腦血管疾病患者血小板的活化狀態變化分析

呂 樸 黃一寧

北京大學第一醫院神經內科 北京 100191

腦血管疾病患者血小板的活化狀態變化分析

呂 樸 黃一寧

北京大學第一醫院神經內科 北京 100191

目的 探討腦血管疾病患者血小板的活化狀態變化的臨床意義。方法 隨機選擇90例腦血管疾病患者，其中腦梗死（腦梗死組）和高血壓（高血壓組）患者各45例，并選擇30例健康者為對照組。利用流式細胞儀檢測所有研究對象的血小板活化狀態，并進行比較。結果 腦梗死組和高血壓組的血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61較對照組差異無統計學意義（均P＞0.05）；但較健康對照組，血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均出現顯著上升的情況，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。結論 腦血管疾病患者的血小板活化狀態顯著增強，臨床對血小板表面膜糖蛋白的檢測具有重要意義。

腦血管疾病；血小板；活化狀態；變化

腦血管疾病是一類常見疾病，對人體的危害極大［1］。研究發現，血小板的活化狀態與腦血管疾病之間存在一定的聯系［2］。筆者從本院2013-09—2014-09收治的腦血管疾病患者中隨機選擇90例進行研究，探討腦血管疾病患者血小板的活化狀態變化的臨床意義。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2013-09—2014-09收治的腦血管疾病患者90例，男51例，女39例；年齡59～81歲，平均（64.1±2.3）歲。腦梗死（腦梗死組）和高血壓（高血壓組）患者各45例，并從同期在本院接受健康體檢群體中隨機選擇30例作為健康對照組。3組一般資料差異無統計學意義（P ＞0.05），具有可比性。研究方案獲醫院倫理委員會批準。

1.2 方法 所有研究對象采集空腹靜脈血3mL送檢，使用美國guave6HT流式細胞儀（武漢科力瓦貿易有限公司）利用全血法檢測所有研究對象的血小板活化狀態，從采血到檢測要在3h內完成，所使用的抗體和磷酸鹽緩沖液（PBS）均購自上海瑞齊生物技術有限公司。檢測項目包括血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61、CD62p、CD63。檢測方法：取試管1（陰性對照）和試管2（檢測管），均加入5mL抗凝全血和PBS200mL，試管1中加入適量的CD42b-FITC和陰性對照抗體（對應于CD62-PE或CD63-PE），試管2中加入適量的CD42b-FITC和CD63-PE或者CD62-PE抗體。室溫下置于避光除進行25min孵育后，加PBS2mL，上機進行檢測。

1.3 統計學處理 所有數據采用SPSS 16.0軟件統一處理。計量資料以±s表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

腦梗死組和高血壓組患者的血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61較健康對照組差異無統計學意義（均P＞0.05）；但血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均顯著上升，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表1。

表1 腦血管患者與健康者血小板活化狀態比較（±s，％）

表1 腦血管患者與健康者血小板活化狀態比較（±s，％）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.05

組別 n CD41 CD61 CD62p CD63腦梗死組 30 95.72±1.53＊98.25±1.91＊10.25±6.03 5.76±6.55高血壓組 30 93.29±3.89＊96.05±3.12＊20.33±12.61 6.75±8.13健康對照組 30 94.12±5.13 93.87±5.68 4.03±2.36 1.65±1.69

3 討論

在正常狀態下，血管內部血液中的血小板為分散的靜息狀態［3］。一旦出現各種病理改變，如外來化學物質的刺激和血流變化以及血管損傷等，便會導致血小板活化狀態的改變。血小板活化狀態的變化有可能會導致多種疾病的發生，如糖尿病和各種心腦血管疾病等。血小板活化包括多方面的內容，如血小板成分的釋放和血小板聚集及血小板形態變化等。血小板表面含有大量的膜糖蛋白，包括顆粒膜糖蛋白和質膜糖蛋白，如CD41和CD61、CD63等［4］。研究發現［5］，血小板會通過其表面糖蛋白參與到血栓的形成過程之中。在正常狀態下，血小板的CD63會保持靜息狀態，但如果受到一定的刺激，CD62p、CD63會發生表達，形成活化血小板，其聚集和黏附能力等也會隨之顯著增強。因此，對膜糖蛋白的檢測在腦血栓疾病的診療和預后等方面都具有十分重要的臨床意義。研究發現［6］，血小板活化在腦梗死的發病過程中起重要作用，高血壓能促進體內血小板活化和表達。血小板膜糖蛋白GMP-140、PAC-1表達與血小板參數PLT、MPV密切相關，均可以作為血小板活化的指標。血小板活化的時候顆粒膜蛋白與血小板膜蛋白發生融合作用，導致顆粒膜蛋白翻轉到血小板膜表面［7］。因此，臨床對血小板活化狀態進行檢測時可以使用流式細胞儀進行多參數分析，檢測這些顆粒膜蛋白，對血小板表面予以標記，了解相關信息，判斷血小板的活化狀態［8-9］。本文結果顯示，腦梗死組和高血壓組以及冠心病組患者的血小板表面膜糖蛋白CD41、CD61較健康對照組差異無統計學意義，分析原因為血小板活化的時候CD41-CD61復合物作為纖維蛋白受體雖然會出現一定的改變，但CD41或CD61的總數卻不會發生變化。因此，血小板CD41、CD61蛋白可以作為血小板特異性膜抗原用來進行血小板群鑒別，以更好的排除流式細胞儀分析過程中其他因素的干擾，如白細胞和紅細胞以及碎片等［10］。血小板活化還會參與到腦梗死和冠心病患者的動脈粥樣硬化性血栓形成過程中，在動脈粥樣硬化的發展、發生過程中，血小板活化所起的作用極為重要。其中，CD62p蛋白在早期即參與了動脈粥樣硬化的形成，并與且脈硬化的病變程度之間存在一定的相關性［11］。王國瑜等［12］研究發現，血小板膜糖蛋白PAC-1 與CD62P表達呈線性相關，并且與炎癥趨化因子血小板因子4（platelet factor 4，PF4）濃度變化一致。表明血小板活化及其介導的炎癥機制在動脈粥樣硬化和血栓形成過程中起著重要的病理生理學作用，且該機制在不同病變類型之間存在顯著差異。本次研究結果還顯示，較健康對照組，腦梗死組和高血壓組患者的血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均出現顯著上升的情況，表明腦梗死和冠心病等心腦血管患者的血小板活化功能較健康者會出現顯著增強的情況。另外，關于高血壓患者血小板活化狀態的研究目前尚無一致的定論，大多數學者均認為高血壓患者會出現血小板活化能力增強的情況。本文顯示，較健康對照組，高血壓組患者的血小板表面膜糖蛋白CD62p、CD63均出現顯著上升的情況，提示高血壓患者的血小板活化功能較之健康者會出現顯著增強。分析可能與交感神經活性亢進、血流動力學改變以及以及內皮細胞受損等因素有關。另外，有學者報道［13］，血小板膜糖蛋白（GP）與急性腦梗死患者病情嚴重程度呈正相關，血小板活化狀態對于評估急性腦梗死患者病情輕重以及判斷預后有重要意義。本研究受到研究樣本及時間等因素的限制，并沒有對血小板活性狀態與各腦血管疾病的發展及預后等問題進行探討。

綜上所述，腦血管疾病患者的血小板活化狀態顯著增強，臨床可以通過對腦血管疾病患者血小板表面膜糖蛋白的檢測來更好的預防各種腦血管疾病的出現。

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（收稿2014-07-11）

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1673-5110（2015）10-0075-02