血清CA125，HE4及ROMA指數對卵巢癌診斷價值的臨床研究*

邢瑞青，吳永昌，陳慧昱，張小寧，房 艷，秦 爽，彭道榮

(第四軍醫大學附屬西京醫院臨床實驗研究所，西安 710032)

卵巢癌是女性較為常見的一種惡性腫瘤，其發病率居婦科惡性腫瘤第三位，病死率居首位。由于本病發病隱匿，患者早期多無特異性臨床表現，約75%的患者確診時已屬晚期[1]。晚期卵巢癌不僅預后差，且5年生存率僅有20%～25%[2]，因此對卵巢癌的早期診斷至關重要。糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)是目前臨床廣泛應用于卵巢癌的臨床診斷，療效評估及病情監測的血清腫瘤標志物之一，但其診斷敏感度和特異度低。人附睪蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)是近年來發現的一種新型血清腫瘤標志物，與傳統卵巢癌腫瘤標志物CA125比較，其敏感度與特異度均有了較大程度的提升，尤其與CA125聯合檢測，能大大提高早期卵巢癌的檢出率[3]。但是，由于HE4水平受到諸多因素的干擾，臨床上提出了卵巢惡性腫瘤風險算法(ROMA)這一概念，通過納入HE4，CA125等綜合評估早期卵巢癌的風險性[4，5]。本文通過檢測患者血清HE4，CA125水平及計算ROMA指數，旨在探討血清CA125，HE4及ROMA指數對卵巢癌的臨床診斷價值，提高絕經前、后卵巢癌診斷的準確率。

1 材料與方法

1.1 研究對象

1.1.1 選擇2015年6月～2016年6月由第四軍醫大學第一附屬醫院收治入院并經術后病理證實確診為卵巢癌的患者307例，平均年齡44.01±16.41歲；卵巢囊腫患者271例，平均年齡42.03±12.81歲。健康對照組均來自本院健康體檢女性，隨機抽取289例，平均年齡42.13±13.82歲，納入者均無心、肝、肺等重要器官疾病，肝、腎功能均正常，無腫瘤家族史。患病組與健康對照組年齡經統計學分析差異無統計學意義，資料具可比性。

1.1.2 受檢者均于入院后第2天清晨空腹靜脈采血3～4 ml，3 000 r/min離心10 min，分離血清于-70℃凍存待測。對照組采集清晨空腹靜脈血3～4 ml，同樣按上述方法處理。所有標本均無乳糜及溶血。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑：CA125，HE4檢測試劑由瑞士羅氏公司提供。室內質控由伯樂公司提供。

1.2.2 主要儀器：瑞士羅氏Cobas E602 電化學發光免疫分析儀。

1.3 方法

1.3.1 應用瑞士羅氏E602電化學發光免疫分析儀及配套試劑對室內質控及樣本進行CA125，HE4的檢測。待質控在控后方進行患者樣本的檢測；所有操作，嚴格按照儀器的標準操作規程進行。

樣本檢測后，儀器可根據血清CA125和HE4值，并通過攜帶的卵巢癌風險預測模型(ROMA)分析軟件，自動計算輸出相應ROMA指數。ROMA指數計算公式：絕經前預測指數(PI)=-12.0+2.38×LN(HE4)+0.0626×LN(CA125)，絕經后預測指數(PI)=-8.09+1.04×LN(HE4)+0.732×LN(CA125)，LN表示自然對數，ROMA(%)=exp(PI)/[1+exp(PI)]×100%。

1.3.2 判定標準：CUTOFF值分別為：CA125>35.0 U/ml，HE4>82.9 pmol/L，Pre-ROMA>11.40%，Post-ROMA>29.9%為陽性。所有單項指標以超過正常參考值范圍上限為升高(即陽性)。

2 結果

2.1 卵巢癌、卵巢囊腫及健康對照組血清CA125，HE4水平和ROMA指數 見表1。

表1 卵巢癌、卵巢囊腫及健康對照組血清CA125，HE4水平和ROMA指數

卵巢癌分別與卵巢囊腫及健康對照組比較，血清CA125，HE4水平及ROMA指數各指標均顯著升高，差異均有統計學意義(均P<0.05)。

2.2 血清CA125，HE4和ROMA指數對卵巢癌診斷的敏感度、特異度、陽性預測值及陰性預測值比較 見表2。對絕經前卵巢癌診斷效能的比較中，Pre-ROMA指數的敏感度最高，達100%，與CA125，HE4相比，差異具有統計學意義(χ2=10.69，P<0.05)。HE4的特異度和陽性預測值最高，均為100%，與CA125，Pre-ROMA相比，差異具有統計學意義(χ2=19.74，11.05，P<0.05)。Pre-ROMA指數的陰性預測值最高，達100%，與HE4相比，差異有統計學意義(χ2=12.50，P<0.05)。

對絕經后卵巢癌診斷效能的比較中，CA125的敏感度和陰性預測值最高，分別為92.77%和93.62%，與HE4相比，差異均具有統計學意義(χ2=7.48，6.28，P<0.05)。HE4的特異度和陽性預測值最高，分別為92.78%和90.41%，與Post-ROMA相比，差異均具有統計學意義(χ2=7.34，6.05，P<0.05)。

表2 血清CA125，HE4和ROMA指數對絕經前、后卵巢癌診斷敏感度、特異度、陽性預測值及陰性預測值(%)

2.3 血清CA125，HE4和ROMA指數對卵巢癌診斷的ROC曲線分析 見圖1，2和表3，4。

表3 ROC曲線參數評價各指標

圖1 血清CA125，HE4和ROMA指數對絕經前卵巢癌診斷的ROC曲線分析

圖1與表3結果顯示，以卵巢囊腫和正常對照組為參照時，HE4和Pre-ROMA診斷卵巢癌的AUC分別為0.574，0.573，差異具有統計學意義(P<0.05)，而CA125則差異無統計學意義(P>0.05)。

表4 ROC曲線參數評價各指標對絕經后卵巢癌的診斷價值

圖2 血清CA125，HE4和ROMA指數對絕經后卵巢癌診斷的ROC曲線分析

圖2與表4結果顯示，以卵巢囊腫和正常對照組為參照時，HE4，Post-ROMA和CA125診斷卵巢癌的AUC由大到小分別為0.677，0.665及0.641，差異均具有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

卵巢癌是發生于卵巢表面體腔上皮和其下方卵巢間質的惡性腫瘤。其中以黏液性囊腺癌、漿液性腺癌、粒層細胞癌、惡性葉胎瘤、未分化癌等為多見。其特點是早期無自覺癥狀，發現晚，擴散快，療效差。目前，臨床對于卵巢癌的主要診斷手段包括血清腫瘤標志物及超聲檢查等。血清腫瘤標志物的檢測因其無創、方便且提示作用強而客觀等優勢，在腫瘤的診斷和療效監測中發揮重要的輔助作用。

CA125是臨床最常用的卵巢癌血清標志物，被認為是卵巢上皮癌尤其是漿液性腺癌的首選腫瘤標志物，其表達與卵巢癌的放生發展及消退密切相關[6]。本研究結果顯示，卵巢癌患者血清CA125水平顯著高于卵巢囊腫及正常對照組(P<0.05)。在臨床診斷價值方面，由于其他惡性腫瘤如胰腺癌、肺癌、乳腺癌等以及卵巢的良性病變、妊娠早期、子宮內膜異位癥時亦可出現CA125的異常升高，導致其在卵巢癌診斷中的特異度較差[7]。而本研究結果發現，相較與HE4和ROMA，CA125雖然對絕經前卵巢癌診斷的敏感度(68%)和特異度(81.37%)不高，但對絕經后卵巢癌的診斷CA125的敏感度和陰性預測值最高，分別為92.77%和93.62%，與HE4相比，差異具有統計學意義(P<0.05)。進一步的ROC曲線分析發現，以卵巢囊腫和正常對照組為參考，CA125對絕經前卵巢癌診斷的ROC AUC最小，為0.541，差異無統計學意義(P>0.05)；而對絕經后卵巢癌的診斷的ROC AUC為0.641，差異具有統計學意義(P<0.05)。由此可見，血清CA125對絕經后卵巢癌患者具有更高的敏感度和臨床診斷價值。

HE4由Kirchhoff等于1991年從人附睪遠端上皮細胞中分離出來，為WFDC2基因編碼的小的單鏈信號肽。HE4屬乳清酸性蛋白家族，是一種蛋白酶抑制劑，其結構特征為8個膀氨酸形成的四個二硫鍵橋。在人正常組織中，HE4主要在生殖道和近端氣管上皮中有表達，涎腺中也有較高表達，而正常卵巢組織中幾乎無表達；在惡性腫瘤組織中，卵巢惡性腫瘤常見高表達，而大多數非卵巢惡性腫瘤中不表達或低表達[8]。本研究中的血清檢測結果顯示，卵巢癌患者血清HE4水平顯著高于卵巢囊腫及正常對照組(P<0.05)。在臨床診斷價值方面，對絕經前卵巢癌診斷效能的比較中，HE4的特異度和陽性預測值最高，均為100%，與CA125，Pre-ROMA相比，差異具有統計學意義(P<0.05)；對絕經后卵巢癌診斷效能的比較中，HE4的特異度和陽性預測值亦最高，分別為92.78%和90.41%，與Post-ROMA相比，差異均具有統計學意義(P<0.05)。同時ROC曲線分析發現，以卵巢囊腫和正常對照組為參考，HE4對絕經前卵巢癌和絕經后卵巢癌診斷的ROC AUC均最大，分別為0.574和0.677(P<0.05)。可見，血清HE4對絕經前和絕經后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能；與CA125相比，HE4對卵巢癌的診斷具有更高的特異度。

但近年來，隨著對HE4研究的不斷深入，發現HE4的臨床應用存在一定的局限性。研究發現，當患者肝腎功能受損時，HE4的檢測結果容易受到較大的影響。此外，HE4的表達水平還受到女性經期的影響[9]。因此為進一步提高臨床診斷卵巢癌的準確性，有學者提出卵巢惡性腫瘤風險算法(ROMA)的概念。通過結合患者月經情況，并依據血清CA125和HE4水平，建立Logistic回歸模型，可用于卵巢癌發生風險的預測。本研究結果顯示，絕經前和絕經后卵巢癌患者ROMA指數均顯著高于卵巢囊腫及正常對照組(P<0.05)。在臨床診斷價值方面，對絕經前卵巢癌診斷效能的比較中，Pre-ROMA指數的敏感度最高和陰性預測值最高，均達100%，與CA125，HE4相比，差異具有統計學意義(P<0.05)；而對絕經后卵巢癌的診斷其敏感度高于HE4，而特異度低于HE4(P<0.05)。ROC曲線分析發現，以卵巢囊腫和正常對照組為參考，ROMA指數對絕經前卵巢癌和絕經后卵巢癌診斷的ROC AUC分別為0.573和0.665(P<0.05)。由此可見，HE4和CA125聯合檢測，并計算ROMA指數對絕經前和絕經后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能，尤其能大大提高單項HE4或CA125對絕經前卵巢癌的診斷敏感性和陰性預測價值。

綜上所述，相較與絕經前卵巢癌，血清CA125對絕經后卵巢癌患者具有更高的敏感度；血清HE4對絕經前和絕經后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能；與CA125相比，HE4對卵巢癌的診斷具有更高的特異度；HE4和CA125聯合檢測，并計算ROMA指數對絕經前和絕經后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能，尤其大大提高單項HE4或CA125對絕經前卵巢癌的診斷敏感度和陰性預測價值；三者聯合檢測有利于提高卵巢癌診斷的準確度。

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