GC-MS外標法分析椰子果肉中的脂肪酸含量

耿薇，鄭敏燕，魏永生，張君才

（咸陽師范學院化學與化工學院，陜西咸陽712000）

GC-MS外標法分析椰子果肉中的脂肪酸含量

耿薇，鄭敏燕，魏永生，張君才

（咸陽師范學院化學與化工學院，陜西咸陽712000）

通過氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）測定椰子果肉中的脂肪酸含量，用外標法進行定量分析。椰子果肉脂肪酸種類豐富，選取常見的4種脂肪酸，在椰子果肉中的含量：棕櫚酸＞油酸＞硬脂酸，亞油酸未檢出。相對標準偏差RSD（n=5）在2.03%～10.25%之間，樣品回收率測定在77.0%～110.0%之間。

外標法；氣質聯用；椰子果肉；脂肪酸

椰子（Cocosnucifera L.）是棕櫚科植物椰子樹的果實，為古老的栽培作物，中國種植椰子主要集中分布于海南省。椰子的營養價值很高，中醫認為，椰肉味甘，性平，具有補益脾胃、殺蟲消疳的功效，椰汁及椰肉中含有蛋白質、糖類、油脂類、維生素類以及鈣、磷、鐵等微量元素及礦物質，是藥食兩用的佳品，脂肪酸就是其中之一。脂肪酸是人體不可缺少的營養成分之一，與健康密切相關[1-3]。已有報道用氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）的峰面積歸一法分析椰子果肉中的脂肪酸含量[3-4]，本文通過GC-MS的外標法測定椰子果肉中的脂肪酸含量。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

GCMS-QP2010氣相色譜-質譜聯用儀：日本島津SHIMADZU制作所；RE-52AA旋轉蒸發器：上海嘉鵬科技有限公司；10μL微量進樣器：澳大利亞SGE；SartoriusCP124S電子天平：Max120 g，d=0.1mg；20μL～200μL移液器：Thermo Finnpipette；SB4200DTD超聲波清洗機：寧波新芝生物科技股份有限公司；SHB-IIIA循環水式多用真空泵：鄭州長城科工貿有限公司；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器：河南省予華儀器有限公司；HR7625飛利浦食品加工機；101型電熱鼓風干燥箱：北京科偉永興儀器有限公司；標準檢驗篩（40目，孔徑0.45mm）；索氏提取器。

椰子果肉；硫酸；乙醚；棕櫚酸（分析純）：西安化學試劑廠；硬脂酸（分析純）：天津化學試劑廠；油酸（分析純）：天津化學試劑廠；亞油酸（99%）：百靈威科技有限公司。

所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。

1.2 分析條件

氣相色譜條件：J&W DB–WAX彈性石英毛細管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）；載氣為高純氦He，純度≥99.999%；柱溫：130～240。柱初溫130℃，保持1min，以20℃/min升溫至230℃，保持5min，再以20℃/min升溫至240℃，保持6.5min，共18.00min。進樣口溫度250℃；柱前壓84.6 kPa，柱流量1.00mL/min，分流比1∶30；用微量進樣器進樣1.0μL。

質譜條件：EI離子源，離子源溫度200℃，GC-MS接口溫度200℃，電子能量70 eV，電子倍增器電壓0.97 kV[3]，質量掃描范圍29m/z～450m/z，溶劑峰切除時間1.6min，質譜檢測起測時間1.7min。

1.3 椰子油的提取

將椰子果肉烘干，粉碎，過40目篩。稱取一定質量的樣品，移入濾紙筒內，以乙醚作溶劑，采用索式提取器，30℃恒溫水浴回流3 h。倒出上清液，抽濾，用旋轉蒸發儀蒸去乙醚后，得到椰子油樣品。

1.4 脂肪酸的甲酯化

準確稱量脂肪酸或樣品于25mL比色管中，準確加入1%硫酸-甲醇溶液2.0mL，于70℃水浴加熱60min。再加正己烷定容至10mL，振蕩，加水至25mL，振蕩，靜置24 h，吸取上層脂肪酸甲酯，進行GC-MS分析。

1.5 脂肪酸標準溶液的配制

選取常見的4種脂肪酸：棕櫚酸，硬脂酸，油酸，亞油酸。準確稱量4種脂肪酸的標準系列（7份）于25mL比色管中，按1.4配制成標準溶液，進行GC-MS分析。

2 結果與分析

2.1 4種脂肪酸的標準曲線

圖1為4種脂肪酸標準品的GC-MS總離子流圖，對GC-MS譜圖進行鑒定和定量分析，應用SHIMADZUGCMS solution Release2.10專業分析軟件。

圖1 4種脂肪酸標準品的GC-MS總離子流圖Fig.1 The TIC of GC-MS of the four standard substance of fatty acids

成分鑒定根據GC-MS檢測所得到的質譜信息，用質譜圖計算機檢索數據庫NIST 147數據庫進行檢索，通過與標準譜圖對照以及質譜碎片對峰的分析，確定每一個組分的化學結構[3]。采用計算機檢索與人工解析各峰相應的質譜圖，1-棕櫚酸，2-硬脂酸，3-油酸，4-亞油酸。

峰面積為縱坐標，質量為橫坐標，繪制四種脂肪酸的標準曲線，得到標準曲線方程及相關系數見表1。

2.2 樣品分析結果

圖2為椰子果肉中脂肪酸分析的GC-MS總離子流圖，通過與標準譜圖對照以及質譜碎片對峰的分析，確定1-棕櫚酸，2-硬脂酸，3-油酸。

表1 4種脂肪酸的標準曲線方程及相關系數Table1 The calibration curve equation and correlation coefficent of the four fatty acids

圖2 椰子果肉中脂肪酸分析的GC-MS總離子流圖Fig.2 The TIC of GC-MS of fatty acids from the coconut flesh

根據峰面積及表1的標準曲線方程得到椰子果肉中四種脂肪酸的含量見表2，棕櫚酸＞油酸＞硬脂酸，亞油酸未檢出。

表2 椰子果肉中4種脂肪酸的含量Table2 The content of four fatty acids from the coconut flesh mg/g

2.3 回收率與精密度

準確稱取樣品（5份）于25mL比色管中，分別都加入棕櫚酸、硬脂酸、油酸和亞油酸標準品，按1.4配制溶液，進行GC-MS分析，得到樣品的回收率與精密度見表3。

表3 四種脂肪酸的回收率與精密度Table3 The recovery and precision of four fatty acids

由表3可知，相對標準偏差RSD（n=5）在2.03%～10.25%之間，樣品回收率測定在77.0%～110.0%之間。

3 結論

GC-MS外標法分析椰子果肉中的脂肪酸含量，是絕對定量，需要標準樣品，做標準曲線，與GC-MS的峰面積歸一法相比，準確度較高。

[1]吳惠勤,黃曉蘭,林曉珊,等.脂肪酸的色譜保留時間規律與質譜特征研究及其在食品分析中的應用[J].分析化學,2007,35(7)：998-1003

[2]魏永生,鄭敏燕,耿薇,等.常用動、植物食用油中脂肪酸組成的分析[J].食品科學,2012,33(16)：188-193

[3]耿薇.新鮮椰子果肉脂肪酸成分的GC-MS分析[J].廣東化工, 2010,37(1)：122-123

[4] 楊春英,劉學銘,陳智毅,等.15種食用植物油脂肪酸的氣相色譜-質譜分析[J].食品科學,2013,34(6)：211-214

Fatty Acid Analysis of Coconut Flesh by GC-MS External Standard Method

GENG Wei，ZHENG Min-yan，WEI Yong-sheng，ZHANG Jun-cai
（College of Chemistry and Chemical Engineering，Xianyang Normal University，Xianyang712000，Shaanxi，China）

The fatty acid in coconut flesh were analyzed by GC-MS，using the external standard method to analyze quantitatively.There are different kinds of fatty acid in coconut flesh.The content of the four fatty acids in coconut flesh：Palmitic acid＞oleic acid＞stearic acid，Linoleic acid was not checked out.The RSD of results was between 2.03%and 10.25%.The recovery rate of sample was from 77.0%to110.0%.

external standard method；GC-MS；coconut flesh；fatty acid

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.06.025

2014-01-10

咸陽師范學院專項科研基金項目（14XSYK017）

耿薇（1982—），女（漢），工程師，碩士，主要從事分析測試方面的研究工作。