子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中Wilms基因、磷酸酶及張力蛋白同源蛋白和原癌基因C-MYC的表達(dá)及意義

子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中Wilms基因、 磷酸酶及張力蛋白同源蛋白和原癌基因C-MYC的表達(dá)及意義

張愛東焦健于海

(承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院臨床2教研室，河北承德067000)

摘要〔〕目的檢測子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中定位于X染色體上的Wilms基因(WTX)、磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)和原癌基因C-MYC表達(dá)及其臨床意義。方法107例子宮內(nèi)膜癌患者作為觀察組，留取臨床資料及術(shù)后的蠟塊組織。78例復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，78例增生期子宮內(nèi)膜組織作為正常對(duì)照組。三組均行免疫組化檢測，檢測WTX、PTEN和C-MYC的表達(dá)。結(jié)果三組中WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)的陽性率差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)的陽性率與腫瘤最大徑、肌層浸潤深度和Ki67的表達(dá)密切相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中WTX、PTEN和C-MYC的表達(dá)均未見明顯相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織WTX、PTEN低表達(dá)、C-MYC高表達(dá)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。三者間無明顯協(xié)同作用。

關(guān)鍵詞〔〕子宮內(nèi)膜癌；Wilms基因；磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)；C-MYC

中圖分類號(hào)〔〕R737.33〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

第一作者：張愛東(1979-)，女，碩士，講師，主要從事婦產(chǎn)科疾病研究。

子宮內(nèi)膜癌病變呈漸進(jìn)性進(jìn)展〔1〕。定位于X染色體上的Wilms基因(WTX)是近年來發(fā)現(xiàn)的首個(gè)定位在X染色體的抑癌基因，可以在一定程度上抑制腫瘤形成〔2，3〕。磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)是具有磷酸酯酶活性的抑癌基因，通過脫磷酸化作用調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，從而有效調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和發(fā)育〔4〕。原癌基因C-MYC對(duì)腫瘤進(jìn)展有促進(jìn)作用〔5〕。本研究觀察子宮內(nèi)膜癌WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)特征。

1資料與方法

1.1一般資料2011年6月至2013年12月我院診斷并行手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜樣腺癌的患者，均經(jīng)病理學(xué)確診，并符合WHO中的標(biāo)準(zhǔn)，共107例，年齡52～78歲，平均(63.7±5.8)歲。78例復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，年齡45～64歲，平均(54.3±5.2)歲。78例增生期子宮內(nèi)膜組織作為正常對(duì)照組，年齡34～52歲，平均(40.1±5.1)歲。

1.2WTX、PTEN和C-MYC檢測方法檢測用的WTX、PTEN和C-MYC蛋白均為濃縮液，抗體按不同比例稀釋后應(yīng)用免疫組化SP法行預(yù)實(shí)驗(yàn)，均經(jīng)病理學(xué)醫(yī)師觀察并選擇最理想的濃度用于正式實(shí)驗(yàn)檢測。應(yīng)用免疫組化SP法檢測WTX、PTEN和C-MYC的表達(dá)、DAB顯色，嚴(yán)格按說明書規(guī)定的步驟操作。

1.3WTX、PTEN和C-MYC結(jié)果判讀WTX和PTEN均以細(xì)胞質(zhì)中染成棕黃色且染色強(qiáng)度為中-強(qiáng)度為陽性。計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野，以陽性細(xì)胞<25%為陰性，以≥25%為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1三組WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)的比較正常對(duì)照組、對(duì)照組和觀察組中WTX、PTEN的表達(dá)有下降趨勢，C-MYC的表達(dá)具有升高趨勢。見表1。

2.2觀察組WTX、PTEN和C-MYC在不同臨床特征中的表達(dá)WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)陽性率與腫瘤最大徑、肌層浸潤深度、Ki67的表達(dá)密切相關(guān)。見表2。

2.3觀察組中WTX、PTEN和C-MYC的相關(guān)性WTX、PTEN和C-MYC之間均未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。

表1三組WTX、PTEN和C-MYC陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

組別nWTXPTENC-MYC觀察組10731(28.97)40(37.38)41(38.32)對(duì)照組7840(51.28)56(71.79)15(19.23)正常對(duì)照組7875(96.15)77(98.72)6(7.69)χ2值85.252677.177624.6463P值<0.0001<0.0001<0.0001

表2觀察組WTX、PTEN和C-MYC在不同臨床特征的陽性表達(dá)〔n(%)〕

臨床特征nWTXPTENC-MYC腫瘤最大徑 <5cm5125(49.02)32(62.75)9(17.65) ≥5cm566(10.71)8(14.29)32(69.57) χ2值19.032026.777126.7157 P值<0.0001<0.0001<0.0001肌層浸潤 <1/26726(38.81)33(49.25)11(16.42) ≥1/2405(12.50)7(17.50)30(75.00) χ2值8.422710.788836.3681 P值0.00370.0010<0.0001Ki67的表達(dá) <25%3724(64.86)28(75.68)5(13.51) ≥25%707(10.00)12(17.14)36(51.43) χ2值35.407635.428114.7224 P值<0.0001<0.00010.0001

3討論

子宮內(nèi)膜癌是由子宮內(nèi)膜發(fā)生的原發(fā)上皮性惡性腫瘤，通常伴有腺體分化、具有浸潤子宮肌壁及遠(yuǎn)處擴(kuò)散的潛能〔6〕。雌激素依賴性腫瘤占80%～85%，非雌激素依賴型占15%～20%。雌激素依賴性腫瘤級(jí)別低，主要是子宮內(nèi)膜樣腺癌。臨床特征為向腺體異型增生，形成背靠背、共壁及迷路樣結(jié)構(gòu)〔7〕。腫瘤進(jìn)展時(shí)具有明顯侵襲性，并且伴隨著較高的增殖活性。而病變進(jìn)展與多種癌相關(guān)基因和抑癌相關(guān)基因表達(dá)失調(diào)密切相關(guān)〔8〕。WTX單基因突變或失活可以引起有活性的X染色體異?！?〕。WTX可以通過改變?chǔ)?catenin蛋白的穩(wěn)定性，促進(jìn)β-catenin泛素化與降解，負(fù)向調(diào)節(jié)WNT信號(hào)通路，發(fā)揮腫瘤抑制的作用〔10〕。也有研究認(rèn)為WTX可以與WNT信號(hào)通路中其他蛋白形成復(fù)合物，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的分化〔11〕。朱水山等〔12〕研究認(rèn)為WTX不像多數(shù)染色體易位的腫瘤一樣，通過致癌融合基因發(fā)揮作用，而是通過X染色體和18號(hào)染色體之間的平衡而發(fā)揮抑癌作用。PTEN是首個(gè)發(fā)現(xiàn)的具有磷酸酯酶活性的腫瘤抑制基因〔13，14〕，其相關(guān)產(chǎn)物可以發(fā)揮磷酸酶活性，引起細(xì)胞內(nèi)第二信使去磷酸化，引起細(xì)胞凋亡的進(jìn)程改變，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖過程〔15〕。C-MYC是信號(hào)傳導(dǎo)通路的下游基因，可以與DNA結(jié)合，促進(jìn)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展〔16〕。也有研究認(rèn)為C-MYC在生理狀態(tài)下無轉(zhuǎn)錄活性，并表現(xiàn)出低水平或丟失的表達(dá)，當(dāng)C-MYC被異?；罨笸ㄟ^與相關(guān)的其他癌基因的協(xié)同作用，引起腫瘤細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化〔17〕。當(dāng)C-MYC過表達(dá)時(shí)，一些保護(hù)性通路的異常改變引起腫瘤細(xì)胞惡變及異型增生〔18〕。

本研究結(jié)果提示W(wǎng)TX、PTEN在子宮內(nèi)膜癌中呈抑癌基因的作用，C-MYC發(fā)揮癌基因的作用。WTX、PTEN和C-MYC的異常表達(dá)參與腫瘤的失控性增生、侵襲性生長及細(xì)胞的增殖過程。WTX、PTEN的丟失或下降使子宮內(nèi)膜的腺上皮細(xì)胞形成惡性轉(zhuǎn)變，此時(shí)細(xì)胞異型程度明顯增加，細(xì)胞增生活躍，腫瘤體積增加，對(duì)局部組織的破壞力增強(qiáng)。由于腫瘤的最大徑、肌層浸潤深度、Ki67的表達(dá)三種臨床特征均是臨床判斷腫瘤生物學(xué)行為和預(yù)后的重要指標(biāo)，因此WTX、PTEN和C-MYC異常表達(dá)在一定程度上可以反映腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后，即WTX和PTEN低表達(dá)、C-MYC高表達(dá)患者的預(yù)后差。WTX、PTEN和C-MYC三者的作用通路可能不相同。有觀點(diǎn)認(rèn)為WTX可以通過與WT1相結(jié)合或具有協(xié)同作用，來促進(jìn)WT1介導(dǎo)的內(nèi)源性靶基因雙調(diào)蛋白轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞分化的核轉(zhuǎn)錄調(diào)控通路中起核心作用〔19〕。PTEN與改變腫瘤細(xì)胞的黏附性及調(diào)節(jié)腫瘤的血管生成有關(guān)，同時(shí)對(duì)細(xì)胞增殖起到重要抑制作用〔20〕。也有學(xué)者認(rèn)為PTEN在作用過程中可能與多種中介蛋白產(chǎn)生協(xié)同調(diào)節(jié)作用〔21，22〕。

4參考文獻(xiàn)

1莫秋榮，梁科慶，農(nóng)勤高，等.子宮內(nèi)膜癌中c-myc和cyclin E的表達(dá)及臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學(xué)雜志，2013；18(11)：986-9.

2李思齊，張毅，梁道明，等.抑癌基因WTX在結(jié)腸癌中的表達(dá)及其意義〔J〕.中國普通外科雜志，2012；21(10)：1217-9.

3張慶玲，于莉娜，丁彥青.新抑癌基因WTX在腎腫瘤中的表達(dá)及意義〔J〕.廣東醫(yī)學(xué)，2011；32(10)：1253-5.

4Ge H，Cao YY，Chen LQ，etal.PTEN polymorphisms and the risk of esophageal carcinoma and gastric cardiac carcinoma in a high incidence region of China〔J〕.Dis Esophagus，2008；21(5)：409-15.

5Kim JY，Valencia T，Abu-Baker S，etal.c-Myc phosphorylation by PKCζ represses prostate tumorigenesis〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA，2013；110(16)：6418-23.

6Zhang L，Wan Y，Jiang Y，etal.Upregulation HOXA10 homeobox gene in endometrial cancer：role in cell cycle regulation〔J〕.Med Oncol，2014；31(7)：52-3.

7Woo YL，Cheah PL，Shahruddin SI，etal.The immunohistochemistry signature of mismatch repair(MMR) proteins in a multiethnic Asian cohort with endometrial carcinoma〔J〕.Int J Gynecol Pathol，2014；33(6)：554-9.

8Kalogiannidis I，Petousis S，Bobos M，etal.HER-2/neu is an independent prognostic factor in type I endometrial adenocarcinoma〔J〕.Arch Gynecol Obstet，2014；290(6)：1231-7.

9陳可緒，王啟名，黃怡哲，等.穩(wěn)定表達(dá)新抑癌基因WTX的胃癌BGC-823/WTX-EGFP細(xì)胞株的建立〔J〕.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011；31(3)：392-4.

10黃山，黃帆，遇呈祥，等.老年骨肉瘤患者術(shù)后組織中VEGF、WTX和PTEN的表達(dá)及意義〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2013；33(11)：2660-1.

11覃創(chuàng)，陳嘉勇，染道明.WTX基因在腫瘤中的研究進(jìn)展〔J〕.重慶醫(yī)學(xué)，2012；41(5)：502-4.

12朱水山，龔輝，郭宏興，等.WTX基因：第一個(gè)位于X染色體上的腎母細(xì)胞瘤抑癌基因〔J〕.中國病理生理雜志，2009；25(1)：194-6.

13Pi W，Guo X，Su L，etal.BMP-2 up-regulates PTEN expression and induces apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells under hypoxia〔J〕.PLoS One，2012；7(5)：e35283.

14Duman BB，Kara OI，Uguz A，etal.Evaluation of PTEN，PI3K，MTOR，and KRAS expression and their clinical and prognostic relevance to differentiated thyroid carcinoma〔J〕.Contemp Oncol(Pozn)，2014；18(4)：234-40.

15Hou G，Lu Z，Liu M，etal.Mutational analysis of the PTEN gene and its effects in esophageal squamous cell carcinoma〔J〕.Dig Dis Sci，2011；56(5)：1315-22.

16Kim J，Roh M，Doubinskaia I，etal.A mouse model of heterogeneous，c-MYC-initiated prostate cancer with loss of Pten and p53〔J〕.Oncogene，2012；31(3)：322-32.

17Sakuma K，Aoki M，Kannagi R.Transcription factors c-Myc and CDX2 mediate E-selectin ligand expression in colon cancer cells undergoing EGF/bFGF-induced epithelial-mesenchymal transition〔J〕.Proc Natl Acad Sci U S A，2012；109(20)：7776-81.

18Zalata KR，Nasif WA，Ming SC，etal.p53，Bcl-2 and C-Myc expressions in colorectal carcinoma associated with schistosomiasis in Egypt〔J〕.Cell Oncol，2005；27(4)：245-53.

19Rivera MN，Kim WJ，Welis J，etal.The tumor suppressor WTX shuttles to the nucleus and modulates WT1 activity〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA，2009；106(20)：8338-43.

20Lin Fde M，Bacchi CE，Baracat EC，etal.Loss of PTEN expression and AKT activation in HER2-positive breast carcinomas〔J〕.Rev Bras Ginecol Obstet，2014；36(8)：340-6.

21Hou W，Liu J，Chen P，etal.Mutation analysis of key genes in RAS/RAF and PI3K/PTEN pathways in Chinese patients with hepatocellular carcinoma〔J〕.Oncol Lett，2014；8(3)：1249-54.

22Watanabe T，Semba S，Yokozaki H.Regulation of PTEN expression by the SWI/SNF chromatin-remodelling protein BRG1 in human colorectal carcinoma cells〔J〕.Br J Cancer，2011；104(1)：146-54.

〔2014-07-09修回〕

(編輯苑云杰)