添加麩皮與纖維素酶對筍殼青貯后氰甙含量的影響

曾俊棋，岳萬福　(浙江農林大學動物科技學院，浙江杭州 311300)

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添加麩皮與纖維素酶對筍殼青貯后氰甙含量的影響

曾俊棋，岳萬福*(浙江農林大學動物科技學院，浙江杭州 311300)

我國是世界上竹類資源最豐富國家之一，占世界總量的30%，竹林面積約550萬hm2，有“竹子王國”之稱[1]。筍殼是農業廢棄物，其營養價值高于常用的秸稈飼料[2-3]，且產量巨大，經粉碎、青貯發酵等處理后可作為優質的家畜飼料來源[4]。但是，筍殼中含有氰甙，這是一種植物毒素，至少2 000種植物中含有這種毒素，如竹筍、亞麻籽、苦杏仁等[5-6]。氰甙本身是無毒的，但當植物細胞結構被破壞時，含氰甙植物內的葡萄糖苷酶可水解氰甙生成劇毒的氫氰酸[7-9]。若家畜采食大量含氰甙的食物，除可引起急性中毒外，同時伴有蛋白質代謝障礙，容易引起神經系統疾患[10-11]，造成家畜中毒甚至死亡的風險，進而對養殖業經濟效益造成重大損失[12]。目前，筍殼氰甙去除的方法主要是水煮法、溫熱處理法、酸處理-濕熱處理法和干熱處理法等[13-14]，但從飼料配合與添加劑對筍殼氰甙去除效果的研究卻罕見報道。為此，筆者研究添加麩皮與纖維素酶對筍殼青貯后氰甙含量的影響，旨在尋找一條合理利用與開發筍殼飼料資源的新途徑，為筍殼在飼料工業中的應用提供理論依據和實踐參考[15]。

1材料與方法

1.1樣品采集試驗于2015年8月在浙江農林大學動物科技學院進行。試驗原料筍殼(青貯料)和麩皮，均由臨安慶仙生態農業有限公司提供。纖維素酶由浙江省農業科學院微生物研究所研制，為固體劑型。

1.2藥品與試劑乙酸鋅溶液(100 g/L)；氫氧化鈉溶液(10 g/L)；酚酞-乙醇指示液(10 g/L)；乙酸；磷酸鹽緩沖溶液(0.5 mol/L，pH 7.0)；氯胺T溶液；異煙酸-吡唑啉酮溶液；酒石酸；硬脂酸；氰甙標樣(65 μg/ml)購自國家標準物質中心。

1.3筍殼處理按照2×4 兩因子試驗設計。酶的添加為1個因子，麩皮的添加為另1個因子。試驗分為2個處理：不加酶處理(Ⅰ)和加酶處理(Ⅱ)，加酶處理中酶添加量均為1 300 g/t DM原料。各處理分別設置4組：100% 青貯筍殼(對照組，C)、5% 麩皮+95% 筍殼(1組)；10%麩皮(WB)+90% 筍殼(2組)和15%麩皮(WB)+85% 筍殼(3組)，將青貯筍殼與添加劑調制均勻，每袋2.5 kg，用真空聚乙烯袋密封，室溫下保存，對照組與處理組每個試樣作5個重復，取平均值，比較其氰甙含量變化。氰甙含量的測定采用異煙酸-吡唑啉酮比色法，該方法檢測限為0.01 mg/kg。

1.4氰甙含量測定筍殼粉碎勻漿，稱取10 g(精確到0.01 g)置于500 ml蒸餾瓶中，加水約200 ml，將樣品浸沒，依次加20 ml乙酸鋅溶液、1 g 酒石酸和1 g 硬脂酸，迅速連接好氰甙蒸餾裝置。將冷凝管下端插入盛有10 ml氫氧化鈉溶液的100 ml容量瓶液面下，緩慢加熱蒸餾瓶，收集蒸餾液近100 ml，取下容量瓶，加水至刻度，混勻。取10 ml蒸餾液置于25 ml比色管中；若濃度過高，經稀釋后取10 ml。

吸取不同濃度氰甙標準溶液10 ml置于25 ml比色管中。在樣品溶液及標準溶液中各加入1 ml氫氧化鈉溶液和1滴酚酞-乙醇指示液，用乙酸調至紅色剛剛消失，加入5 ml磷酸鹽緩沖溶液，加溫至35 ℃左右，再加入0.1 ml氯胺T溶液，加塞混合，放置5 min，然后加入5 ml異煙酸-吡唑啉酮溶液，加水至25 ml，混勻，于35 ℃水浴放置40 min，用1 cm比色杯，以零濃度管作參比，于638 nm波長處測定吸光值。

1.5數據處理檢測方法的準確度用加標回收率估計，于5個不同試樣加標時，其平均回收率為99.9%。檢測方法的精確度是用5個平行試樣測定的，試驗結果均以平均值±標準差。

2結果與分析

該試驗結果表明，筍殼青貯后的平均氰甙含量為2.34 mg/kg，加酶組的氰甙含量為2.21 mg/kg，顯著低于不加酶組(P<0.05)。由表1可知，各試驗組的氰甙含量顯著低于對照組(P<0.05)，試驗3組的氰甙含量極顯著低于試驗1組與對照組(P<0.01)，顯著低于試驗2組(P<0.05)。試驗1組與對照組氰甙含量差異不顯著(P>0.05)，表明隨著麩皮添加水平的提高，筍殼青貯后的氰甙含量逐漸下降。當麩皮添加水平為0%~10%時，筍殼青貯后氰甙含量下降較快；當麩皮添加水平為10%~15%時，筍殼青貯后氰甙含量下降較慢。

表1　不同處理添加麩皮后筍殼的氰甙含量

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

由表1可知，當麩皮添加分別為0、5%、10%、15%時，加酶處理與不加酶處理氰甙含量的變化趨勢相同，對照組的氰甙含量高于試驗1、2與3組，其中試驗3組的氰甙含量顯著低于試驗1和2組(P<0.05)，試驗1組與2組差異不顯著(P>0.05)。

3結論與討論

筍殼營養物質豐富，含有較多的生物活性物質，作為青貯飼料能提高家畜的免疫能力和生產能力，促進家畜的生長發育[16-18]。但是，若不對筍殼的飼用安全性進行有效評估，并采取合適的飼料配合方法，就會對家畜生長甚至生命造成嚴重威脅，達不到有效合理利用資源的目的[19-20]。纖維素酶與含氰甙類植物混合后，能夠酶解氰甙中的葡萄糖苷鍵，使得氫氰酸提前被釋放，氰甙含量降低[21-22]。在低含糖量、高水分的青貯原料(筍殼、紫云英)中添加麩皮，并且當麩皮添加水平為10%時，可得到較好品質的青貯料[23]。麩皮中含有大量的黃酮類化合物，它是一類葡萄糖苷酶抑制劑，具有抗氧化活性和清除羥自由基的能力，使氰甙不能被分解[24]。小麥麩對很多參與致癌物質形成的酶都有抑制作用，從而使腸道中致癌物質形成減少，如結腸細菌的β-葡萄糖苷酸酶、7α-脫羥基酶、硝基還原酶和偶氮基還原酶等[25-26]，以上與該研究結果基本一致。

該研究結果表明在加酶與不加酶2種情況下，隨著麩皮添加水平的提高，青貯筍殼筍殼氰甙的去除效果愈加明顯，筍殼青貯后氰甙含量逐漸降低，但在同時添加酶與麩皮的情況下，筍殼青貯后氰甙含量下降速度較快，可能是因為添加一定量的麩皮與纖維素酶對青貯筍殼氰甙中的葡萄糖苷酶具有抑制作用，麩皮配比越高，抑制作用就越明顯。因此，在青貯筍殼中添加纖維素酶和15%麩皮的效果較好，氰甙含量均處于相對安全水平，可安全供給家畜飼喂。

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摘要[目的] 研究添加麩皮與纖維素酶對筍殼青貯后氰甙含量的影響。[方法]采用異煙酸—吡唑啉酮比色法研究添加麩皮與纖維素酶對筍殼青貯后氰甙含量的影響。[結果]添加麩皮與纖維素酶均可降低筍殼青貯后的氰甙含量。麩皮添加水平越高，青貯筍殼毒性越低，當麩皮添加水平為15%時筍殼青貯后氰甙含量最低。[結論] 該研究可為筍殼飼料的資源化利用提供理論依據。

關鍵詞筍殼；氰甙；青貯；麩皮；纖維素酶

Effects of Adding Wheat Bran and Cellulose on Cyanide Glycoside Content of Bamboo Shoot Shell Silage

ZENG Jun-qi, YUE Wan-fu*(College of Animal Science and Technology, Zhejiang Agriculture & Foresty University, Hangzhou, Zhejiang 311300)

Abstract[Objective] The research aimed to study the effects of adding cellulose and wheat bran on cyanide glycoside content of bamboo shoot shell silage. [Method] The effects of adding cellulose and wheat bran on cyanide glycoside content of bamboo shoot shell silage were studied by using isonicotine acid-pyrazolone photometric method. [Result] Cyanide glycoside content of bamboo shoot shell silage was decreased by adding cellulose and wheat bran. The adding level of wheat bran was higher, the lower toxicity bamboo shoot shell silage had. When the adding level of wheat bran was 15%, cyanide glycoside content in bamboo shoot shell silage was the lowest. [Conclusion] The research could provide theoretical basis for resourceful utilization of bamboo shoot shell feedstuff.

Key wordsBamboo shoot shell；Cyanide glycoside；Silage；Wheat bran；Cellulose

收稿日期2015-09-29

通訊作者

作者簡介曾俊棋(1990-)，男，陜西西安人，碩士研究生，研究方向：動物營養與飼料。*，副教授，博士，碩士生導師，從事動物營養與飼料研究。

基金項目浙江農林大學人才啟動項目(QJD1202015)。

中圖分類號S 816.2

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2015)32-067-02