豬用加味玉屏風緩釋微丸薄層鑒別方法的研究

尚　磊,梁　立,孟　妍,單寅鑫

(黑龍江職業學院　150080)

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豬用加味玉屏風緩釋微丸薄層鑒別方法的研究

尚磊,梁立,孟妍,單寅鑫

(黑龍江職業學院150080)

摘要：建立豬用加味玉屏風緩釋微丸的質量控制標準。采用薄層色譜法對豬用加味玉屏風緩釋微丸中的黃芪、防風、金銀花三味藥材進行了定性鑒別。在薄層層析色譜中均能檢出黃芪、防風、金銀花，且斑點清晰、陰性無干擾。結論 該方法簡便、準確、可靠，可用于豬用加味玉屏風緩釋微丸的質量控制。

關鍵詞：豬用加味玉屏風緩釋微丸；質量控制；薄層色譜法；定性鑒別

豬用加味玉屏風緩釋微丸是以中醫經方玉屏風散為基礎，加入金銀花、蒲公英等藥材而研制成的新型中藥復方緩釋微丸制劑。該制劑具有殺菌抑菌、調節機體的免疫機能以及非特異性抗菌的作用，能顯著提高豬對常見傳染病的抗病力。為控制豬用加味玉屏風緩釋微丸的質量，本文采用薄層色譜法(TLC法)對該制劑中的黃芪、防風、金銀花三味藥材進行了定性鑒別，從而為控制豬用加味玉屏風緩釋微丸的內在質量提供了依據。試驗方法如下。

1儀器與試藥

儀器：AGB5型十萬分之一電子天平(METTLER TOLEVO公司)，電熱恒溫水浴鍋(天津泰斯特有限公司)， DHG一9030A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海一恒科技有限公司) ，KQ5200B型超聲波振蕩器(昆山超聲儀器公司)，WFH-201B型紫外透射反射儀(上海精科)。

試藥：黃芪甲苷對照品、防風對照藥材、金銀花對照藥材、綠原酸對照品(中國食品藥品檢定研究院)，豬用加味玉屏風緩釋微丸(黑龍江職業學院藥物制劑室)，硅膠G薄層預制板(青島海洋化工廠)，所用試劑均為分析純(天津津東天正)。

2薄層色譜鑒別

2.1　黃芪的TLC鑒別

取本品10g，研細，加正丁醇50mL，超聲處理30min，濾過，濾液加1%氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次15mL，棄去堿液，再用正丁醇飽和的水洗至中性，棄去水液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。再按處方比例，取缺黃芪的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(2010版《中國藥典》一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液及陰性對照溶液各15μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(65：35：10)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的棕褐色斑點，陰性無干擾。見圖1。

2.2　防風的TLC鑒別

取本品10g，研細，加水40mL使溶解，濾過，濾液用石油醚(30～60℃)振搖提取2次(25mL、20mL)，合并石油醚液，揮干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取防風對照藥材2g，加水250mL，煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至約10mL，加乙醇30mL振搖，靜置，濾過，濾液蒸至無醇味，用石油醚(30～60℃)振搖提取2次(25mL、20mL)，合并石油醚液，揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液。再按處方比例，取缺防風的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(2010版《中國藥典》一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液及陰性對照溶液各10μl、對照藥材2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(1：1)為展開劑[1]，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性無干擾。見圖2。

2.3　金銀花的TLC鑒別

取本品10g，研細，將其置于索氏提取器中，加甲醇30 mL回流提取4小時，取甲醇提取液，回收甲醇，定容為5mL，作為供試品溶液。另取綠原酸對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。

另取金銀花對照藥材粉末0. 2g，加甲醇5mL，放置12小時，濾過，濾液作為對照藥材溶液。再按處方比例，取缺金銀花的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(2010版《中國藥典》一部附錄VI B)試驗，吸取上述四種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7：4：3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的藍綠色熒光斑點，陰性無干擾。見圖3。

圖1黃芪TLC圖譜
注：1、4 黃芪甲苷對照品溶液2、5 陰性對照樣品溶液3、6 供試品溶液

圖2防風TLC圖譜
注：1、3、5 陰性對照樣品溶液2 防風對照藥材溶液4、6 供試品溶液

圖3金銀花TLC圖譜
注：1 綠原酸對照品溶液2 金銀花對照藥材溶液3、4、5 供試品溶液6 陰性對照樣品溶液

3討論與小結

豬用加味玉屏風緩釋微丸的君藥為黃芪，黃芪主要有效成分黃芪甲苷常作為黃芪原藥材及含黃芪制劑的質量控制的指標成分。但因為本品為中藥復方制劑，化學成分較為復雜，直接測定干擾成分多，故本試驗采用堿試液洗滌處理樣品，可有效減少干擾，且分離度較好。近代藥理研究顯示，金銀花是一種作用很強的廣譜抗菌中藥，其提取物對金黃色葡萄球菌的抑菌率可達90%，對大腸桿菌亦有50%的抑菌效果[2]，金銀花的主要成分是綠原酸，故本試驗選取綠原酸作為對照品進行薄層鑒別。本研究采用TLC法對豬用加味玉屏風緩釋微丸中的幾味有代表性的中藥材進行定性鑒別，經驗證，可用于豬用加味玉屏風緩釋微丸制劑的質量控制。

參考文獻：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社,2010:616.

[2] 張紅峰,白艷軍,藍宇淑,等.中藥金銀花提取物體外抑菌作用[J].華東師范大學學報:自然科學版,2000(1):107-110.

基金項目：黑龍江省佳木斯市2014年度重點科研課題：佳木斯地區養豬場適度規模體系研究(14091)。

作者簡介：孫凡花(1981-)，碩士，副教授，研究方向：動物營養與飼料 、畜牧業經濟管理。