C3、C4及聯合多項指標檢測在腹腔積液良惡性鑒別中的診斷價值

C3、C4及聯合多項指標檢測在腹腔積液良惡性鑒別中的診斷價值

郭正武孫靜芳胡高峰續薇

(吉林大學第一醫院檢驗科，吉林長春130021)

摘要〔〕目的探討補體C3、C4及多項指標聯合檢測在腹腔積液良惡性鑒別診斷中的應用價值。方法收集2014年3～8月該院的85例良性和43例惡性腹腔積液，采用免疫散射比濁法測定C3、C4、高敏C-反應蛋白(hs-CRP)及鐵蛋白(FERR)，電化學發光法測定甲胎蛋白(AFP)、CA125、CA199、癌胚抗原(CEA)，酶速率法測定膽固醇(CHO)，采用受試者工作曲線(ROC)及Logistic回歸分析各指標及聯合多項指標檢測對腹腔積液鑒別診斷的價值。結果與良性腹水組相比，惡性腹腔積液組CA125、CA199、CEA、C3、C4、CHO、hs-CRP及FERR均增高(P均<0.05)，其檢測靈敏度分別為55.8%，44.2%，60.5%，86.0%，90.7%，60.5%，79.1%，51.2%；特異性分別為85.9%，96.5%，92.9%，90.6%，84.7%，89.4%，74.1%，76.5%；準確度為75.8%，78.9%，82.0%，89.1%、88.3%，79.7%，75.8%，68.0%。采用CA199、CEA、C4、FERR聯合檢測后，其靈敏度、特異性、準確度分別為93.0%，92.9%，93.8%。結論惡性腹腔積液中補體C3、C4升高，且在單項指標中，C3及C4對于惡性腹腔積液的診斷價值最高，聯合多項指標檢測后可為惡性腹腔積液提供較高的診斷價值。

關鍵詞〔〕腹腔積液；補體；標志物

中圖分類號〔〕R446.19〔文獻標識碼〕A〔

通訊作者：續薇(1956-)，女，博士生導師，主任醫師，主要從事血液病與腫瘤分子生物學研究。

第一作者：郭正武(1989-)，男，碩士，主要從事血液病與腫瘤的分子診斷研究。

腹腔積液是常見的臨床表現之一，病因較多。惡性腹腔積液的出現往往預示著腫瘤已發生轉移。腹腔積液脫落細胞學檢查是診斷惡性腹腔積液的金標準，但敏感性低，診斷的陽性率只有40%～60%。隨著對于惡性腹腔積液研究的增多，乳酸脫氫酶(LDH)、腺苷脫氨酶(ADA)、膽固醇(CHO)、基質金屬蛋白酶、鐵蛋白(FERR)，腫瘤標志物等一系列檢測指標應用于腹腔積液良惡性的鑒別中。這些檢測提高了惡性腹腔積液的診斷正確率，但目前這些檢測的靈敏度和特異性尚不能滿足臨床需求。已有研究證實，腫瘤組織中補體升高〔1,2〕，本研究通過檢測腹腔積液中補體C3、C4水平及聯合檢測多項腫瘤標志物、生化指標，以期更好地鑒別診斷惡性腹腔積液。

1對象與方法

1.1對象選取我院2014年3～8月收集到的住院并且已確診良惡性的腹腔積液128例，其中惡性腹腔積液43例，良性85例。惡性腹腔積液組43例患者中，胃癌14例，卵巢癌10例，宮頸癌2例，結腸癌3例，肺癌2例，膽囊癌3例，胰腺癌3例，膀胱癌1例，未明原發部位者5例，其中男18例，女25例，平均年齡57.4歲，均經過手術、影像、病理、脫落細胞學檢查等手段確診惡性腹腔積液。良性組腹腔積液包括肝硬化組74例，心衰患者6例，腎衰患者5例，男48例，女37例，平均年齡54.6歲，以上所有樣本均經臨床確診，且未進行過相關治療。

1.2檢測儀器和方法采用我科日立7600-210ISE型全自動生化儀器測試FERR、CHO。鐵蛋白采用免疫散射比濁法測定，CHO采用酶法測定。瑞士羅氏CobasE601型電化學發光分析儀測定癌胚抗原(CEA)，甲胎蛋白(AFP)，糖類抗原(CA)125，CA199，測定方法為電化學發光；西門子BNⅡ型全自動特定蛋白分析儀測定C3、C4、高敏C-反應蛋白(hs-CRP)，測定方法為免疫散射比濁法。所有測試均在6h內完成。

1.3樣本收集方法所有樣本均在送到檢驗科12h內用無菌20ml試管收集后3 000r/min離心10min，取2ml上清液體于無菌試管中-20℃保存，1個月內進行測定。乳糜及血性腹腔積液經離心后仍乳濁及血性者棄去。

1.4統計學方法采用SPSS16.0軟件進行Mann-WhitneyU檢驗、繪制ROC并進行LogisticRegression運算。

2結果

2.1各項指標在良惡性腹腔積液中的檢測結果除惡性腹腔積液與良性腹腔積液AFP組間比較無統計學差異外(P=0.368)，其他各項指標均在惡性腹腔積液中增高(P<0.05)，見表1。

2.2各項指標對于良惡性腹腔積液診斷價值將各組數據經過ROC曲線分析后，選取約登指數最大的點為cut-off值，大于cut-off值可認為其為惡性腹腔積液的可能性較大，用SPSS計算這些指標鑒別診斷良惡性腹腔積液的靈敏度、特異性和準確度及曲線下面積(AUC)。

由表2可知，CA125及FERR診斷價值較低，CA199、CEA、CHO、hs-CRP對于良惡性腹腔積液鑒別有一定準確度，而C3及C4的測定對于良惡性腹腔積液的鑒別來說具有較高的準確度。已知AUC在0.8以上時其診斷價值較好。

表1　9項指標在良惡性腹腔積液中的測定結果〔 P50( P25～ P75)〕

表2　各指標對于良惡性腹腔積液的診斷價值

對上述指標先進行單因素LogisticRegression回歸分析，將有意義的指標進行多因素分析，分別進行前向逐步分析與后向逐步分析，選取準確度較高的后向逐步分析結果納入方程，將符合條件的C3、C4，CA199，CEA，CA125，CHO，FERR納入回歸方程，并對聯合指標產生的新變量PRE-1繪制的ROC進行分析后得出，C4、CEA、CA199及FERR聯合診斷時AUC最大(0.983)，95%CI為(0.939～0.997)，對應的Logistic回歸方程為Y=1/ 〔 1+e-(-5.739 + 0.035CA199+ 0.08CEA+ 33.121C4+0.001FERR) 〕，最佳預測概率值為0.321，預測概率值≥0.321時，診斷為惡性腹腔積液。診斷靈敏度、特異性及準確度分別為93.0%，92.9%，93.8%，其檢測的靈敏度及特異性均較單一指標檢測提高。見表3。

表3　 Logistic回歸分析結果

3討論

在臨床工作中，很多良性疾病可導致腹腔積液的產生，其與惡性腫瘤引起的腹腔積液常需進行鑒別診斷。臨床上已應用包括脫落細胞學、腫瘤標志物檢測、生化檢測等手段對腹腔積液進行鑒別診斷。近期以來，腫瘤細胞與周圍環境中炎癥分子間相互作用逐漸引起重視，已有研究表明腫瘤周圍微環境中白細胞介素(IL)-10、轉錄活化因子(STAT)3、轉化生長因子(TGF)-β等分子可抑制機體的免疫活動，使得腫瘤細胞更易發生免疫逃逸，且腫瘤在發生轉移后，可以改變新的轉移部位的一些免疫分子數量，這些分子可作為腫瘤轉移的標志物。

補體是機體的固有免疫系統中具有重要酶活性的蛋白質分子，作為固有免疫重要的組成部分，廣泛參與機體抗感染的防御反應、惡變細胞的清除以及免疫調節。在腫瘤細胞表面已發現一些抵抗補體發揮作用的分子，如補體調節蛋白CD46、CD55 及CD59，使得腫瘤細胞周圍微環境中補體沉積。這些細胞膜補體調節蛋白在腫瘤表面的過度表達，抑制了補體系統的正常作用，介導了腫瘤細胞的免疫耐受。一些研究已證實中和補體或清除補體可以更好地發揮藥物作用和增強自然殺傷(NK)細胞的殺傷腫瘤的作用〔3〕。腫瘤細胞表面補體調節蛋白的表達可使得腫瘤周圍微環境中的補體升高，同時一些研究也表明在腫瘤患者中可發現補體系統的表達增強，參與腫瘤細胞的免疫逃逸〔4〕，這些發現揭示了腫瘤免疫逃逸機制的多樣性和復雜性。研究表明，相對于良性腹腔積液而言，惡性腹腔積液中的補體C3和C4也會升高〔5〕，其可以作為輔助診斷惡性腹腔積液的良好指標。

AFP是臨床上用于篩查肝癌的特異性指標，在血液檢測中具有良好的診斷價值。CA125在包括良性腹腔積液在內的患者腹腔積液均呈明顯升高。具體機制尚不明確，或許與腹腔積液的產生刺激間皮細胞CA125基因表達，產生大量CA125分泌入腹腔積液有關。CA199和CEA均可在胰腺癌、結直腸癌及胃癌等多種腫瘤中升高，對于腹腔積液良惡性鑒別來說，兩者診斷惡性腹腔積液準確度較高，具有較好的診斷價值，靈敏度及特異性與一些國內外研究結論相似〔6，7〕。

CHO是脂類代謝物質，有文獻報道其在惡性腹腔積液中含量常增高。本研究顯示CHO作為鑒別良惡性腹腔積液診斷價值較好，研究結果與國外報道一致〔8〕。hs-CRP及FERR均為急性時相蛋白，有報道認為他們在腹腔積液中的含量可在腫瘤存在的情況下增高〔9〕。本研究發現CRP及FERR在良惡性腹腔積液鑒別中雖有作用，但診斷價值較小。補體也可成為檢測腫瘤的良好標志物。

4參考文獻

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〔2015-03-26修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)