水產品中關于硝基呋喃類代謝物檢測方法的方法確證研究

◎黎天勇，劉 斌，張 博，蔡揚堯

（云浮出入境檢驗檢疫局綜合技術服務中心，廣東 云浮 527300）

硝基呋喃類藥物是一類人工合成廣譜抗生素，對大多數革蘭氏陽性、陰性菌，真菌和原蟲等病原體均有殺滅作用[1]。20世紀90年代，硝基呋喃類藥物被發現具有致畸、致突變和致癌作用[2]，2002年我國頒布了《食用動物禁用的獸藥及其它化合物清單》，禁止使用硝基呋喃類抗生素，并于2003年將水產品硝基呋喃代謝物納入殘留監控計劃中[2]。食品中硝基呋喃類代謝物的檢測方法，主要有免疫分析法[3]、液相色譜法及液質聯用法[4-6]。

1 儀器與設備

儀器名稱：Agilent 1290-6460安捷倫液質聯用儀；配有電噴（ESI）離子源；生產廠家：美國安捷倫。

2 方法參考

主要參照GB/T 21311-2007（LC-MS/MS法），對硝基呋喃類藥物四種代謝物AOZ、AMOZ、AHD、SEM進行研究，以驗證采用的方法是否有效。

3 標準曲線測試數據

為檢驗物質線性是否達到要求，繪制硝基呋喃代謝物標準曲線，如圖1～4所示。

4 方法的定性分析數據

表1 SEM標準曲線

表2 AOZ標準曲線

表3 AMOZ標準曲線

表4 AHD標準曲線

因為定性分析涉及到色譜峰的保留時間和相對豐度，因此利用加標來進行方法定性的確證，在檢測限進行分析。如表5所示。

5 方法檢出限測試數據表

分別對各種標準物質溶液稀釋成不同低濃度，分別上機，分析方法檢出限。如表6所示。

根據3倍信噪比確定藥物的方法檢出限，10倍信噪比（S/N）確定藥物的方法定量限，SEM、AOZ、AMOZ、AHD方法檢測限均為0.5 μg/kg。

6 方法精密度及加標回收率

以進行硝基呋喃代謝物標準樣品的6次重復性測試，分別在檢測限及檢測上下點進行測試，計算各類物質的精密度及加標回收率，如表7所示。

7 方法準確度測試數據

因為被測物質硝基呋喃代謝物標準樣品為固體物質，所以用加入各被測定組分的純物質進行回收試驗來估計和確定準確度。如表8所示。

8 方法驗證結論

以 GB/T 21311-2007方 法 測 得 SEM、AOZ、AMOZ、AHD方法檢測限均為0.5 μg/kg；定性分析定性離子對相對離子豐度偏差均在±20%之間；方法精密度分別為4.72%、3.03%、2.44%、3.73%；方法準確度相對誤差分別為2%、0%、0%、2%；方法加標回收所得測試數據，回收率均在90%～110%之間；對國家有證標準物質分析的相對誤差均在3%以下，滿足實驗室質量控制的要求，為進一步保證測量的準確性，我們參加了呋喃妥因測量審核，結果均為滿意，本次驗證結果有效。

表5 硝基呋喃類代謝物定性分析數據

表6 方法檢出限測試數據表

表7 SEM、AOZ、AMOZ、AHD精密度測試數據

表8 SEM、AOZ、AMOZ、AHD準確度測試數據

[1]生威,李季,許艇.動物性產品中硝基呋喃類抗生素殘留檢測方法研究進展[J].農業環境科學學報,2006(25).

[2]田蘊,羅曉琴.水產品硝基呋喃類藥物殘留檢測[J].動物保健,2006(7).

[3]徐一平,金征宇,胥傳來.ELISA方法檢測呋喃妥因代謝物1-氨基乙內酰脲[J].食品工業科技,2008(8).

[4]葛寶坤,王云鳳,常春艷,等.測定雞肉、水產品中四種硝基呋喃類藥物殘留量的固相萃取-液相色譜法[J].分析測試學報,2003(5).

[5]龐國芳,進杰,曹彥忠,等.高效液相色譜-串聯質譜法測定家禽組織中硝基呋喃類抗生素代謝物殘留的研究[J].食品科學,2005(10).

[6]動物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留量檢測方法高效液相色譜-串聯質譜法（GB/T21311-2007）[S].北京:中國標準出版社,2007.