芪榆油紗布對大鼠創面愈合中bFGF表達的影響

摘要：目的 觀察芪榆油紗布對創面肉芽組織中bFGF表達的影響。方法 選取48只雄性3月齡SD大鼠背部全層皮膚切除建立大鼠模型，將其隨機分為三組，分別予凡士林、龍珠軟膏、芪榆油；分別對用藥3、7、12d后創面肉芽組織中bFGF 的表達情況、毛細血管的含量及創面愈合的時間進行檢測和觀察。結果 用藥第3d芪榆油紗布與龍珠軟膏組明顯差異，均明顯優于凡士林組，用藥第7d、12d時，芪榆油紗布組在bFGF的表達、毛細血管的含量及創面愈合情況略優于龍珠軟膏組，明顯優于凡士林組。結論 說明芪榆油紗布對bFGF的表達有顯著性的影響，換而言之即是芪榆油紗布通過bFGF為媒介對創面肉芽組織進行修復。

關鍵詞：芪榆油紗布；bFGF；創面愈合；RT-PCR；毛細血管；大鼠

1資料與方法

1.1實驗動物及分組 使用SD大鼠48只，體重180～200g，隨機分成三組，每組12只。

1.2造創模型 在無菌實驗室行皮膚切開造創手術：常規手術消毒，在大鼠背部近臀部側以脊柱為中心，分別向左右兩側旁開1cm處，作一與脊柱平行的切口，長2cm，深達肌層。創面自然止血，不包扎，不用藥，于無菌實驗室內單籠飼養，保持創口干燥，給予消毒食物及飲水。

1.3藥品 芪榆油紗布，龍珠軟膏，凡士林紗布。

1.4試劑 10%福爾馬林溶液，蘇木素-伊紅試劑盒， bFGF抗體試劑盒、逆轉錄試劑盒，超純RNA提取試劑盒、DNase 1、5x RNA Loading Buffe等。

1.5主要儀器 QL-902型渦旋振蕩儀， Centrifuge 5415D離心機， ABI7500熒光定量PCR儀，PCR儀等。

1.6常規病理組織學切片染色 4% 中性多聚甲醛緩沖固定液固定標本，常規脫水，包埋，切成5 m切片，HE染色，光鏡觀察。

1.7 bFGF表達的檢查方法 取1.0×1.0mm的新鮮肉芽組織放入盛有裂解液的專用epp試管中，放于4℃恒溫冰箱中保存，放到-80℃低溫冰箱中速凍，以防蛋白酶分解，待測分子生物學指標。運用RT-PCR方法來檢測三組病例用藥第7d創面肉芽組織中bFGF的表達水平。

1.8創面愈合時間檢查方法 創面愈合標準：即為創面完全上皮化所需時間；計算出每組創面愈合時間的均值，予SPSS19軟件對三組數據進行統計分析。

2結果

2.1 bFGFmRNA的表達比值統計 各組病例中bFGF經RT-PCR擴增后產物比值，芪榆油組略高于龍珠軟膏組，無明顯差異；芪榆油組明顯高于凡士林組，有顯著性差異，見表1。

3討論

bFGF為內源性生長因子，其對創面的愈合起到非常重要的調節作用。本文研究的結果表明，通過以上對用藥后肉芽組織中bFGF表達的測定，可以看出bFGF的高表達能夠使創面氧自由基的量減少、活性減弱，同時加速創面細胞內基質的合成、毛細血管生成、結締組織的形成，從而使機體和創面的抗感染能力提高來加速創面組織的恢復。創面肉芽組織缺血缺氧是限制創面修復的關鍵因素之一[1]；慢性難愈合創面往往都伴有血管的異常[2]。因為新生血管能夠提供充足的氧和營養，有助于細胞的增殖，肉芽組織是膠原沉積、改建的場所。因此，血管新生是創面修復過程中重要的一環。

研究證明方中黃芪能加速毛細血管的再生，補給創面修復必須的營養物質，提供相關的微量元素，促進成纖維細胞的增殖，激活巨噬細胞的再生等功能[3]。丹參外用可加快創面壞死組織清除，減輕組織水腫和炎癥反應，同時能促進成纖維細胞和上皮細胞生長。紫草與白芨通過刺激bFGF 表達使細胞分裂和增殖，加速上皮細胞增殖和創面上皮化， 提高成纖維細胞功能以促進彈性纖維和膠原纖維的合成， 并促進新生毛細血管的形成，加速新陳代謝和創面愈合。

大鼠用藥后肉芽組織中bFGF的表達均高于對照組，說明芪榆油膏能誘導加速內源性bFGF基因表達，芪榆油膏可以通過啟動長因子的分泌和刺激生長因子的增多而使這一過程增強，使愈合的速度和質量發生明顯變化，進而加速修復進程使創面愈合，可見芪榆油膏影響創面修復機制之一是通過bFGF介導的。

參考文獻：

[1]胡寅.創面密閉療法112例臨床分析[J].南京醫科大學學報，2003，23（2）：183.

[2]田建廣，夏照帆.創面敷料的研究進展[J]；解放軍醫學雜志，2003（05）.

[3]曹波，李紹堂，陳永杰，張利新，李志，鄧文玲.芪榆油紗布外敷對肛瘺術后創面的影響[J].上海中醫藥雜志，2008（08）.

編輯/孫杰