菵草對(duì)3種ACCase抑制劑抗性的瓊脂快速檢測(cè)方法建立

鄒紅梅， 李香菊， 崔海蘭， 何　林

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193；2.西南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，重慶 400715)

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菵草對(duì)3種ACCase抑制劑抗性的瓊脂快速檢測(cè)方法建立

鄒紅梅1，2， 李香菊1， 崔海蘭1， 何林2

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193；2.西南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，重慶 400715)

摘要：以菵草的1個(gè)敏感種群和2個(gè)抗藥性種群為試材，在用整株測(cè)定法明確其對(duì)精唑禾草靈、高效氟吡甲禾靈、炔草酯3種ACCase抑制劑抗性水平的基礎(chǔ)上，采用瓊脂法，以新根率為指標(biāo)篩選出3種藥劑對(duì)抗性菵草的檢測(cè)濃度。結(jié)果表明，整株測(cè)定法和瓊脂法具有很好的相關(guān)性，通過(guò)瓊脂法能夠檢測(cè)菵草對(duì)3種ACCase抑制劑的抗性，精唑禾草靈檢測(cè)濃度為 0.4 μmol/L，高效氟吡甲禾靈檢測(cè)濃度為0.2 μmol/L，炔草酯檢測(cè)濃度為0.4 μmol/L，3種除草劑的最快檢測(cè)時(shí)間為4 d。

關(guān)鍵詞：菵草；ACCase抑制劑；抗性；快速檢測(cè)

1材料與方法

1.1材料

供試菵草種群的采集地點(diǎn)及相關(guān)信息見(jiàn)表1。

表1　不同菵草種群的采集信息

1.2方法

1.2.1菵草不同種群對(duì)3種除草劑抗性水平的整株測(cè)定菵草幼苗的準(zhǔn)備：將壤土與有機(jī)肥料按 3 ∶1 混合均勻，裝于直徑為9 cm的塑料盆缽內(nèi)備用。用0.1%GA3浸泡菵草種子12～24 h，打破休眠，用清水反復(fù)清洗后均勻播種在事先準(zhǔn)備好的盆缽中，均勻覆土，置于溫室條件下培養(yǎng)，白天溫度20～27 ℃，夜間溫度12～17 ℃，培養(yǎng)期間按需澆水。待菵草生長(zhǎng)至2～3葉期，間苗，每盆保留生長(zhǎng)一致的植株10株。藥劑處理：根據(jù)預(yù)試驗(yàn)，設(shè)計(jì)每種藥劑的濃度梯度，每處理重復(fù)3次，詳見(jiàn)表2。噴霧壓力0.275 MPa，噴液量367.5 kg/hm2。

表2　不同藥劑的劑量設(shè)計(jì)

數(shù)據(jù)調(diào)查與分析：施藥21 d后，將菵草地上部分剪下，80 ℃烘干并稱其干質(zhì)量，計(jì)算干質(zhì)量抑制率，將干質(zhì)量抑制率和藥劑劑量進(jìn)行轉(zhuǎn)換，擬合回歸方程：

Y=b+kX。

式中：Y為概率值(將地上部分干質(zhì)量抑制率轉(zhuǎn)換成概率值)；b為截距；k為斜率；X為lg(藥劑劑量)。

根據(jù)上面的公式計(jì)算各種群的GR50值(GR50值表示在藥劑作用下，植物干質(zhì)量降低 50%時(shí)，所需要的藥劑劑量)，并根據(jù)下面公式計(jì)算抗藥性指數(shù)(resistance index，RI)

RI=抗性種群GR50/敏感種群GR50。

新根率=生長(zhǎng)新根株數(shù)/接種總株數(shù)×100%。

2結(jié)果與分析

2.1菵草不同種群對(duì)3種除草劑抗性水平的整株測(cè)定

表3　菵草不同種群對(duì)3種除草劑的抗性水平

2.2菵草對(duì)3種除草劑抗性的瓊脂法檢測(cè)

3個(gè)菵草種群在不含除草劑的瓊脂培養(yǎng)基中的新根率隨時(shí)間的變化情況見(jiàn)圖1。WC4#、WC5#、WC8#的對(duì)照組從培養(yǎng)2 d開(kāi)始就能夠觀察到新根發(fā)生，培養(yǎng)4 d新根率分別為26.67%、56.67%和6.67%，培養(yǎng)4～7 d新根率直線上升，培養(yǎng)7～11 d陸續(xù)達(dá)到最高，培養(yǎng)11 d新根率分別達(dá)到93.33%、100%和100%，培養(yǎng)12 d新根率不再增加，從地上部分已能觀測(cè)到?jīng)]有生長(zhǎng)新根的植株死亡。

3結(jié)論與討論

表4　各藥劑檢測(cè)濃度篩選

注：表中同列數(shù)字后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。

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Novel in-Season Agar Method for Detecting Resistance ofBeckmannia

syzigachneto Three Post-Emergence ACCase Inhibitor Herbicides

ZOU Hong-mei1，2， LI Xiang-ju1， CUI Hai-lan1， He Lin2

(1.Institute of Plant Protection，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100193，China；

2.College of Plant Protection，Southwest University，Chongqing 400715，China)

Abstract:The response to three ACCase inhibitors (fenoxaprop-P-ethyl，haloxyfop-R-methyl and clodinafop-propargyl) of a susceptible and two resistant populations of Beckmannia syzigachne were determined by conventional whole-plant pot bioassays. Resistance eas further assessed in an agar bioassay using the new root growth rate as the diagnostic variable. There was very good agreement between the whole-plant pot and the agar bioassays that clearly detected the resistant levels of B. syzigachne to the three ACCase inhibitors. The detectable concentrations of fenoxaprop-P-ethyl haloxyfop-R-methyl and clodinafop-propargyl by the agar test were 0.4，0.2，and 0.4 mmol/L，respectively. The quickest detection time of these herbicides was four days after treatment.

Key words:Beckmannia syzigachne；ACCase inhibitor；resistance；quick detection

通信作者：崔海蘭，博士，副研究員，從事雜草抗藥性研究，E-mail：cuihailan413@163.com；何林，博士，教授，從事雜草抗藥性研究，E-mail：helinok@vip.tom.com。

作者簡(jiǎn)介：鄒紅梅(1990—)，女，重慶人，碩士研究生，從事雜草抗藥性研究。E-mail：zhmei99@yeah.net。

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(編號(hào)：31371952)；公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(編號(hào)：201303031)。

收稿日期：2015-04-22

中圖分類號(hào)：S451

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1003-935X(2015)03-0024-05