2型糖尿病腎病患者血清25羥維生素D3變化及其與腎功能指標、炎性因子的相關性

曹清清，葛欣聯，王綿，馬敏

第一中心醫院內分泌科，馬敏現就職于石家莊市第四醫院內科)；河北醫科大學第二醫院內分泌科(王綿)

作者單位： 050031　石家莊，河北醫科大學第二醫院內分泌科研究生(曹清清現就職于故城縣醫院內分泌科，葛欣聯現就職于保定市

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2型糖尿病腎病患者血清25羥維生素D3變化及其與腎功能指標、炎性因子的相關性

曹清清，葛欣聯，王綿，馬敏

第一中心醫院內分泌科，馬敏現就職于石家莊市第四醫院內科)；河北醫科大學第二醫院內分泌科(王綿)

【摘要】目的探討2型糖尿病腎病患者血清25羥維生素D3[25-(OH)D3]與腎功能指標及高敏C反應蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)等炎性因子的相關性。方法收集2012年8月—2013年12月2型糖尿病患者64例為糖尿病組，根據尿白蛋白排泄率(UAER)分為單純糖尿病亞組(A組，22例)、早期糖尿病腎病亞組(B組，21例)、臨床糖尿病腎病亞組(C組，21例)；另取健康體檢者23例作為健康對照組。比較各組患者血清25-(OH)D3、UAER、BUN、SCr、hs-CRP、TNF-α、IL-6 的變化，并分析各組血清25-(OH)D3與腎功能指標、炎性因子的相關性。結果糖尿病組患者血清25-(OH)D3低于健康對照組，UAER、BUN、SCr、hs-CRP、TNF-α及IL-6明顯高于健康對照組，差異均有統計學意義(P<0.05，P<0.01)。與A組比較，B組、C組的血清25-(OH)D3明顯降低，SCr、BUN、hs-CRP、TNF-α及IL-6均明顯升高(P<0.05)；與B組比較，C組患者的血清25-(OH)D3明顯降低，SCr、BUN、hs-CRP、TNF-α及IL-6明顯升高(P<0.05)。Pearson相關分析結果表明，25-(OH)D3與UAER、BUN、SCr、hs-CRP、TNF-α、IL-6等均呈負相關(r=-0.627、-0.698、-0.669、-0.694、-0.697、-0.702，P均<0.05)。結論糖尿病腎病患者血清25-(OH)D3水平降低，炎性因子升高，聯合監測二者可作為糖尿病腎病的早期監控和病變程度評估指標。

【關鍵詞】糖尿病，2型；糖尿病腎病；25羥維生素D3；炎性因子

2型糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一種常見的慢性疾病，糖尿病患者長期高血糖會誘發一系列并發癥，如大血管及微血管并發癥，其中糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病最常見的微血管并發癥[1]。糖尿病腎損傷的機制十分復雜，與炎性反應、氧化應激等多種因素有關，近年研究發現維生素D缺乏與糖尿病及慢性并發癥也有一定關系[2，3]。白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)是經典的炎性因子，而C-反應蛋白(C-reactive protein, CRP)是近年新發現的炎性反應標志物，超敏C反應蛋白(hs-CRP)是CRP的一種敏感檢測形式[4]，本研究通過檢測血清25羥維生素D3[25-(OH)D3]、hs-CRP、TNF-α以及IL-6水平，了解糖尿病腎病患者血清25-(OH)D3與hs-CRP、TNF-α以及IL-6的關系，借此探討其臨床意義，報道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料收集2012年8月—2013年12月收治的2型糖尿病患者64例，均符合1999年WHO制定的DM診斷和分型標準[5]，排除1型糖尿病、妊娠、糖尿病急性并發癥、感染、急性心腦血管疾病、嚴重肝損傷及非糖尿病腎病患者。根據尿白蛋白排泄率(UAER)，將64例糖尿病患者分為3個亞組：單純糖尿病亞組(A組)22例(UAER <20 μg/min)，其中男10例，女12例，平均年齡(51.4±13.1)歲；早期糖尿病腎病亞組(B 組)21例(20 μg/min≤UAER ≤200 μg/min)，其中男11例，女10例，平均年齡(49.9±12.5)歲；臨床糖尿病腎病亞組(C組)21例(UAER>200 μg/min)，其中男9例，女12例，平均年齡(52.1±12.7)歲。另納入我院體檢中心健康體檢者23例作為健康對照組，其中男12例，女11例，平均年齡(50.6±11.3)歲。糖尿病組與健康對照組在性別、年齡等資料方面比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會批準，入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2檢測指標與方法全部受試者禁食10～12 h后采集靜脈血2 ml，3 000 r/min離心15 min分離上清液，待測。(1)血清25-(OH)D3測定：采用電化學發光法檢測，使用美國Roche 公司Cobas E601 電化學發光分析儀，試劑盒購自美國Roche 公司，嚴格按照試劑盒說明書操作。(2)腎功能指標(UAER、BUN、SCr)測定：UAER的測定采用液相平衡競爭放射免疫分析法(RIA)進行測量，留取24 h尿液(需排除存在泌尿系感染的患者)，記錄尿量，尿液混勻后取約20 ml送檢，標本收集好后使用白蛋白(Alb)放免藥盒；BUN、SCr采用全自動生化儀測定。(3)炎性因子(hs-CRP、TNF-α、IL-6)測定: hs-CRP使用顆粒增強免疫透射比濁法，試劑盒購自北京利德曼生化公司，均按試劑盒說明書進行；血清TNF-α和IL-6采用ELISA法測定，試劑盒由北京晶美生物工程公司提供。所有操作嚴格按說明書進行，所用的酶標儀產自瑞士帝肯公司(Rainbow 型)，由專人操作，自動打印結果。

2結果

2.1糖尿病組與健康對照組血清25-(OH)D3、腎功能指標、炎性因子的比較與健康對照組相比，糖尿病組的血清25-(OH)D3降低，而UAER、BUN、SCr、hs-CRP、TNF-α及IL-6明顯升高，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。見表1。

2.2糖尿病患者3個亞組血清25-(OH)D3、腎功能指標、炎性因子的比較與A組相比，B組、C組患者SCr、BUN、hs-CRP、TNF-α及IL-6水平均明顯增加，血清25-(OH)D3明顯降低，差異具有統計學意義(P<0.05)；與B組相比，C組患者的SCr、BUN、hs-CRP、TNF-α及IL-6水平明顯增加，血清25-(OH)D3明顯降低，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表1　糖尿病組與健康對照組血清25-(OH)D3、腎功能指標、炎性因子比較　±s)

表2　糖尿病患者3個亞組血清25-(OH)D3、腎功能指標、炎性因子比較　±s)

2.325-(OH)D3與腎功能指標、炎性因子的相關性分析Pearson相關性分析表明，25-(OH)D3與UAER、BUN、SCr、hs-CRP、TNF-α、IL-6均呈負相關(r=-0.627、-0.698、-0.669、-0.694、-0.697、-0.702，P均<0.05)。

3討論

糖尿病微血管并發癥是糖尿病的特異性慢性并發癥，糖尿病腎病是特征性微血管并發癥之一，發病率高達20%~40%[1]。目前仍然根據尿Alb計算的UAER作為糖尿病腎病的分期標準，但近年來采用尿白蛋白/尿肌酐比值作為評價早期糖尿病腎損傷也已經得到公認。糖尿病腎病的發病機制復雜，與遺傳易感性、 糖脂代謝紊亂、 腎小球血流動力學改變及炎性反應和氧化應激等有關。其中，慢性炎性反應在糖尿病及其慢性并發癥中的作用得到越來越多的關注[4，5]，而炎性狀態和糖尿病腎病發生發展之間的關系復雜, 包括趨化因子、前炎性細胞因子和黏附分子在內的不同炎性因子都參與其中[5]，其中hs-CRP、TNF-α及IL-6是經典的炎性因子，在糖尿病腎病的發生中起了非常重要的作用，本研究觀察了上述3個炎性指標與糖尿病腎病之間的關系。

近年的研究發現，維生素D的缺乏與慢性炎性反應共同參與了糖尿病及糖尿病腎病的發生[6]，如果補充外源性維生素D，可以降低尿蛋白，改善炎性狀態，保護腎臟功能[7]。1，25-(OH)2D3是維生素D的活性形式，但1，25-(OH)2D3極不穩定、代謝較快，故臨床上多檢測25-(OH)D3反映維生素D3的表達水平[8]。25-(OH)D3是維生素D代謝的中間產物，在血中濃度高、 半衰期長、 穩定性好，是臨床上用來衡量維生素D儲存狀態的最佳指標。本研究測定了血清25-(OH)D3來代表機體維生素D水平。經研究發現：糖尿病組血清25-(OH)D3明顯低于健康對照組，根據尿白蛋白進行分組后發現，早期糖尿病腎病亞組血清25-(OH)D3低于單純糖尿病亞組，而臨床糖尿病腎病亞組血清25-(OH)D3低于早期糖尿病腎病亞組，說明血清25-(OH)D3水平隨尿白蛋白的升高而逐漸下降，血清25-(OH)D3水平與UAER呈負相關(r=-0.627)，與其他研究結果一致[8~11]。

對炎性指標hs-CRP、TNF-α及IL-6的研究發現，糖尿病組hs-CRP、TNF-α及IL-6明顯高于健康對照組，早期糖尿病腎病亞組hs-CRP、TNF-α及IL-6升高更明顯，而臨床糖尿病腎病亞組則最高，高于早期糖尿病腎病亞組。進一步進行相關分析發現，3個炎性指標與25-(OH)D3水平均呈負相關。提示維生素D缺乏可能通過對炎性指標的影響而作用于腎臟，影響腎臟功能，加重腎損害[12]。而補充維生素D3可以降低炎性因子，保護腎臟功能，減輕腎損傷[7，13]。有研究證實1，25-(OH)2D3具有抑制IL-1、 IL-6、TNF-α等遞質的作用，抑制炎性因子分泌，減輕腎小球病理改變，保護腎功能[14]。

本研究結果顯示，單純糖尿病亞組、早期糖尿病腎病亞組和臨床糖尿病腎病亞組中25-(OH)D3呈現逐漸減低的趨勢，而hs-CRP及經典的炎性因子TNF-α和IL-6呈現逐漸升高的趨勢，而且在腎損害的早期就表現出顯著的改變，并且隨著腎臟損傷程度的加重而逐漸升高，說明血清25-(OH)D3和炎性因子hs-CRP、 TNF-α及IL-6水平的檢測可用于糖尿病腎損害早期的篩查和功能損傷程度的監控。

綜上，本研究顯示2型糖尿病腎病患者血清25-(OH)D3水平降低，并與腎功能指標、hs-CRP、 TNF-α及IL-6存在相關性，聯合監測血清25-(OH)D3和炎性因子有利于糖尿病患者腎功能損害的早期診斷，對于糖尿病腎病的早期防治具有重要的臨床意義。

參考文獻

1中華醫學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南(2013版)[J].中華糖尿病雜志, 2014,6(7): 447-98.

2Cangoz S, Chang YY, Chempakaseril SJ, et al.Vitamin D and type 2 diabetes mellitus[J].J Clin Pharm Ther，2013，38(5):81-84.

3Usluogullari CA, Balkan F, Caner S, et al. The relationship between microvascular complications and vitamin D deficiency in type 2 diabetes mellitus[J].BMC Endocr Disord，2015，15(1):33.

4Esser N, Legrand-Poels S, Piette J, et al.Inflammation as a link between obesity, metabolic syndrome and type 2 diabetes[J].Diabetes Res Clin Pract，2014,105(2):141-50.

5陳白帆, 任建功. 糖尿病腎病發病機制中各種炎性因子的作用[J].醫學綜述, 2012, 18(5): 47-749.

6Guadarrama-López AL, Valdés-Ramos R, Martínez-Carrillo BE. Type 2 diabetes, PUFAs, and vitamin D: their relation to inflammation[J].J Immunol Res，2014:860703.

7朱晗玉, 張冬, 耿文佳,等. 1,25-二羥維生素D3治療對早期糖尿病腎病相關炎性因子的影響[J].中華實用診斷與治療雜志，2012,26(1):12-14.

8褚建平, 郭瑞, 呂定豐, 等. 新診斷 2 型糖尿病與糖尿病腎病患者血清25(OH)D3的變化及意義[J].中國中西醫結合腎病雜志, 2012, 13(8C):715-717.

9谷麗娟, 劉建萍. 2 型糖尿病腎病患者血清 1, 25-二羥維生素 D3與腎功能指標的相關性研究[J].山東醫藥,2012，52(33):15-17.

10趙相卓, 劉維, 邱明才. 糖尿病腎病患者血清25-羥維生素D3變化及意義[J].山東醫藥, 2013, 53(17): 43-45.

11張士榮, 時照明, 張曉梅, 等. 25-羥維生素D3水平與 2 型糖尿病腎病的相關性研究[J].蚌埠醫學院學報, 2014, 39(11):1470-1472.

12段曉星，常永麗,智淑清.早期糖尿病腎病患者1，25-(OH)2 D3及炎性因子的變化及骨化三醇膠丸的干預作用[J].疑難病雜志，2014，13(4)：378-380.

13Zhao J, Dong J, Wang H,et al.Efficacy and safety of vitamin D3in patients with diabetic nephropathy: a meta-analysis of randomized controlled trials[J].Chin Med J (Engl)，2014，127(15):2837-2843.

14Gandhe MB, Jain K, Gandhe SM, et al. Evaluation of 25(OH) vitamin D3with reference to magnesium status and insulin resistance in T2DM[J].J Clin Diagn Res, 2013, 7(11):2438-2441.

罕少見病例

論著·臨床

Serum levels of 25 hydroxy vitamin D3in patients with type 2 diabetic nephropathy and its correlation with renal function and inflammatory factorsCAOQingqing*,GEXinlian,WANGMian,MAMin.*GraduateofDepartmentofEndocrinology,SecondHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050031,China

Correspondingauthor:WANGMian,E-mail:wangmian66@sina.com

【Abstract】ObjectiveTo investigate the correlation of serum 25 hydroxy vitamin D3[25-(OH) D3] and indices of renal function and high sensitive C reactive protein (hs-CRP), tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interleukin 6 (IL-6) inflammatory factor in patients with type 2 diabetic nephropathy.MethodsFrom August 2012 to December 2013, 64 patients with type 2 diabetes mellitus were divided into simple diabetic group (A group, 22 cases) and early diabetic nephropathy group (B group, 21 cases) and clinical diabetic nephropathy group (C group, 21 cases). Another 23 cases of healthy people were enrolled as the control group. Serum 25-(OH) D3, UAER, BUN, SCr, hs-CRP, TNF-α, IL-6 changes were compared, and correlation between serum 25-(OH) D3and indices of renal function and inflammatory factor were analyzed.ResultsIn diabetic patients, the serum 25-(OH) D3was lower than healthy control group, UAER, BUN, SCr, hs-CRP, TNF-α and IL-6 were significantly higher than that of healthy control group, the differences were statistically significant (P<0.05 and P<0.01). Compared with group A, group B and group C’s serum 25-(OH) D3decreased significantly,SCr, BUN, hs-CRP, TNF-α and IL-6 were significantly increased (P<0.05). Compared with group B, group C’s serum 25-(OH) D3decreased significantly,SCr, BUN, hs-CRP, TNF-α and IL-6 were obviously higher(P<0.05). Pearson correlation analysis showed that 25-(OH) D3and UAER, BUN, SCr, hs-CRP, TNF-α, IL-6 showed a negative correlation (r=-0.627,r=-0.698,r=-0.669,r=-0.694,r=-0.697,r=-0.702, all P<0.05).ConclusionSerum 25-(OH) D3levels decreased in patients with diabetic nephropathy, and inflammatory factor was elevated, joint monitoring can be used as the〗 early monitoring and severity evaluation indexes for diabetic nephropathy.

【Keywords】Diabetes mellitus,type 2; Diabetic nephropathy; 25 hydroxyvitamin D3; Inflammatory factor

收稿日期：(2015-06-18)

【DOI】10.3969 / j.issn.1671-6450.2015.12.011

通信作者：王綿，E-mail:wangmian66@sina.com

作者單位： 050031石家莊，河北醫科大學第二醫院內分泌科研究生(曹清清現就職于故城縣醫院內分泌科，葛欣聯現就職于保定市