普拉克索對帕金森病模型大鼠神經行為學的影響

普拉克索對帕金森病模型大鼠神經行為學的影響

王進殷立新霍穎浩1

(河北醫科大學第二醫院藥學部，河北石家莊050000)

摘要〔〕目的探討普拉克索對帕金森病(PD)大鼠神經行為學的影響效果。方法選取體重范圍185～210 g的SPF級雄性SD大鼠68只，均復制為PD大鼠模型，隨機分為觀察組和對照組，每組34只。對照組大鼠給予左旋多巴治療，觀察組大鼠給予左旋多巴聯合普拉克索治療。比較兩組大鼠治療1、3、5、7 w神經行為學指標對側旋轉、旋轉啟動時間、旋轉持續時間、劑峰旋轉圈數及AIM評分變化。結果兩組大鼠給藥后均出現對側旋轉，且隨著給藥時間延長對側旋轉圈數逐漸增加，其中給藥5 w時大鼠達到峰值。兩組大鼠隨著給藥時間延長，旋轉啟動時間逐漸降低，旋轉持續時間呈增加趨勢，劑峰旋轉圈數也呈逐漸增加趨勢，而AIM評分也隨治療時間逐漸增加。同一觀測時間點，觀察組對側旋轉圈數、大鼠旋轉啟動時間、旋轉持續時間、劑峰旋轉圈數、AIM評分都低于對照組(P<0.01或P<0.05)。結論普拉克索能夠有效緩解高劑量左旋多巴對PD大鼠神經行為造成的不利影響，改善AIM評分，并有利于促進左旋多巴治療PD的療效。

關鍵詞〔〕帕金森病；普拉克索；左旋多巴；神經行為學

中圖分類號〔〕R588〔文獻標識碼〕A〔

基金項目：河北省衛計委青年科技課題(No.20110368)

1河北醫科大學第二醫院神經內科

第一作者：王進(1978-)，女，主管藥師，主要從事臨床藥學研究。

帕金森病(PD)是一種常見的神經系統變性疾病〔1〕，臨床表現以靜止性震顫、動作遲緩、肌肉強直等癥狀為主〔2〕。目前，PD尚無有效治愈措施，目前采用左旋多巴等藥物為主、手術治療為輔的綜合治療措施，但是多數情況下還是無法控制病情進展〔3〕；且左旋多巴等藥物的毒性作用強度，隨劑量增加而更加明顯〔4〕。因此，有效減輕左旋多巴毒性作用，對提高PD治療效果具有重要意義。普拉克索是一種非麥角類多巴胺激動劑〔5〕，但是其治療PD的確切機制尚不清楚。本研究探討普拉克索對PD大鼠神經行為學的影響。

1材料與方法

1.1動物及試劑選取體重185～210 g的SPF級雄性SD大鼠68只〔河北醫科大學實驗動物中心提供，許可證號：SCXX(冀)2013-1-003〕，飼養條件為自由飲水、進食。人工控制日光燈照射模擬晝夜交替。普拉克索(Booehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG，批準文號：0H1553102)；左旋多巴注射液(廣西河豐藥業有限責任公司，國藥準字H45021481)；注射用異戊巴比妥鈉(上海新亞藥業有限公司，國藥準字H31021725);鹽酸芐絲肼(上海益生源藥業有限公司，國藥準字H31021397);抗壞血酸、阿撲嗎啡均購自美國sigma公司。

1.2儀器SR-5R大鼠立體定位儀，北京拜安吉科技有限公司。微量進樣器(1、5 μl)，北京華儀三譜儀器有限責任公司。

1.3方法(1)復制PD大鼠模型：SPF級雄性SD大鼠麻醉給藥異戊巴比妥鈉25 mg/kg，腹腔注射。麻醉完成后固定于立體定位儀上。根據大鼠立體定位儀圖譜說明書，并參考文獻〔6〕的方法，為PD大鼠造模，記錄大鼠開始出現一側旋轉至30 min內發生的旋轉圈數，平均每分鐘旋轉圈數超過7圈即為PD大鼠造模成功。(2)藥物治療：對照組大鼠給予左旋多巴40 mg/kg(即40 mg/kg左旋多巴與10 mg/kg芐絲肼溶解在濃度為0.01%的抗壞血酸及0.05%的乙醇)，腹腔注射給藥。觀察組大鼠在對照組基礎上給予普拉克索0.05 mg/kg，灌胃給藥。兩組大鼠療程均為7 w。

1.4觀察指標PD大鼠模型自給藥開始30 min內的對側旋轉圈數〔6〕。給藥左旋多巴和普拉克索后5 min內，兩組PD大鼠模型旋轉啟動時間、持續時間及劑峰旋轉圈數〔6〕。兩組大鼠異常不自主(AIM)評分方法〔6〕：PD大鼠模型出現對側旋轉、反復吐舌或咀嚼，頭部、軀體向破壞側屈曲或進行軸性旋轉、損傷對側肢體運動障礙現象。每次給藥后間隔30 min進行1次AIM評分，連續測評4次，最終AIM評分為4次評分總和。觀測時間點為給藥1、3、5、7 w。

1.5統計學分析使用SPSS13.0軟件，計量資料運用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。

2結果

2.1側旋轉行為兩組大鼠給藥后均出現對側旋轉，且隨著給藥時間延長對側旋轉圈數逐漸增加，其中給藥5 w時大鼠達到峰值。同一觀測時間點，觀察組大鼠對側旋轉圈數都低于對照組(P<0.01)。見表1。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對照組368.15±104.32490.58±251.93579.36±231.62542.65±251.46觀察組297.46±109.71308.62±130.29319.25±125.74223.81±107.24t/P值2.723/<0.013.741/<0.014.835/<0.014.364/<0.01

2.2旋轉啟動時間兩組大鼠隨著給藥時間延長，旋轉啟動時間逐漸降低。同一觀測時間點，觀察組大鼠旋轉啟動時間都低于對照組(P<0.01或P<0.05)。見表2。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對照組442.23±61.47431.86±60.58420.62±69.61411.37±100.14觀察組402.61±67.53389.37±64.25367.49±68.32302.54±145.81t/P值2.530/<0.052.806/<0.012.669/<0.053.698/<0.01

2.3旋轉持續時間兩組大鼠隨著給藥時間延長，旋轉持續時間呈增加趨勢。同一觀測時間點，觀察組大鼠旋轉持續時間都少于對照組(P<0.01或P<0.05)。見表3。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對照組143.42±28.51159.74±38.82167.91±29.57172.16±18.26觀察組128.79±21.63137.95±35.17145.42±26.28155.73±14.21t/P值2.384/<0.052.426/<0.052.785/<0.012.657/<0.01

2.4劑峰旋轉圈數兩組大鼠隨著給藥時間延長，劑峰旋轉圈數逐漸增加。同一觀測時間點，觀察組大鼠劑峰旋轉圈數都少于對照組(P<0.01或P<0.05)。見表4。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對照組79.41±31.27102.73±43.52109.24±48.61112.37±25.39觀察組63.28±29.5372.21±30.4381.96±30.8590.23±25.95t/P值2.187/<0.053.351/<0.012.321/<0.052.282/<0.05

2.5AIM評分兩組大鼠AIM評分隨治療時間逐漸增加。同一觀測時間點，觀察組大鼠AIM評分都低于對照組(P<0.01或P<0.05)。見表5。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對照組21.57±3.6824.94±7.1326.45±4.8430.72±5.42觀察組19.26±3.8520.51±6.2622.89±3.8125.15±5.13t/P值2.529/<0.052.723/<0.012.831/<0.012.793/<0.01

3討論

PD是高齡人群最常見的錐體外系疾病〔7〕，發病確切病因尚不清楚。藥物治療是PD治療的最主要手段〔8〕。左旋多巴為多巴胺前體，對黑質內變性壞死多巴胺神經元引起的多巴胺減少起到一定補充作用，可以緩解PD臨床癥狀〔9〕，但也會產生毒性作用〔10〕。普拉克索為多巴胺受體激動劑〔11〕，能夠興奮黑質紋狀體內的多巴胺受體，減輕PD引起的運動障礙〔12〕。普拉克索與左旋多巴聯用時，可減少左旋多巴給藥量，降低高濃度左旋多巴可能產生的毒性作用〔13〕。大鼠攝入左旋多巴治療PD，使細胞外左旋多巴濃度增加，刺激黑質內多巴胺能神經元，致使大鼠出現對側旋轉行為。而觀察組大鼠給予普拉克索治療后，大鼠對側旋轉程度較對照組明顯改善。由此可以認為普拉克索能夠緩解黑質內多巴胺能神經元對左旋多巴敏感程度，減輕左旋多巴毒性作用。PD不僅可以影響患者的運動功能，而且可以對患者的感覺及認知也產生嚴重影響〔14〕。本研究結果表明普拉克索治療PD大鼠，能夠有效改善左旋多巴治療產生的異常不自主運動，大鼠攝入左旋多巴后發生肢體運動障礙、反復咀嚼及軀體軸性旋轉等異常活動發生程度明顯減輕。

4參考文獻

1何一川，李殿友，孫伯民.帕金森病吞咽障礙〔J〕.中國老年學雜志，2014;34(23)：6848-51.

2陳松盛，李琛，楊穎，等.補腎活血方對帕金森病大鼠多巴胺能神經元的保護作用及機制〔J〕.中國實驗方劑學雜志，2014;20(21)：175-9.

3陳鑫，成亞琴，施建生，等.依達拉奉對6-OHDA誘導的帕金森病大鼠黑質紋狀體神經元的保護作用〔J〕.江蘇醫藥，2013;39(7)：779-82.

4Klein A，Sacrey LAR，Whishaw IQ，etal.The use of rodent skilled reaching as a translational model for investigating brain damage and disease〔J〕.Neurosci Biobehav Rev，2012;36(3)：1030-42.

5Zagmutt FJ，Tarrants ML.Indirect comparisons of adverse events and dropout rates in early Parkinson's disease trials of pramipexole，ropinirole，and rasagiline〔J〕.Int J Neurosci,2012;122(7)：345-53.

6丁宏娟，何建成，王文武.左旋多巴對帕金森病大鼠神經行為學影響的動態研究〔J〕.重慶醫科大學學報，2011;36(11)：1281-4.

7Slow EJ，Postuma RB，Lang AE.Implications of nocturnal symptoms towards the early diagnosis of Parkinson's disease〔J〕.J Neural Vienna，Austria,2014;121(Suppl 1):S49-57.

8鐘文華.益氣養陰活血方對帕金森病大鼠神經行為學的影響〔J〕.中國中醫藥科技，2012;19(3)：218-9.

9曹非，駱芳，張磊，等.帕金森病行為學和黑質形態學實驗研究〔J〕.腦與神經疾病雜志，2012;20(5)：375-8.

10Konieczny J，Lenda T.Contribution of the mGluR7 receptor to antiparkinsonian-like effects in rats： a behavioral study with the selective agonist AMN082〔J〕.Pharmacol Rep PR，2013;65(5)：1194-203.

11Ahlskog JE.Pathological behaviors provoked by dopamine agonist therapy of Parkinson's disease〔J〕.Physiol Behav,2011;104(1):168-72.

12Chen JJ,Swope DM,Dashtipour K,etal.Transdermal rotigotine:a clinically innovative dopamine-receptor agonist for the management of Parkinson's disease〔J〕.Pharmacotherapy,2009;29(12):1452-67.

13楊秀峰.普拉克索聯合左旋多巴治療帕金森病的療效觀察〔J〕.中國醫藥指南，2012;10(13)：99-100.

14Zachrisson O,Zhao M,Andersson A,etal.Restorative effects of platelet derived growth factor-BB in rodent models of Parkinson's disease〔J〕.J Parkin Dis,2011;1(1):49-63.

〔2015-07-16修回〕

(編輯曲莉)