IL-17F在口腔鱗狀細胞癌患者血清中的表達及意義*

李 兵，傅 堯，符義富，游麗萍，劉 暢(南京大學醫學院附屬口腔醫院檢驗科，南京 210008)

口腔鱗癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是頭頸部最常見的惡性腫瘤。研究發現中晚期OSCC術后5年生存率遠低于早期，而患者在被確診為OSCC時，大多已經處于中晚期階段[1]，因此尋找OSCC早期的篩選指標對于提高患者的生存和生活質量極為重要。IL-17F與IL-17A同屬IL-17家族，與哮喘、狼瘡和腫瘤等疾病相關。其功能上與家族最具代表性的IL-17A不完全相同。研究顯示，IL-17A的含量在頭頸部鱗癌患者血清中，明顯高于健康人[2]，而IL-17F在OSCC及白斑患者血清中的表達目前還少有研究。本文用ELISA方法檢測IL-17F在健康對照者、白斑和OSCC患者血清中的表達，并分析其與臨床病理參數的關系，探討其在OSCC發生發展中的作用及意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2014年10月～2015年5月本院白斑患者及OSCC患者血清標本分別為25例和80例，平均年齡分別為57.1±8.6歲和62.2±9.5歲。所有患者組織標本均經蘇木精-伊紅染色法檢測，由兩位資深病理專家獨立診斷，鏡下可見伴有上皮異常增生且上皮過度角化的為白斑(癌前病變)；鏡下可見鱗狀細胞癌巢，細胞間有細胞間橋，細胞異型性且常見較多核分裂相的為OSCC。排除接受過化療和放療的患者。另隨機收集無任何口腔病變的健康對照者33例，平均年齡53.5±10.3歲。血清標本收集經本院醫學倫理學委員會批準及研究對象的知情同意。

1.2 試劑與儀器 血清IL-17F含量ELISA測定試劑盒為美國瑞博奧公司產品，酶標儀(美國伯樂公司)。

1.3 方法 采集研究對象肘靜脈血3 ml，存于促凝管中，離心5 min取血清，存于1.5 ml Ep管中，于-80℃保存。白斑及OSCC患者均于手術前采血。按ELISA試劑盒說明書操作測定血清IL-17F含量。所有樣本均設復孔，顯色完畢用酶標儀450 nm波長檢測。

2 結果

2.1 各研究對象血清IL-17F的水平 健康對照者、白斑患者和OSCC患者血清中IL-17F的含量分別為202.2±31.5，168.2±17.4和65.1±7.2 pg/ml。OSCC患者血清IL-17F含量明顯低于白斑患者和健康對照者，差異均具有統計學意義(t=6.16，6.22，P<0.05)。白斑患者與健康對照者血清IL-17F含量無明顯變化，差異無統計學意義(t=0.85，P>0.05)。

2.2 OSCC患者血清中IL-17F表達水平與臨床病理參數的關系 見表1。分析OSCC患者血清中IL-17F的含量與年齡、性別、吸煙史、腫瘤大小、TNM分期、淋巴結轉移及腫瘤分化程度等臨床病理參數的關系，結果顯示，OSCC患者血清IL-17F含量與TNM期明顯相關，差異有統計學意義(P<0.05)，與年齡、性別、吸煙史、腫瘤大小、淋巴結轉移及腫瘤分化程度無明顯相關(P>0.05)。

表1 IL-17F的表達與OSCC臨床病理參數的關系

2.3 血清IL-17F含量的診斷意義 見圖1。受試者工作特征曲線(ROC曲線)顯示：ROC曲線下面積為0.843，IL-17F含量可以作為健康人和OSCC患者的良好診斷指標(P<0.05)，其臨界值為37.84 pg/ml。

圖1 IL-17F的ROC曲線

3 討論

趨化因子是炎癥相關性腫瘤的主要決定因素。其家族是一個非常復雜的網絡，擁有大量的配體和受體，在相關癌癥中的生物學功能多種多樣。趨化因子影響腫瘤進展的多種途徑，包括：白細胞募集，血管新生，腫瘤細胞增殖和存活，侵入和轉移等[3]。IL-17F與IL-17A具有高度同源性，其在促進炎癥因子分泌及炎癥反應方面有類似的功能[4]。但有研究表明，在腫瘤相關血管生成方面，IL-17F和IL-17A存在不同的生物學功能。乳腺癌小鼠模型研究顯示，IL-17A在腫瘤組織高表達，由腫瘤浸潤淋巴細胞分泌，促使血管內皮細胞的遷移，進而加速腫瘤微血管的形成，利于腫瘤生長[5]。Pan等[6]人在非小細胞肺癌研究中發現，IL-17A可以誘導血管內皮生長因子的分泌，促進腫瘤血管生成，他們還發現患者血清IL-17A的水平與患者的生存率呈負相關。而肝癌和結腸癌動物模型研究顯示，IL-17F可以降低IL-6，IL-8，VEGF等促血管生成因子的表達，從而抑制腫瘤血管生成和腫瘤細胞的生長[7，8]。

本研究發現，IL-17F在OSCC患者血清中表達水平明顯低于健康對照者，TNM Ⅲ～Ⅳ期患者表達水平明顯低于TNM Ⅰ～Ⅱ期患者，提示IL-17表達與OSCC發生發展存在一定關聯，很可能是起抑制作用。對照上文IL-17F在動物模型中抑制腫瘤生長的研究結果，本研究可以為其提供臨床依據。同時我們發現白斑(癌前病變)患者血清IL-17F的表達水平與健康對照者相比，雖有降低，但差異無統計學意義，這可能與白斑的疾病進程有關，需要我們擴大樣本量，繼續研究。

我們通過ROC曲線分析發現，血清IL-17F含量可以作為一個很好的篩選指標，用于健康人和OSCC患者的早期篩查。對于OSCC患者的即時治療和術后生存率具有非常重要的意義。

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