-107.

［4］ 孫石靜，董彥鵬，繆芬芳，等.我國當(dāng)前豬瘟疫苗特點(diǎn)及科學(xué)免疫［J］.畜禽業(yè)，2014（3）： 4-6.

［5］ 林秋敏，賴寶色，杜海江，等.自擬中草藥復(fù)方免疫增強(qiáng)劑對豬瘟疫苗免疫力的影響［J］.中國畜牧獸醫(yī)文摘，2014，30（2）：181.

［6］ 林雪玲，林伯金，潘書磊，等.中藥方劑對自然感染PCV2斷奶仔豬生長性能和豬瘟疫苗免疫應(yīng)答的影響［J］.福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2013，28（10）：957-961.

［7］ 閆益波，張玉換，李文剛，等.獸用中草藥免疫增強(qiáng)劑對豬瘟疫苗免疫效果影響的研究［J］.中國豬業(yè)，2012（4）：32-35.

［8］ 王自然.中藥免疫增強(qiáng)劑在豬瘟疫苗免疫中的免疫調(diào)節(jié)作用的研究［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2006（2）：15-17.

［9］ 黃保平，劉銀寶，劉玉華.黃芪多糖對斷奶仔豬生產(chǎn)性能與豬瘟疫苗免疫效果的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（17）：5493-5494.

［10］ 杜繼紅，高亞軍，王海良，等.黃芪多糖粉對豬瘟疫苗免疫效果及生長性能的影響［J］.中國畜牧雜志，2013，49（22）：65-68.

［11］ 杜立中，馬霞，劉永錄，等.黃芪多糖對豬瘟活疫苗免疫應(yīng)答的佐劑作用［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，43（9）：156-159.

［12］ 鐘靜寧，熊艷蕓，彭少忠，等.黃芪多糖對豬瘟疫苗免疫抗體效價(jià)的影響研究［J］.當(dāng)代畜牧，2014（4）：17-19.

［13］ 陳禮，劉東升，甘清毅，等.黃芪多糖對豬瘟疫苗免疫效力的影響［J］.廣西畜牧獸醫(yī)，2013，29（2）：99-100.

收稿日期：（2014-12-11）