異常黏液質證卵巢早衰及異常黑膽質證卵巢早衰模型建立及相關生殖指標比較

異常黏液質證卵巢早衰及異常黑膽質證卵巢早衰模型建立及相關生殖指標比較

屈亞琴， 瑪依熱·吐爾洪， 阿依古扎麗·艾麥提， 夏米西努爾·伊力克

(新疆醫科大學基礎醫學院生物學教研室， 烏魯木齊830011)

摘要:目的研究維醫異常黏液質與異常黑膽質型卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)病證大鼠模型的雌激素水平與生物學表征，為維醫治療POF病癥的研究提供依據。方法選用30只性功能正常的Wistar雌鼠，隨機分為異常黏液質證POF組(NP)、異常黑膽質證POF組(HP)以及正常對照組(N)，并分別建立異常黏液質證侯、異常黑膽質證侯,正常對照組正常環境飼養,對3組的相關生殖指標進行比較。結果異常黏液質、異常黑膽質均可導致POF發生，其主要雌激素水平檢測提示均存在卵巢早衰，即血清雌二醇(E2)下降,促卵泡激素(FSH)及促黃體生成素(LH)上升，且與HP組大鼠雌激素變化水平相比，NP組明顯更加符合卵巢早衰(P<0.05)；兩組癥候POF組大鼠在HE染色觀察卵巢病理學改變與正常組比較無明顯差異，解剖后卵巢、腎上腺組織重量明顯大于正常組大鼠，差異有統計學意義(P<0.05)。結論異常黏液質證更容易導致POF。

關鍵詞：異常黏液質； 異常黑膽質； 卵巢早衰

中圖分類號：R-332文獻標識碼：A

doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2015.04.007

[收稿日期：2014-11-12]

基金項目：國家自然科學基金(30660207)

作者簡介：阿衣古麗·哈熱(1974-)，女(維吾爾族)，碩士，副主任醫師，研究方向：腫瘤放化療。

基金項目：新疆維吾爾自治區高?？蒲许椖?20120420003707140)

作者簡介：劉玉(1973-),女,碩士，副主任醫師，研究方向：兒童血液病。

Premature ovarian failure rat models establishment in abnormal balgham and

abnormal savda and the comparative study on its reproductive index

QU Yaqin, Mayire Tuerhong, Ayiguzhali Aimaiti, Xiamixinuer Yilike

(CollegeofBasicMedicine,DepartmentofBiology,XinjiangMedicalUniversity,

Urumqi830011，China)

Abstract:ObjectiveTo study the estrogen levels and biological characterization of the premature ovarian syndrome rat models in abnormal balgham and abnormal savda in Uygur medicine for the research reference of the medical treatment for POF disorders. Method30 Wistar female rats were selected and divided randomly into POF Group (NP) with unusual mucus, POF Group (HP) with unusual savda and normal control group (N), and their syndromes were compared and analyzed in terms of the related reproductive indicators. ResultsUnusual mucus quality and unusual savda led to POF and the major estrogen levels suggested the premature ovarian failure, with the indicators of decreased serum levels of estradiol (E2), increased follicle stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH). The estrogen levels in NP group were more consistent with the syndromes of POF when compared with those in HP Group (P<0.05). There were no differences in HE staining and histological change in the ovarian pathology between NP/HP Group and N group. The weight of ovarian and adrenal glands were significantly greater than those of normal rats (P<0.05). ConclusionAbnormal mucus led to POF.

Key words: abnormal mucus quality; unusual savda; premature ovarian failure

卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)即女性在40歲之前出現4個月以上的持續閉經、生殖器官萎縮、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，FSH)及黃體生成素(luteinizing hormone，LH)水平升高、雌激素降低的一種內分泌性婦科疾病[1]。其發生率是正常成年女性的1%,閉經患者中POF的發生率為2%～10%[2]。維吾爾醫學認為卵巢功能紊亂與人體內異常的體液聚積有關。為闡明維醫臨床中異常黏液質證POF與異常黑膽質證POF的生物學基礎與發生、發展規律，本研究在建立異常黏液質與異常黑膽質癥候動物模型的基礎上，對異常體液所致的大鼠激素水平和生物學表征等的改變進行初步研究和綜合評價，現報道如下。

1材料與方法

1.1主要儀器RQH-350 型人工氣候箱(上海精宏實驗設備有限公司)， BS-1105 型電子天平(北京賽多科斯天平有限公司)。

1.2實驗動物通過陰道涂片篩選法(發情周期實驗)選取性成熟的30只健康 Wistar 雌性大鼠(由新疆醫科大學實驗動物中心提供)，體質量(150±30) g，穩定飼養3 d后,分為異常黏液質證POF組(NP組， 10只)、異常黑膽質證POF組(HP組，10只)以及正常對照組(10只)。

1.3實驗方法

1.3.1異常黏液質證POF組動物模型的建立[3]按照以往維吾爾醫學模型建立標準[3]，采用濕寒環境、濕寒飼料等因素作用建立維醫異常黏液質證POF動物模型并驗證。

1.3.2異常黑膽質證POF組動物模型的建立[4]采用干寒飼養環境、干寒屬性的飼料及間斷足底電刺激、游泳、制動等多因素復合作用，建立維吾爾醫學異常黑膽質證大鼠模型。

1.4觀察指標實驗模型組和正常對照組均隨機飲食、飲水，正常對照組于正常環境中飼養。模型建立過程中每日觀察大鼠生物學表征、體質量變化，依據生物學表征判定模型建立[3-4]后做相關雌激素水平檢測，并對其卵巢、下丘腦、垂體和腎上腺組織的稱重比較。

2結果

2.13組大鼠生物學表征比較NP組、HP組與N組生物學表征伴隨造模時間延長而加重(表1)。從培養第3周開始NP組體質量增長明顯大于HP組，除第5周外(P>0.05),其余各周差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.23組大鼠定量指標比較NP組FSH值(mIU/mL)明顯高于HP組，差異有統計學意義(t=4.02,P<0.05);而兩組LH、E2、PRL比較，差異無統計學意義(P>0.05),見表3。

2.33組大鼠卵巢各組織稱重比較NP組與NP組大鼠卵巢組織和腎上腺重量均顯著大于N組，其中NP組與N組卵巢組織重量比較差異有統計學意義(P<0.05),NP組與N組腎上腺重量比較差異有統計學意義(P<0.05)，其余各組差異無統計學意義(P>0.05)，見表4。

2.4電鏡觀察結果NP組與HP組卵泡閉鎖較N組增多，且間質增生異常明顯,NP組與HP組卵母細胞、透明帶均可見正常的超微結構。

表1　3組大鼠第21天生物學表征比較

表2　NP組與HP組大鼠各期體質量均值比較(g, ±s)

表3　NP組與HP組雌激素水平比較( ±s)

表4　3組大鼠各組織稱重比較(g, ±s)

3討論

卵巢早衰屬中醫“經水早斷”范疇[5]，近幾年來已成為威脅婦女身心健康的疑難疾病，對中西醫來說治療均相當棘手。臨床病因機致可見焦躁、易激惹或喜靜膽小、抑郁寡歡等精神癥狀，也多可出現納差等脾胃虛弱的表現[6]。根據卵巢早衰的前期研究[7]，從病因和模型雌鼠所表現的癥狀上來看，本研究中，異常黏液質證POF以及異常黑膽質證POF大鼠均表現出符合模型癥狀的各種表現，且隨著時間的延續而癥狀明顯加重。從體質量增長上來看，NP組大鼠在培養第3周后體質量增長明顯大于HP組大鼠，除第5周外(P>0.05)外，其余各周差異均有統計學意義(P<0.05)，這可能與HP組大鼠長期接受多因素復合作用的刺激有關。在有關行為學表征上，NP組大鼠體態松弛、懶散虛胖、遲鈍呆滯，而HP組大鼠則異常精干消瘦、過度活躍、神經緊張。這與帕提古麗·阿布拉[3]的描述一致。

維吾爾醫學認為, 人體中的物質型病變是由體內異常體液所致,其中黏液質的屬性是濕寒, 其以濕寒性屬性防止膽液質熱性屬性的過盛, 以寒性屬性調節血液質和膽液質的熱性屬性。黑膽質的屬性是干寒,其以干寒性屬性防止血液質濕熱性屬性的過盛, 以寒性屬性調節血液質和膽液質的熱性屬性。一旦破壞它們之間的相互作用關系,便會聚積產生另一種導致疾病產生的異常體液[3]。本研究在維吾爾醫學體液論基礎上重建了大鼠異常黏液質證POF和異常黑膽質證POF模型，并對2種癥候POF組大鼠的激素水平、生物學表征等進行了比較研究。實驗結果表明，異常黏液質證POF組大鼠與異常黑膽質證POF組大鼠相比，其主要雌激素水平檢測提示均存在卵巢早衰[8]，即血清雌二醇(E2)下降，促卵泡激素(FSH)及促黃體生成素(LH)上升，且與黑膽質證POF組大鼠雌激素變化水平相比，黏液質證POF組明顯更加符合卵巢早衰(P<0.05)；兩組癥候POF組大鼠在HE染色觀察卵巢病理學改變與正常組比較無統計學意義，解剖后卵巢、腎上腺組織重量明顯大于正常組大鼠，差異有統計學意義(P<0.05)，可能與卵巢早衰所導致的腎上腺球狀帶顯著增厚、細胞代償性增生、醛固酮的分泌增多有關[9]。而下丘腦、垂體組織稱重與正常對照組比較差異無統計學意義(P>0.05)。異常體液的模型由癥候到病證是一個漸進與發展的過程[10]。因此，本研究認為這可能與大鼠培養時間較短、激素水平的變化所導致生物學表征變化不明顯及大鼠本身生理特異性等諸多因素有關。

綜上所述，本實驗證明維吾爾醫學異常體液是可以導致POF發生的，在行為模式上異常黏液質證POF組主要表現為情緒低落、抑郁寡歡等精神癥狀，而異常黑膽質證POF組主要表現為易怒、焦慮不安等癥狀，且二者均有脾胃虛弱的表現；在激素水平上異常黏液質證POF組的變化更加符合其相關檢驗指標，由于造模時間限制，對于其發生發展的機制尚待進一步的研究加以證實。

參考文獻：

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[3]帕提古力·阿布拉.維吾爾醫體液學說的生理學意義探討[J].中國民族醫藥雜志,2008,6(3):13-14.

[4]哈木拉提·吾甫爾,阿依努爾·買提斯迪克，努爾買買提·艾買提，等.異常黑膽質證載體動物模型的建立及其自然恢復反證[J].新疆醫科大學學報，2006，29(10)：910-914.

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[10]阿地力江·伊明，范 強.維醫異常黏液質證候與陽痿病證大鼠性行為學改變的研究[J].中國男科學雜志,2011，25(9):20-23.

(本文編輯張巧蓮)

通信作者：張瑾熔，女，主任醫師，碩士生導師，研究方向：腫瘤放化療，E-mail：zjr8043@163.com。

·民族腫瘤學·

通信作者：嚴媚，女，主任醫師，教授，博士生導師，研究方向：兒童血液病，E-mail:yan10mei25@163.com。