姜黃素對大鼠缺血再灌注損傷脊髓的抗氧化作用

任宗凱河南永城市人民醫(yī)院骨科 永城 476600

姜黃素對大鼠缺血再灌注損傷脊髓的抗氧化作用

任宗凱
河南永城市人民醫(yī)院骨科 永城 476600

目的 探討姜黃素對缺血再灌注損傷脊髓組織的抗氧化作用。方法 40只健康雄性Wistar大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、姜黃素高劑量組和姜黃素低劑量組，根據(jù)分組不同進行相應(yīng)處理后，采用腹主動脈缺血法制備大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型，測定各組大鼠脊髓組織中SOD、MDA表達水平。結(jié)果 姜黃素高劑量和姜黃素低劑量組大鼠脊髓組織中SOD均高于模型組，而MDA均低于模型組（P＜0.05）。姜黃素高劑量組脊髓組織中SOD高于姜黃素低劑量組，而MDA低于姜黃素低劑量組（P＜0.05）。結(jié)論 姜黃素對缺血再灌注損傷后脊髓組織具有抗氧化作用。

姜黃素；脊髓；缺血再灌注損傷；抗氧化作用；超氧化物歧化酶；丙二醛

脊髓缺血再灌注損傷的發(fā)生可能與機體自由基過剩、細胞凋亡加劇、炎癥反應(yīng)發(fā)生等有關(guān)［1］。姜黃素已被證實在心、腦、肝、腎等器官或組織中具有對缺血再灌注損傷的保護作用［2］。為探討姜黃素在脊髓缺血再灌注損傷這一病理生理過程中的作用，本文利用大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型觀察姜黃素對抗氧化相關(guān)指標的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對象 健康雄性Wistar大鼠40只，體質(zhì)量260～330g，動物許可證號為SCXK（豫）2014-0001，購自河南省實驗動物中心。

1.2 藥品與試劑 姜黃素購自美國Sigma公司；考馬斯亮藍蛋白檢測試劑盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）檢測試劑盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）檢測試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 動物分組及給藥方法 40只健康雄性Wistar大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、姜黃素高劑量組和姜黃素低劑量組，各組分別給予相應(yīng)處理：姜黃素高、低劑量組大鼠于造模前15min分別給予50mg/kg姜黃素+0.9％NaCl溶液和25mg/kg姜黃素+0.9％NaCl溶液，每只大鼠注射藥液量按10mL/kg計算；假手術(shù)組和模型組大鼠于術(shù)前均給予同體積0.9％NaCl溶液。

1.4 模型制備及指標檢測 大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型制備采用改良后的腹主動脈缺血法［3］，缺血時間45min，再灌注時間8h，其中假手術(shù)組僅進行腹主動脈分離術(shù)，實驗結(jié)束后麻醉處死大鼠，取第3～5腰椎處的脊髓組織，用0.9％ NaCl溶液制成組織勻漿，低溫（4℃）離心10min，離心速度4 000r·min-1，取上清液，SOD采用嘌呤氧化酶法測定，MDA采用硫代戊巴比妥法測定，蛋白測定用考馬斯亮藍法。

1.5 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以均數(shù)±標準差表示，采用單因素方差分析和LSD-t檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

姜黃素高、低劑量組大鼠脊髓組織中SOD均高于模型組，而MDA均低于模型組（P＜0.05）。姜黃素高劑量組脊髓組織中SOD高于姜黃素低劑量組，而MDA低于姜黃素低劑量組（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠脊髓組織中SOD、MDA水平比較 （±s）

表1 各組大鼠脊髓組織中SOD、MDA水平比較 （±s）

3 討論

脊髓缺血多發(fā)于脊柱骨折、脊髓內(nèi)微創(chuàng)手術(shù)、主動脈瘤手術(shù)等過程中，可能導(dǎo)致機體一過性或永久性損傷。因此，臨床上將恢復(fù)血流作為首要目標，但在進一步的基礎(chǔ)或臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，血流剛開始恢復(fù)時，機體的損傷反而加重，這種現(xiàn)象稱為脊髓的缺血再灌注損傷，可能是建立在細胞凋亡加劇、自由基過剩、炎癥反應(yīng)發(fā)生、鈣超載的病理生理學過程的基礎(chǔ)上［1］。姜黃素提取自姜科姜黃屬植物姜黃根莖，屬于酚類色素，在心、腦、肝、腎等器官或組織中具有對缺血再灌注損傷的保護作用［2］。付健等［4］發(fā)現(xiàn)，姜黃素預(yù)處理后能夠影響大鼠缺血再灌注損傷脊髓組織中NF-κB和Hsp70的表達，進而抑制損傷早期出現(xiàn)的炎癥反應(yīng)。本課題選擇了SOD和MDA作為姜黃素抗氧化作用評估的觀察指標。

SOD是一種氧自由基清除劑，正常情況下，一定水平的SOD能夠維持機體的平衡，在清除過剩自由基的同時又不至于對機體造成損傷。一旦SOD水平急劇下降，體內(nèi)過剩的自由基就會對機體造成傷害［5］。因此，可通過提高體內(nèi)SOD水平發(fā)揮抗氧化作用。MDA是機體脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物之一，體內(nèi)丙二醛水平上升提示過氧化程度的加重，而且過量的MDA同時會進一步加劇體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等的交聯(lián)聚合，具有一定的細胞毒性［5］。本研究結(jié)果顯示，姜黃素高、低劑量組大鼠脊髓組織中SOD均高于模型組，而MDA均低于模型組，提示姜黃素具有一定的抗氧化作用；姜黃素高劑量組脊髓組織中SOD高于姜黃素低劑量組，而MDA低于姜黃素低劑量組，提示在一定劑量范圍內(nèi)，姜黃素的用藥量越大，其抗氧化作用可能越強。總之，姜黃素在大鼠脊髓缺血再灌注損傷過程中具有一定的抗氧化作用，且這種作用具有一定的劑量依賴性，姜黃素可能通過這種抗氧化作用發(fā)揮減輕脊髓缺血再灌注損傷的作用，但尚需進一步研究證實。

［1］袁元杏，劉尚禮，黃彥清，等.脊髓損傷后不同免疫條件下血清IL-6、IL-8、TNF-α含量的變化與意義［J］.臨床骨科雜志，2008，11（3）：195-198.

［2］李冠，夏振.姜黃素對大鼠腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)和血腦屏障通透性的作用研究［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，24（8）：814-816；877.

［3］劉輝.白藜蘆醇對大鼠脊髓缺血再灌注損傷組織的保護作用［J］.中國實用神經(jīng)疾病雜志，2014，17（19）：99-100.

［4］付健，韋波，范洪偉，等.姜黃素對大鼠脊髓缺血再灌注損傷后NF-κB和Hsp70的表達研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2011，22（7）：1 629-1 631.

［5］徐凈.脊髓組織缺血再灌注早期MDA和SOD的動態(tài)變化［J］.西南軍醫(yī)，2008，10（5）：12-13.

（收稿2014-09-26）

R-332

A

1673-5110（2015）11-0059-02