李釗 李維聰
中藥天麻中天麻素的含量測定
李釗 李維聰
目的探討分析不同產地中藥天麻的天麻素含量。方法從合法的藥材公司購買標示產地為四川江油、云南昭通、甘肅康縣、貴州大方的天麻各一批次若干,在色譜條件:YMC-Triart C18 色譜柱(4.6mm×250mm,5 μm);檢測波長:220 nm;柱溫: 30℃;流動相: 0.05%磷酸水溶液(B)-甲醇(A)梯度洗脫,0~10min,B(98%);10~20min,98%B→95%B;20~60min ,95%B→60%B;60~85min,60%B維持;流速為 0.8ml/min;進樣體積:20 μl;測定其中天麻素含量。結果云南昭通平均天麻素含量為0.51%,貴州大方為0.42%,四川江油為0.35%,甘肅康縣為0.27%。結論云南昭通所含天麻素含量較高。
中藥;天麻;天麻素;含量
天麻為蘭科植物天麻干燥塊莖,是一種名貴中藥材,始載于《神農本草經》,又稱赤箭、離母、定風草根、木浦、明天麻、冬麻、春麻等;根狀莖肥厚,無綠葉,在自然界中通常以塊莖或者是種子繁殖、生長,是多年生草本類植物;性甘味平,歸肝經。具有息風止痙、平抑肝陽、祛風通絡功效,用于小兒驚風、 癲癇抽搐、 破傷風、 頭痛眩暈、 手足不遂、 肢體麻木,風濕痹痛等神經系統疾病[1]。為進一步探討天麻的質量,本文于合法的藥材公司購買標示產地為四川江油、云南昭通、甘肅康縣、貴州大方的天麻各一批次若干,分別對天麻素含量進行測定。
WL-100高速粉碎機,R-1001N旋轉蒸發儀,WB-200水浴箱,1/100000天平,島津LC-20A 高效液相,甲醇(色譜級),乙腈(色譜級),超純水機(自制),磷酸(分析級);天麻素對照品(成都曼斯特生物科技有限公司,純度>99.5%)天麻藥材選擇云南昭通,四川江油,甘肅康縣,貴州大方幾個主要天麻產區樣品,經副主任中藥師鑒定為蘭科植物天麻。
2.1 色譜條件 色譜柱:YMC-Triart C18 色譜柱(4.6mm× 250mm,5 μm);檢測波長:220 nm;柱溫為 30℃;流動相:0.05%磷酸水溶液(B)-甲醇(A)梯度洗脫,0~10min,B(98%);10~20min,98%B→95%B;20~60min,95%B→60%B;60~85min,60%B維持;流速為 0.8ml/min;進樣體積:20 μl。
2.2 供試品及樣品制備
2.2.1 標準品 精密稱取天麻素標準品適量于10ml容量瓶中,加流動相稀釋至刻度,得到濃度為51.2 μg/L天麻素對照品。
2.2.2 供試品制備 精密稱取干燥天麻樣品,粉末(過三號篩)3 g,加入50ml 60%甲醇,50℃超聲提取 60min,補足缺失的重量,過濾,取續濾液 10ml 濃縮至近干,加流動相溶解后定容至 25ml容量瓶中,搖勻,過0.45 μm 微孔濾膜,即得。
2.3 標準曲線的繪制 取天麻素對照品溶液,分別稀釋1、2、 4、 8、 10后,參照“2.1項”檢測條件進行測定,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,進行線性擬合,得到天麻素的線性方程是:y=235.5A1-254.3(r=0.9995),線性范圍為 5.12~51.2 μg/L。
2.4 精密度檢測 取對照品溶液,對照溶液進樣量10 μl,連續進樣6次,測定峰面積,測定吸光RSD為1.34%,符合標準規定,可見儀器精密度良好。
2.5 重復性 精密稱取同批號粉碎過篩(40目)的天麻樣品6份,參考“2.2.2項”處理樣品后,制作供試品共6份,按照“2.1項”檢測條件進行檢測,結果對應RSD為1.47%(<2.00%),符合標準規定,因此具有良好的重復性。
2.6 穩定性試驗 取樣品溶液與對照品溶液,分別在0、2、4、8、16、24 h密量取20 μl注入分析儀器,進樣測定,兩組溶液峰面積的RSD為1.3%(<2.0%),符合標準規定。結果表明對照品和供試品溶液至少在24 h內基本穩定。
2.7 回收率實驗 準確稱取6份樣品,粉碎過篩(40目),0.5 g/份,然后加相應的標準溶液,進行定容。按照“2.1項”檢測條件進行檢測,得到回收率。測定結果表明:平均回收率分別是102.13%,RSD分別是1.07%。
2.8 樣品中天麻素測定 參照“2.2.2項”上供試品制作方法及“2.1項”相關檢測條件,對各批次樣品中 天麻素含量進行測定。
含云南昭通平均天麻素含量為0.51%,四川江油平均天麻素含量為0.35%,貴州大方為0.42%,甘肅康縣為0.27%。
天麻早在《神農本草經》中就有記載,將其稱之為“赤箭”,至明代,李時珍的《本草綱目》則集以往之大成,對天麻等作了系統概述[2]。天麻在自然界的形態特征具體表現在植株高30~100cm,此類植物根狀莖肥厚,塊莖狀橢圓形至近啞鈴形,長8~12cm,直徑3~7cm,具有較密的節,一般生長在疏林下,林中空地,灌叢邊緣或海拔400~3200 m位置[3],分布于我國各個領域。目前以云南昭通天麻中天麻素含量最高,質量更優。
本文以天麻有效成分天麻素為例對不同來源的天麻含量進行測定結果顯示,云南昭通天麻中天麻素平均含量0.51%,與上述結論基本相符。臨床使用天麻時,必須要保證藥材符合質量標準,并結合患者的體質應用,確保用藥的合理性和安全性,避免藥物風險事件的發生。
[1]杜慶波.天麻藥理活性與臨床應用研究新進展.齊齊哈爾醫學院學報,2013,34(16):2434-2435.
[2]龔其海,石京山,楊丹莉,等.天麻素在中樞神經系統的藥理作用及其機制.中國新藥與臨床雜志,2011(3):176-179.
[3]李穎,毛瑞陽,杜曉紅.天麻素對同型半胱氨酸誘導的細胞因子表達的影響.中華中醫藥學刊,2014,32(2):393-395.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.09.217
2016-02-29]
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