ABO血型鑒定錯誤原因分析與質量控制方法

摘要：目的 總結探討血型鑒定的影響因素。方法 對226例健康體檢人群玻片法和試管法同時進行ABO血型鑒定。結果 兩種方法檢測結果不是完全相符，除AB型兩種方法檢測結果基本一致外，其他血型（A型、B型、O型）的人數存在一定差異。結論 在血型鑒定中，如果出現正反定型結果不相符時，應找到對血型鑒定造成影響的因素，針對因素，采取措施。

關鍵詞：血型鑒定；影響因素；質量控制

紅細胞的兩大血型抗原抗體系統是ABO血型系統和RH血型系統，這兩大系統在臨床輸血和遺傳學研究上的意義非常重要[1]。血型鑒定正確與否是保證安全輸血的前提。生理鹽水凝集法是臨床最常用ABO血型鑒定方法，有玻片法和試管法兩種方法。本文主要對ABO血型鑒定中最常見出現錯誤原因進行分析及質量控制方法。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2014年1月～6月我院226例健康體檢人群為研究對象，年齡20～28歲，平均年齡（24.3±3.7）歲。所有研究對象均無嚴重的傳染性疾病和血液疾病。

1.2標本采集 抽取EDTA抗凝血后在2h內完成血型鑒定操作。

1.3血型試劑 采用上海血液生物醫藥有限責任公司生產提供的ABO血型反定型用紅細胞試劑盒；抗A、抗B血型鑒定單克隆抗體購置于長春博徳生物技術有限公司[2]。

1.4鑒定方法 嚴格按照相關步驟方法進行操作。

1.5統計學方法 采用SPSS11.5統計軟件包進行相關數據處理，以均數±標準差（x±s）表示計量資料。采用頻數和率表示計數資料，采用χ2檢驗。

2 結果

見表1。

由表1可以看出，兩種方法對226名健康體檢患者的血型檢測結果基本上是一致的。其中O型人數占比率最多，B型、A型人數次之，AB血型人數占比率最少。除AB型血型兩種方法的檢測結果一致外，其他血型（A型血型，B型血型，AB型血型）的人數存在一定的差異。

3 討論

3.1紅細胞方面的原因 ①血型檢測時，因患者紅細胞懸液過濃或過淡，使反應不明顯，誤判為陰性反應。紅細胞懸液（5%）配制要準確，抗原抗體比例要適當；②被檢者的紅細胞受到細菌污染，暴露了紅細胞上的T抗原，被各型血清中正常存在的抗T活性的IgM凝集，引起假凝集；③防止冷凝集素干擾。在較低溫度條件下，冷凝集素能夠與標準紅細胞和自身紅細胞可產生凝集現象，凝集強度隨著溫度升高而減弱[3]。若血清中有高效價冷凝集素，可使用37℃生理鹽水對紅細胞進行洗滌，再進行血型鑒定，能排除因冷凝集對血型鑒定造成的干擾；④ABO亞型存在的干擾。在A抗原中主要為A1和A2，其他A亞型不多見，而B亞型通常比A亞型更少[4]；⑤某些患者腸道受到革蘭氏陰性桿菌感染而使紅細胞上獲得類B抗原，可與抗B標準血清出現假凝集；⑥某些白血病或惡性腫瘤患者由于紅細胞上抗原性減弱，與抗A、抗B標準血清不發生凝集反應而常被誤定為O型。

3.2分型血清方面的原因 ①自制抗A、抗B、和抗AB標準血清不符合條件。如標準血清效價太低、親和力不強造成定型不準確；②某些患者在疾病治療過程中輸用了高飛子血漿代用品，造成紅細胞聚集，引起假凝集；③血清中不規則抗體引起的干擾：如A2和A2B型患者內有抗A1抗體，能凝A1紅細胞。遇此情況可將紅細胞用生理鹽水洗滌后再試驗；④ABO血型抗體水平下降：某些疾病造成免疫球蛋白下降，血型抗體也下降甚至缺如，也是造成正反定型不符的重要因素；⑤受檢者血清中蛋白紊亂（高球蛋白血癥），或試驗時溫度過高，常引起紅細胞呈緡錢狀排列。可加等滲鹽水1滴混勻，可使紅細胞緡錢現象消失；⑥嬰幼兒及老年人血清中ABO抗體較弱，反定型時可出現不凝集或弱凝集；⑦某些疾病影響，使血清中球蛋白或纖維蛋白原增高，常引起假凝集。

3.3操作方面的原因是最常見的原因 ①玻璃試管不清潔，抗體試劑和生理鹽水受到細菌污染，可造成假陽性；②紅細胞與抗體試劑比例不對應、離心速度過大或過小、離心時間過長或過短，都可出現假陽性或假陰性；③忽略溶血現象（發現溶血應檢查鹽水是否等滲并將紅細胞洗滌后重配懸液）[5]；④人為原因引起標本張冠李戴、書寫錯誤、未加入或使用失效試劑等。

4 正反定型結果不一致解決辦法

遇到正反定型結果不一致時，首選重復試驗，如仍然正反定型不符則做以下試驗[6]：重新采集獻血員和受血者的新鮮標本，以糾正因污染或搞錯樣本造成的正反定型不符；多次洗滌被檢紅細胞和標準紅細胞，除去可引起意外陽性反應的血漿中或紅細胞保存試劑中的化學成分；用抗A1、抗AB檢測紅細胞；如懷疑血清中有抗A1，可用數份A2紅細胞標本進行檢驗；如果試驗結果未見凝集，應將正反試驗在室溫或4℃放置30min，用顯微鏡核實；若懷疑是由于抗原減弱造成的正反定型不符，可進一步做木瓜酶、直接抗人球蛋白、吸收放散試驗等加以鑒別。

綜上所述，血型鑒定是臨床輸血的首要問題，是每個住院患者都需要做的常規檢查項目之一，尤其是急需搶救和輸血的危重患者輸血前必須鑒定血型，科學的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件[7-8]。可根據經驗，找到對血型鑒定造成影響的因素，針對因素，采取措施，以免出現ABO血型的誤判，產生嚴重的輸血事故。

參考文獻：

[1]劉國霞，李晨旭.1033名學生ABO血型結果分析[J].中國現代醫學，2010，48（26）：138.

[2]王清云.血型鑒定正反定型結果不符原因分析[J].淮海醫藥，2009，10（6）：75.

[3]馬海峰.高效價自身冷抗體致血型正反定型不符1例[J].第三軍醫大學學報，2003，25（7）：591-592.

[4]鄒文濤，羅廣平等ABO血型亞型鑒定結果分析[J].中國熱帶醫學，2006，6（7）：1314.

[5]黃德明.現代醫學檢驗新技術與操作規程全書[M].合肥安徽文化音像出版社，2003：425.

[6]羅春麗，龔道元，張家忠.臨床檢驗基礎[M].3版.北京：人民衛生出版社，2010：106.

[7]律梅，朱炳華.血型鑒定錯誤原因分析[J].職業與健康，2008，24，（2）：196.

[8]張萍，陳荇.常規ABO血型鑒定錯誤原因分析[J].檢驗醫學與臨床，2009，6（1）：217.

編輯/哈濤